紅景天聯(lián)合刺五加對肝纖維化的保護(hù)作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:本文討論紅景天提取物、刺五加提取物和紅景天聯(lián)合刺五加提取物對肝纖維化的調(diào)控作用。
  方法:采用70%乙醇熱回流法提取紅景天及刺五加,條件為80℃恒溫水浴,提取2次(第一次料液比為1:10,第二次料液比為1:8),每次1.5h。通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)來探討紅景天提取物、刺五加提取物以及紅景天聯(lián)合刺五加提取物對肝纖維化的保護(hù)作用。體外實(shí)驗(yàn)通過MTT實(shí)驗(yàn),測定不同濃度(1280、640、320、160、80、40、20、10、0

2、 ug/mL)的三種提取物對t-HSC細(xì)胞活力的影響;將細(xì)胞給藥濃度設(shè)定為為80ug/mL、160ug/mL,通過Western Blotting免疫蛋白印跡實(shí)驗(yàn)來評估t-HSC細(xì)胞中Bax、Bcl-2、XIAP、FLIPL、Caspas-3、Caspase-8、Csapase-9的表達(dá)。體外實(shí)驗(yàn)通過對ICR小鼠腹腔注射TAA溶液,前1周100mg/kg,注射3次,后4周200mg/kg,每周3次,連續(xù)5周,制作小鼠肝纖維化模型。分別灌

3、胃給予小鼠不同劑量(100 mg/kg、200mg/kg、300mg/kg)的提取物,每天1次,連續(xù)5周。采集血清和肝臟存于-80℃。用自動(dòng)生化分析儀測定血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活性的變化及肝質(zhì)量指數(shù),并用病理組織切片來觀察三種提取物對小鼠肝纖維化的保護(hù)作用。
  結(jié)果:紅景天,刺五加,紅景天聯(lián)合刺五加的浸膏得率分別為:5.12%,2.64%,5.51%。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)通過MTT結(jié)果表明,三種提取物

4、均能在一定程度上抑制t-HSC細(xì)胞的增殖,其中紅景天聯(lián)合刺五加提取物在80-160ug/mL時(shí)對抑制t-HSC細(xì)胞的增殖效果顯著;通過Western Blotting免疫蛋白印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,紅景天聯(lián)合刺五加提取物對t-HSC細(xì)胞因子的影響,能有效抑制t-HSC細(xì)胞中Bcl-2,XIAP的表達(dá),同時(shí)促進(jìn)Bax,F(xiàn)LIPL,Caspase-3,8,9的活力升高。體外實(shí)驗(yàn)根據(jù)實(shí)驗(yàn)中選用造模劑量,可成功構(gòu)建硫代乙酰胺(TAA)肝纖維化模型,紅

5、景天聯(lián)合刺五加提取物可明顯抑制肝纖維化小鼠血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活性升高;同時(shí)可降低肝纖維化小鼠的肝質(zhì)量指數(shù),結(jié)果顯示出,紅景天聯(lián)合刺五加提取物具有較好的肝保護(hù)能力。
  結(jié)論:通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明,紅景天提取物、刺五加提取物、紅景天聯(lián)合刺五加提取物對t-HSC細(xì)胞的增殖具有抑制作用,對硫代乙酰胺(TAA)引起的肝纖維化具有良好的保護(hù)作用。紅景天聯(lián)合刺五加提取物具有更好的抗肝纖

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