鬼針草對雄激素缺乏性干眼大鼠眼表和淚腺的作用機制.pdf

1、目的:研究鬼針草水提物對雄激素缺乏性干眼大鼠眼表和淚腺的保護機制。
　　方法:健康雌性Wistar大鼠24只，實驗分為四組:正常對照組、生理鹽水組、模型組、鬼針草治療組，每組各6只。正常對照組:不做任何處理。生理鹽水組:每100g體重0.5ml生理鹽水灌胃，每日給藥一次，連續(xù)4周。模型組:非那雄胺（1.16mg/kg/天）灌胃，每天一次，連續(xù)4周。鬼針草治療組:除非那雄胺組灌胃外，另以每100g體重0.5ml的鬼針草水提取物(濃度

2、0.1g/mL)灌胃，每天一次，連續(xù)4周。實驗數(shù)據(jù)收集和標本采集時間為:各實驗組分別于實驗前、實驗后7天、14天、21天及28天行酚紅棉線、淚膜破裂時間、角膜熒光素染色評分檢查，并在實驗第28天取大鼠淚腺及角膜組織行細胞因子抗體芯片技術(shù)檢測，根據(jù)細胞因子抗體芯片檢測結(jié)果進一步行淚腺Western blot分析，并于光學(xué)顯微鏡下觀察淚腺及角膜組織形態(tài)。
　　結(jié)果:①非那雄胺組大鼠較對照組淚液分泌減少、淚膜破裂時間縮短、高熒光素染色評

3、分，淚腺有顯著的炎細胞浸潤。鬼針草治療組大鼠與非那雄胺組對比，淚液分泌增加、淚膜破裂時間延長、角膜熒光素染色評分降低，并且淚腺結(jié)構(gòu)較完整、幾乎未見明顯的淋巴細胞浸潤。②利用細胞因子抗體芯片技術(shù)檢測結(jié)果顯示，非那雄胺組較對照組淚腺中22種細胞因子的表達水平顯著改變，其中大多數(shù)細胞因子是炎癥因子和趨化因子。15種細胞因子（IL-1β,IL-6,IFN-γ,Fas L,GM-CSF, TNF-α,IL-4,IL-10,CNTF,B7-2/Cd

4、86,Leptin,MMP-8，TIMP-1，L-selection及ICAM-1）的表達明顯增加。在高表達的細胞因子中，IL-1β，IL-6，GM-CSF及TNF-α為促炎因子，IL-4和IL-10為抗炎因子。上述細胞因子在鬼針草組表達明顯低于非那雄胺組。鬼針草組與對照組相比，細胞因子在淚腺中的表達無顯著差異。非那雄胺組大鼠角膜中6種細胞因子的表達水平顯著高于對照組，包括Fsa L，IL-13，PDGF-AA，B7-2/Cd86，TI

5、MP-1及Prolactin R。鬼針草組角膜中細胞因子的表達與對照組相比均無顯著差異。③用Western blot分析淚腺中的高表達細胞因子（B7-2/Cd86，MMP-8，TIMP-1，IL-1β，IL-4，IL-6，IL-10，F(xiàn)asL及TNF-α）結(jié)果顯示，非那雄胺組中MMP-8，IL-1β，IL-4，IL-6，IL-10，F(xiàn)asL及TNF-α表達水平均顯著高于對照組(P＜0.05或P＜0.01)。B7-2/CD86和TIMP-