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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
研究白藜蘆醇對(duì)補(bǔ)體旁路激活致人微血管內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)中相關(guān)黏附分子表達(dá)的干預(yù)作用和可能的作用機(jī)制。
方法:
采用眼鏡蛇毒因子(CVF)與正常人血清進(jìn)行孵育,再將孵育產(chǎn)物作用于人微血管內(nèi)皮細(xì)胞,通過(guò)TBA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中MDA的濃度,以WST-8法檢測(cè)總SOD酶活力,并檢測(cè)不同濃度的白藜蘆醇預(yù)處理后的干預(yù)作用。利用ELISA方法檢測(cè)黏附分子P-selectin、ICAM-1、VCAM-1、E-s
2、electin的表達(dá)水平,并利用多個(gè)濃度的白藜蘆醇、PDTC和AG490預(yù)處理內(nèi)皮細(xì)胞,檢測(cè)3種抑制劑對(duì)補(bǔ)體旁路激活致黏附分子表達(dá)水平的干預(yù)作用。利用Western blot檢測(cè)補(bǔ)體旁路激活后作用于內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)NF-κB p65的磷酸化作用,并對(duì)白藜蘆醇、PDTC和AG490的干預(yù)作用進(jìn)行檢測(cè)。
結(jié)果:
補(bǔ)體旁路途徑的激活導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞活化,引起NF-κB p65的磷酸化,導(dǎo)致細(xì)胞氧化水平增高和黏附分子P-selecti
3、n、ICAM-1、VCAM-1、E-selectin的表達(dá)上調(diào)。白藜蘆醇可抑制MDA濃度的升高,輕微抑制總SOD酶活力,降低細(xì)胞氧化應(yīng)激水平。白藜蘆醇與PDTC都可以降低內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1和VCAM-1的表達(dá),并抑制NF-κB p65的磷酸化,對(duì)P-selectin和E-selectin的表達(dá)有輕微的抑制作用。JAK2信號(hào)通路的特異性抑制劑AG490能明顯抑制4種黏附分子的表達(dá)。
結(jié)論:
白藜蘆醇能夠有效抑制補(bǔ)體旁
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