高肺血流性肺動脈高壓大鼠肺動脈平滑肌細胞TMEM16A的表達與肺動脈收縮力的關(guān)系.pdf

1、目的:研究高肺血流性肺動脈高壓大鼠肺動脈平滑肌細胞(pulmonaryarterial smooth muscle cells，PASMCs)中跨膜蛋白16a(transmembraneprotein16a，TMEM16A)的表達以及與肺動脈收縮力的關(guān)系。
　　方法:將雌雄不分的24只SD大鼠隨機分為3組:模型組(n=8)、假手術(shù)組(n=8)、正常組(n=8)。模型組大鼠用腹主動脈-下腔靜脈造瘺法建立左向右分流的高肺血流性肺動脈高

2、壓大鼠模型;假手術(shù)組大鼠行簡單開關(guān)腹手術(shù);正常組大鼠不作特殊處理。所有組別大鼠同等條件下飼養(yǎng)11周后取肺組織并制作病理切片鑒定肺動脈高壓是否形成。分離肺動脈，測定動脈張力并用TMEM16A特異性阻滯劑對分離的肺動脈進行離體干預;用肺動脈提取平滑肌細胞RNA與蛋白，采用實時熒光定量PCR，蛋白免疫印跡法(western blotting，WB)檢測細胞TMEM16A mRNA和蛋白的表達，分析PASMCs中TMEM16A的表達與肺動脈張力

3、的關(guān)系。
　　結(jié)果:1.高肺血流性肺動脈高壓模型:模型組大鼠肺組織在光學顯微鏡下可見典型肺動脈高壓病理改變，而正常組與假手術(shù)組大鼠肺組織無明顯肺動脈高壓病理改變;2.肺動脈平滑肌細胞TMEM16A mRNA的表達:模型組(2.77±0.24)高于正常組(1.00±0.00)，t=16.09，P＜0.05;模型組(2.77±0.24)高于假手術(shù)組(0.91±0.04)，t=16.91，P＜0.05，但正常組與假手術(shù)組差異無統(tǒng)計學意義

4、，t=0.82，P＞0.05;3.肺動脈平滑肌細胞TMEM16A蛋白的表達:模型組(0.70±0.19)高于正常組(0.20±0.12)，t=7.14，P＜0.05，模型組(0.70±0.19)高于假手術(shù)組(0.25±0.08)，t=6.43，P＜0.05，但正常組與假手術(shù)組差異無統(tǒng)計學意義，t=0.71，P＞0.05;4.肺動脈張力:模型組(5.75±1.39)高于正常組(2.81±0.53)，t=6.44，P＜0.05，模型組(5.

5、75±1.39)高于假手術(shù)組(2.84±0.49)，t=6.44，P＜0.05，但正常組與假手術(shù)組差異無統(tǒng)計學意義，t=0.06，P＞0.05;5.應用TMEM16A特異性阻滯劑T16Ainh-A01干預收縮的肺動脈，各組動脈收縮力下降比率:模型組[(66.85±5.97)％]高于正常組[(46.05±10.82)％]，t=5.25，P＜0.05，模型組[(66.85±5.97)％]高于假手術(shù)組[(46.40±6.66)％]，t=5.0