類植物乳桿菌所產(chǎn)活性物質(zhì)LPX-600的研究.pdf

1、從辣白菜、酸奶等12種發(fā)酵食品中分離出420株乳酸菌，通過瓊脂點(diǎn)擴(kuò)散交叉拮抗試驗(yàn)從中篩選出一株對(duì)沙門氏菌有明顯抗性的乳酸菌，該菌株菌落較小、圓形、淡乳白色、邊緣整齊光滑，單生、成對(duì)生或短鏈狀，兼性厭氧；革蘭氏染色呈陽(yáng)性、無(wú)芽孢。經(jīng)API生理生化反應(yīng)、16SrDNA同源性分析鑒定該菌株為類植物乳桿菌X-600。 通過硫酸銨沉淀或正丁醇提取、陽(yáng)離子交換層析、凝膠過濾、反相高效液相色譜等分離純化過程，從類植物乳桿菌的發(fā)酵液中分離純化出

2、一種活性物質(zhì)LPX-600。比較硫酸銨沉淀和正丁醇提取兩種粗提方法發(fā)現(xiàn)，相比于硫酸銨沉淀，正丁醇提取活性物質(zhì)的效果更好，兩種分離方法最終的活力回收率分別為1.02﹪和0.54﹪。純化的活性物質(zhì)經(jīng)高效液相鑒定其純度達(dá)到95﹪以上，經(jīng)透析和凝膠過濾層析判斷其分子量大約在600～1,000Da。 LPX-600在酸性條件下活性較高，對(duì)熱穩(wěn)定(121℃，15min部分失活)，在蛋白酶K、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶作用下不失活，TricineS

3、DS-PAGE檢測(cè)發(fā)現(xiàn)凝膠上沒有清晰的條帶，因此判斷該活性物質(zhì)不是蛋白或多肽，LPX-600抑菌譜較寬，對(duì)沙門氏菌、變形桿菌、金黃色葡萄球菌、粘性沙雷氏菌、肺炎克雷伯氏菌等多種革蘭氏陽(yáng)性和陰性致病菌有很強(qiáng)的抑菌活性，與乳酸鏈球菌素、乳酸、檸檬酸相比，LPX-600對(duì)沙門氏菌具有更明顯的抑菌效果。 將類植物乳桿菌發(fā)酵液噴灑于接種沙門氏菌的新鮮豬肉上，分別在常溫和低溫貯藏，在貯藏期間，抽樣考察發(fā)酵液對(duì)新鮮豬肉的抑菌效果，并對(duì)豬肉的p

4、H、水分含量、感官質(zhì)量等指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果表明：發(fā)酵液在常溫和低溫時(shí)均能夠顯著抑制沙門氏菌的生長(zhǎng)；與對(duì)照組相比，經(jīng)發(fā)酵液處理的豬肉表面顯微酸性，豬肉的水分含量隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)略有降低，發(fā)酵液對(duì)新鮮豬肉的感官質(zhì)量無(wú)不良影響，經(jīng)發(fā)酵液處理的豬肉的感官質(zhì)量要明顯好于未經(jīng)處理的豬肉。綜合考察不同濃度的類植物乳桿菌發(fā)酵液的作用效果，發(fā)現(xiàn)2倍稀釋的類植物乳桿菌發(fā)酵液為最適濃度，能夠有效抑制沙門氏菌的生長(zhǎng)，延長(zhǎng)豬肉的貨架期，而且可以改善豬肉的風(fēng)味和感