丹酚酸B通過PPARα抑制2型糖尿病小鼠的心肌肥厚.pdf

1、研究背景:
　　近年來，2型糖尿病的病發(fā)率呈爆炸性增長的趨勢，并已占糖尿病患病人數(shù)的90％以上，而在眾多的并發(fā)癥中，三分之二的患者死于心血管系統(tǒng)疾病，已成為全球公共衛(wèi)生問題之一。其中，糖尿病心肌病是患者心力衰竭的主要原因之一，患者的心肌病理異常改變主要表現(xiàn)為心肌肥厚、心肌細胞凋亡和心肌間質(zhì)纖維化。高糖持續(xù)刺激下，血管內(nèi)皮細胞出現(xiàn)不同程度的損傷，繼而出現(xiàn)動脈粥樣硬化，心室重構(gòu)，接著發(fā)生心室擴張，最終導(dǎo)致心肌梗死，心力衰竭等終末期心臟

2、病直至死亡。由此我們可得出這樣的結(jié)論:心肌肥厚是糖尿病心肌病(DCM)發(fā)生發(fā)展的初始機制，同樣也是最關(guān)鍵的機制之一。
　　有關(guān)研究顯示，糖尿病心肌病引起的心肌肥厚與PPARα密切相關(guān)。PPARα是脂質(zhì)代謝的關(guān)鍵性轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，脂肪酸β及ω代謝相關(guān)基因表達的關(guān)鍵酶都是PPARα的作用靶點。眾所周知，脂肪酸是心肌細胞主要的供能物質(zhì)，糖尿病狀態(tài)下，糖脂代謝發(fā)生紊亂，細胞能量供應(yīng)機制改變，心肌肥厚。因此，對其發(fā)病機制、預(yù)防和治療方法的深入

3、探討與研究尤為重要。
　　近年來，隨著衛(wèi)生事業(yè)的發(fā)展，傳統(tǒng)中藥材已廣泛應(yīng)用于臨床，從中藥丹參中提取出來的藥用成分丹酚酸B(Sal B)，在心腦血管疾病的預(yù)防保健和臨床治療中發(fā)揮著日益重要的作用。已有研究證實，丹酚酸B可清除氧自由基，影響Na-K-ATP酶的活性，其抗脂質(zhì)過氧化的作用是維生素E的1000倍，是目前所知抗氧化作用最強的天然物質(zhì)之一，而丹酚酸B是否可以改善心肌損傷，通過何種機制發(fā)揮作用，對2型糖尿病是否也具有調(diào)控作用尚無

4、明確報道。針對這些問題我們提出假設(shè):丹酚酸B可以保護2型糖尿病引起的心肌肥厚，其機制與PPARα相關(guān)。
　　研究目的:
　　1.研究丹酚酸B(Salvianolic Acid B，Sal B)對高糖高胰島素(high glucose andinsulin，HGI)誘導(dǎo)心肌細胞肥大及2型糖尿病(T2DM)小鼠心肌肥大的影響;
　　2.從過氧化物酶體增殖物激活受體α(peroxisome proliferator acti

5、vated receptors-a,PPARa)的角度探討丹酚酸B改善糖尿病心肌病的機制。
　　研究方法:
　　采用高脂高糖飲食聯(lián)合鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)腹腔注射法建立2型糖尿病(T2DM)小鼠模型。實驗動物分組如下:對照組(control)，2型糖尿病模型組(T2DM)，2型糖尿病+丹酚酸B組(T2DM+Sal B)，丹酚酸B組(Sal B)。control組和Sal B組采取普通飼料喂養(yǎng)，T2

6、DM組和T2DM+Sal B組采用高脂高糖飼料喂養(yǎng)，Sal B處理組小鼠以Sal B(100mg/kg)灌胃8周，實驗過程中記錄不同處理組小鼠生理指標（體重，血糖，心臟重量脛骨長度等），腹腔葡萄糖耐量(IPGTT)檢測Sal B對胰島素抵抗的影響，石蠟切片WGA染色測量心肌細胞大小，Western Blot法檢測PPARα蛋白表達水平。體外培養(yǎng)乳鼠心肌細胞(neonatal ratcardiomyocytes，NRCM)，模擬高糖高胰島

7、素血癥環(huán)境[(high glucose andinsulin，HGI) glucose25.5mmol/l+insulin0.1umol/l]誘導(dǎo)心肌肥大，加入不同濃度(1uM，10uM，100uM) Sal B及PPARa抑制劑MK886，觀察相關(guān)指標（心肌細胞表面積、LDH細胞活性、3H-亮氨酸摻入率、3H-D-葡萄糖摻入率、PPARa蛋白表達）的變化。
　　研究結(jié)果:
　　1.與T2DM模型組小鼠相關(guān)指標對比，Sal

8、B能減輕T2DM模型小鼠的心臟重量，縮小心肌橫截面積，顯著降低小鼠空腹血糖水平，改善糖耐量異常，上調(diào)PPARα的表達水平。
　　2.在體外培養(yǎng)的乳鼠心肌細胞中，Sal B(10-100μM)能濃度依賴性地抑制HGI誘導(dǎo)的心肌表面積、亮氨酸摻入率的增加及PPARα表達的下調(diào)，但該抑制作用能夠被PPARα抑制劑MK886所消除。
　　研究結(jié)論:
　　Sal B能夠抑制2型糖尿病小鼠心肌肥厚，機制與上調(diào)PPARα表達、改善胰