BMP-2微球與骨髓間充質(zhì)干細胞聯(lián)合脫細胞羊膜修復(fù)兔下頜缺損的實驗研究.pdf

1、背景:
　　骨缺損是常見的臨床問題，通常由創(chuàng)傷、疾病或手術(shù)等原因造成。骨缺損的修復(fù)方法主要包括自體骨移植、異體骨移植和異種骨移植，但存在不同程度的骨吸收和取骨區(qū)并發(fā)癥、排異及感染等問題。而組織工程骨的尚未在臨床廣泛應(yīng)用，還處于實驗階段。上個世紀口腔科提出誘導(dǎo)再生技術(shù)中應(yīng)用誘導(dǎo)成骨膜能夠促進骨缺損的修復(fù)，其中的膜性材料眾多，研究中也發(fā)現(xiàn)一些不足之處，比如材料的外露、不可降解、制造工藝復(fù)雜等等。本研究從誘導(dǎo)再生技術(shù)出發(fā)，提出以羊膜基質(zhì)

2、作為支架，復(fù)合BMP-2微球構(gòu)建了具有緩釋BMP-2功能的成骨誘導(dǎo)膜性材料，并探索其體外對骨髓間充質(zhì)干細胞成骨作用和體內(nèi)修復(fù)下頜骨缺損的可行性。羊膜基質(zhì)獲得和制作方便簡單，而且具有許多生物特性，是良好的生物敷料和支架，在組織修復(fù)和重建方面應(yīng)用廣泛。將羊膜基質(zhì)攜載BMP-2微球提高了該成骨誘導(dǎo)膜性材料的誘導(dǎo)成骨能力，在修復(fù)下頜骨缺損乃至其他部位骨缺損都有良好的應(yīng)用前景。
　　目的:
　　構(gòu)建以脫細胞羊膜基質(zhì)為支架，復(fù)合BMP-

3、2微球形成新型的誘導(dǎo)成骨材料。通過研究其對骨髓間充質(zhì)干細胞成骨能力的影響和其對頜骨缺損動物模型的修復(fù)能力，為修復(fù)下頜骨缺損乃至其他部位骨缺損探索一種新的治療方法。
　　方法:
　　本研究首先制備人脫細胞羊膜基質(zhì)，固定后行HE染色，證實細胞成分徹底去除;應(yīng)用掃描電鏡觀察人脫細胞羊膜的結(jié)構(gòu)特征;制備BMP-2緩釋微球并測定其結(jié)構(gòu)、載藥量及緩釋曲線;抽取兔股骨骨髓以全骨髓培養(yǎng)法分離培養(yǎng)兔骨髓間充質(zhì)干細胞，進行成骨及成脂誘導(dǎo)分化及測

4、定，并以脫細胞羊膜基質(zhì)為支架進行復(fù)合培養(yǎng)，對其進行HE染色劑及掃描電鏡檢測;動物實驗分為脫細胞羊膜復(fù)合BMP-2微球聯(lián)合兔骨髓間充質(zhì)干細胞組（實驗組）與空白對照組。
　　結(jié)果:
　　采用酶消化法制備的脫細胞羊膜基質(zhì)無細胞殘留，且保有致密多孔三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。明膠瓊脂載藥微球能夠有效地起到緩釋藥物的作用，并且微球形狀均勻飽滿。全骨髓培養(yǎng)法分離培養(yǎng)的兔骨髓間充質(zhì)干細胞具有成骨、成脂的分化能力，并且能夠在HAMM表面生長增殖。實驗動物

5、分為實驗組與對照組，對實驗兔下頜骨制作1cm×1cm大小骨缺損模型。實驗組的兔下頜骨缺損采用BMP-2微球與BMSCs聯(lián)合脫細胞羊膜的方法填充修復(fù)，通過術(shù)后影像學(xué)及組織學(xué)的檢測分析比較發(fā)現(xiàn)，該方法能夠有效地促進骨缺損的修復(fù)。
　　結(jié)論:
　　脫細胞羊膜基質(zhì)具有良好的細胞相容性，對細胞的生長增殖及分化無明顯抑制作用。兔BMSCs經(jīng)過成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)后表達成骨細胞表型，可作為骨組織工程的理想種子細胞之一。BMP-2微球與BMSC聯(lián)合