針刺對兔干眼模型眼表損害及淚腺細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的:通過皮下注射氫溴酸東莨菪堿注射液建立水液缺乏性兔干眼模型，探討針刺對此模型眼表及淚腺細(xì)胞的影響，探索針刺對干眼的作用機(jī)制。
　　方法:健康新西蘭白兔24只隨機(jī)分為空白組、模型組、針刺組共3組，每組8只，空白組不作任何處理;模型組和針刺組皮下注射氫溴酸東莨菪堿，每日4次，每次2 mg·kg-1，直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束;針刺組在干眼模型建立成功后進(jìn)行針刺，每日針1次，共14天。不同時(shí)段觀察各組的SchirmerⅠ試驗(yàn)(SIT)、淚膜破裂時(shí)

2、間(BUT)、角膜熒光素鈉染色(CFS)，光鏡、電鏡觀察淚腺形態(tài)學(xué)變化，免疫組化檢測淚腺組織中凋亡相關(guān)基因蛋白的表達(dá)，聯(lián)酶免疫法檢測淚腺組織中乙酰膽堿(ACh)的含量。
　　結(jié)果:
　　1.SIT:針刺第4、7、14天，針刺組與模型組相比，兩組淚流量差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。針刺第14天，針刺組與實(shí)驗(yàn)前相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2.BUT:針刺第7、14天，針刺組與模型組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

3、義(P＜0.05)。針刺第14天，針刺組與實(shí)驗(yàn)前相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　3.CFS:針刺第7、14天，針刺組與模型組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。針刺組在針刺后的各時(shí)段與針刺前相比，差異顯著(P＜0.05)，且在針刺第4天時(shí)，CFS評分最高，此后即呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢。
　　4.淚腺形態(tài)學(xué)觀察:空白組的正常淚腺組織中未見明顯細(xì)胞擴(kuò)張及萎縮;模型組的淚腺上皮細(xì)胞萎縮，細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)較少，可見大量淋巴細(xì)胞

4、浸潤;針刺組中淚腺柱狀上皮細(xì)胞擴(kuò)張，未見明顯腺體萎縮，胞漿豐富，腺體間質(zhì)少量淋巴細(xì)胞浸潤。
　　5.淚腺組織凋亡相關(guān)基因蛋白的表達(dá):空白組中偶見陽性細(xì)胞表達(dá)，模型組可見大量淡黃色至棕黃色細(xì)顆粒細(xì)胞，針刺組中見少量淡黃色至棕黃色細(xì)顆粒細(xì)胞;針刺組淚腺細(xì)胞凋亡因子相關(guān)基因蛋白Bax、Fas及FasL陽性表達(dá)的細(xì)胞數(shù)明顯低于模型組，P＜0.05;針刺組的Bax/Bcl_2、Fas/FasL與空白組均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＞0.05。
　

5、　6.淚腺中Ach含量測定:針刺組淚腺組織中Ach含量較模型組高，差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05;且針刺組與空白組相比時(shí)，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05。
　　結(jié)論:
　　1、皮下注射氫溴酸東莨菪堿可以成功制備兔干眼模型，且穩(wěn)定持續(xù)。
　　2、光鏡、電鏡下觀察模型組淚腺組織可見淚腺上皮細(xì)胞萎縮，細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)較少，可見大量淋巴細(xì)胞浸潤。針刺組的淚腺細(xì)胞胞漿豐富，排列緊密，活動(dòng)良好，與空白組接近。
　　3、針刺