人表皮細胞與角膜上皮細胞蛋白質(zhì)組的差異表達初步研究.pdf

1、同體或異體角膜移植、同體或異體角膜緣上皮細胞移植，都存在材料來源有限和免疫排斥等缺陷。利用表皮干細胞橫向分化產(chǎn)生角膜上皮細胞，為構(gòu)建組織工程角膜提供種子細胞，在技術(shù)層面上已有一定的積累，但是關(guān)于橫向分化的分子機制依然不清楚。目前國內(nèi)外關(guān)于人表皮細胞與人角膜上皮細胞蛋白質(zhì)組學研究未見報道。本文應(yīng)用蛋白質(zhì)組技術(shù)比較表皮細胞與角膜上皮細胞之間的蛋白質(zhì)表達差異，旨在揭示成體干細胞橫向分化的分子機制以及為篩選表皮細胞與角膜上皮細胞的差異分子標簽提

2、供參考。 本論文首先分離和培養(yǎng)了人表皮細胞與角膜上皮細胞，然后，應(yīng)用蛋白質(zhì)雙向凝膠電泳分別對人表皮細胞與角膜上皮細胞總蛋白進行蛋白質(zhì)組學分析，用基質(zhì)輔助激光解吸附/電離飛行時間串級質(zhì)譜法(MALDI-TOF-MS/MS)鑒定差異蛋白，獲得人表皮細胞與角膜上皮細胞蛋白質(zhì)600余個清晰的蛋白質(zhì)斑點。結(jié)果表明人表皮細胞與角膜上皮細胞在蛋白質(zhì)表達上有較高的相似性以及較好的可比性；在比較分析出的26個差異點中，初步鑒定出四個差異表達蛋白

3、，分別是Chlorideintracellular channel 1 (細胞內(nèi)氯離子通道1)、Psoriasin、Chain D，HumanB Lactate Dehydrogenase (乳酸脫氫酶B) 和 serine (or cysteine) proteinaseinhibitor (絲氨酸蛋白酶抑制因子)；對四個蛋白的可能功能進行了初步分析。本實驗為探索表皮細胞橫向分化成角膜上皮細胞的分子機制做出了有益的嘗試，并提供了具有一