大鼠腰椎間盤自然退變過程中YAP表達(dá)的初步研究.pdf

1、目的:
　　本實驗通過檢測不同年齡組SD大鼠腰椎間盤組織中YAP的表達(dá)情況，來比較分析不同年齡組大鼠腰椎間盤組織中YAP表達(dá)水平的差異，以及YAP表達(dá)水平與大鼠腰椎間盤退變程度等級之間的相關(guān)性。初步探討分析YAP在大鼠腰椎間盤自然退變過程中的作用與意義。
　　方法:
　　分別取6周齡、6月齡、12月齡SPF級SD大鼠各10只，將各年齡組的SD大鼠分為組織切片組（6周齡、6月齡、12月齡各5只）和蛋白提取組(6周齡、6月

2、齡、12月齡各5只)。組織切片組大鼠獲取其腰4/5、腰5/6節(jié)段椎間盤組織，行HE染色觀察大鼠腰椎間盤的組織學(xué)退變程度，并進(jìn)行大鼠腰椎間盤退變程度的等級分級評估;用免疫組化染色方法檢測大鼠腰椎間盤組織中YAP和磷酸化YAP的表達(dá)情況;采用單因素方差分析的統(tǒng)計學(xué)分析方法，比較分析三個年齡組之間的YAP和磷酸化YAP表達(dá)水平的差異，采用Spearman等級相關(guān)分析的方法，比較分析YAP和磷酸化YAP表達(dá)水平與大鼠腰椎間盤退變等級之間的相關(guān)性

3、。蛋白提取組大鼠分別獲取腰4/5、腰5/6節(jié)段椎間盤髓核組織，提取組織蛋白，用Western Blot方法檢測大鼠髓核組織中YAP和磷酸化YAP的表達(dá)情況;采用單因素方差分析的統(tǒng)計分析方法，比較分析三個年齡組之間的YAP和磷酸化YAP表達(dá)水平的差異。
　　結(jié)果:
　　1.免疫組化染色結(jié)果:(1)隨著大鼠年齡的增加，YAP在腰椎間盤組織中的表達(dá)水平逐漸降低，且不同年齡組之間YAP的表達(dá)水平有差異，各年齡組之間兩兩比較，差異均有

4、統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。(2)隨著大鼠年齡的增加，磷酸化YAP在腰椎間盤組織中的表達(dá)水平逐漸升高，且不同年齡組之間磷酸化YAP的表達(dá)水平有差異，各年齡組之間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。(3) YAP在大鼠腰椎間盤組織中的表達(dá)水平與大鼠腰椎間盤退變等級之間，呈顯著負(fù)相關(guān)性(r=-0.804，P＜0.01，呈顯著相關(guān))。(4)磷酸化YAP在大鼠腰椎間盤組織中的表達(dá)水平與大鼠腰椎間盤退變等級之間，呈顯著正相關(guān)性(r=0.

5、850，P＜0.01，呈顯著相關(guān))。
　　2.Western Blot結(jié)果:(1)隨著大鼠年齡的增加，YAP在髓核組織中的表達(dá)水平逐漸降低，且不同年齡組之間YAP的表達(dá)水平有差異，各年齡組之間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。(2)隨著大鼠年齡的增加，磷酸化YAP在髓核組織中的表達(dá)水平逐漸升高，且不同年齡組之間磷酸化YAP的表達(dá)水平有差異，各年齡組之間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論: