轉(zhuǎn)錄因子HMBOX1與高級別漿液性卵巢癌發(fā)生發(fā)展之間的關(guān)系.pdf

1、目的:
　　卵巢癌作為常見的婦女生殖器官癌癥之一，由于缺乏有效的早期診療手段和較易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，其死亡率仍高居婦科癌癥之首，5年生存率很低。依據(jù)組織學(xué)類型的不同，上皮性卵巢癌可分為漿液性癌、黏液性癌、子宮內(nèi)膜樣癌、透明細(xì)胞癌、移行細(xì)胞癌等類型。在上皮性卵巢癌不同類型中，漿液性卵巢癌最為常見。高級別漿液性卵巢癌是上皮性卵巢癌中常見的一種。傳統(tǒng)的研究觀點(diǎn)認(rèn)為卵巢癌起源于卵巢上皮組織，近年來有研究提出高級別漿液性卵巢癌很可能來自遠(yuǎn)端的輸

2、卵管上皮。鑒于高級別漿液性卵巢癌是卵巢癌患者死亡的主要原因，明確高級別漿液性卵巢癌發(fā)病的機(jī)制以及尋找針對卵巢癌的新的治療靶點(diǎn)已成為婦科腫瘤研究中一項(xiàng)有價值而且有必要的任務(wù)。
　　同源異形盒基因作為一類轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子在調(diào)控胚胎調(diào)控組織器官發(fā)育以及細(xì)胞的增殖和生長過程中起著重要作用。近年來研究顯示，同源異形盒基因還參與某些腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，其中肝細(xì)胞核因子(HNF)家族基因和癌癥關(guān)系的研究正逐漸引起人們的注意。HMBOX1基因是HNF家

3、族的成員。HMBOX1基因高度保守，與HNF家族其他分子有很高的同源性。研究證實(shí)HMBOX1基因廣泛表達(dá)于人體至少18種組織器官。研究發(fā)現(xiàn)，HMBOX1表達(dá)增高可能通過NKG2D/DAP10信號通路抑制NK細(xì)胞的殺傷活性。HMBOX1在骨髓間質(zhì)細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞的分化過程中起著關(guān)鍵的調(diào)控作用。有研究指出HMBOX1可能與腫瘤發(fā)生有關(guān)，但是關(guān)于HMBOX1與卵巢癌之間關(guān)系的研究尚未有報道。
　　本研究目的在于檢測HMBOX1在高級別

4、漿液性卵巢癌中的表達(dá)，并研究不同上皮性卵巢癌細(xì)胞系中HMBOX1的表達(dá)量與卵巢癌細(xì)胞生物學(xué)行為之間是否相關(guān)，為進(jìn)一步探索HMBOX1的功能及其與卵巢癌發(fā)生發(fā)展之間的關(guān)系奠定基礎(chǔ)。
　　方法:
　　1.運(yùn)用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)、Western blot技術(shù)和免疫組化技術(shù)檢測正常卵巢上皮、正常輸卵管傘上皮、交界性漿液性卵巢腫瘤和高級別漿液性卵巢癌組織中HMBOX1的表達(dá)水平。運(yùn)用熒光定量PCR技術(shù)和Western blot技術(shù)

5、檢測了卵巢正常上皮細(xì)胞系(HOSEpiC)和上皮性卵巢癌細(xì)胞系(HO8910，A2780和SKOV3)中HMBOX1的表達(dá)量。
　　2.采用MTT實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖能力，采用平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞克隆形成能力。為了檢測細(xì)胞侵襲和遷移能力，我們分別采用了Transwell基質(zhì)膠實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)，并采用流式細(xì)胞術(shù)來檢測細(xì)胞周期。
　　3.運(yùn)用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)檢測細(xì)胞周期調(diào)控基因的相對表達(dá)量。
　　結(jié)果:
　　1.

6、與正常卵巢上皮組織相比，HMBOX1在高級別漿液性卵巢癌組織中呈低表達(dá);與正常上皮細(xì)胞系HOSEpiC相比，HMBOX1在卵巢癌細(xì)胞系HO8910和A2780中的表達(dá)水平較低。
　　2.通過觀察不同細(xì)胞系的生物學(xué)行為，我們發(fā)現(xiàn)不同細(xì)胞中HMBOX1的表達(dá)量與細(xì)胞的增殖能力有一定的相關(guān)性，而與細(xì)胞遷移和細(xì)胞侵襲能力無關(guān)。
　　3.HMBOX1可能與卵巢癌細(xì)胞周期調(diào)控基因Cyclin D1、Cyclin El呈一定的相關(guān)性。