捏脊療法對頸椎病模型大鼠椎間盤軟骨細(xì)胞外基質(zhì)及基質(zhì)金屬蛋白酶的影響.pdf

1、目的:觀察捏脊療法對頸椎病模型大鼠椎間盤軟骨細(xì)胞外基質(zhì)代謝及MMPs/TIMPs的影響。
　　方法:40只健康的SD大鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為假手術(shù)對照組（簡稱假手術(shù)組）10只，造模組30只。造模組參照動(dòng)靜力失衡性頸椎間盤退變的造模方法進(jìn)行造模;假手術(shù)組僅是將皮膚切開后直接縫合，并沒有切斷肌肉組織，僅當(dāng)作空白對照。造模后的大鼠常規(guī)給予飼養(yǎng)3個(gè)月，再采用甲苯胺藍(lán)進(jìn)行染色，通過觀察椎間盤組織的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)改變，來判斷造模的成功與否。確定造

2、模成功后將造模組的大鼠，按照隨機(jī)數(shù)字表法，分成模型對照組（簡稱模型組）、模型捏脊組（捏脊組）、模型莫比可組（簡稱莫比可組），每組各8只。捏脊組大鼠采用自制的松緊帶進(jìn)行固定，捏脊治療手法如下:用一只手固定好大鼠而另一只手的示指與拇指的指腹同時(shí)輕輕地將大鼠脊柱兩側(cè)的皮膚提起，從脊中線的尾根部交替地捻動(dòng)向前一直至“大椎”穴處為一次，總共14次;從第8次開始，用雙手拇指的橈側(cè)緣頂住大鼠的皮膚，示指與中指向前按，三指需同時(shí)提拿大鼠皮膚，雙手從脊中

3、線的尾根部交替地捻動(dòng)向前一直至“大椎”穴，并且要做到捏三提一，力量要以大鼠較為平靜且不吵鬧為度，每天捏脊治療一次，連續(xù)2周為一個(gè)療程，間隔2天后，再開始進(jìn)行下一個(gè)療程，總共有2個(gè)療程。莫比可組每天給予莫比可片按0.7878mg/kg進(jìn)行灌胃干預(yù)，治療的療程與捏脊組一致;假手術(shù)組與模型組只做固定不予其它的治療處理，其固定的時(shí)間與捏脊組一致。治療結(jié)束后，取椎間盤，通過免疫組織化學(xué)法檢測頸椎間盤軟骨細(xì)胞內(nèi)MMP-1、MMP-3、MMP-13，

4、TIMP-1，COL-Ⅱ的表達(dá)，采用Western blot半定量檢測法檢測椎間盤軟骨細(xì)胞內(nèi)的ECM蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果:(1)甲苯胺藍(lán)染色:在假手術(shù)組中，軟骨終板的染色呈深藍(lán)紫色，軟骨的終板厚度較厚，軟骨細(xì)胞的數(shù)目較多，軟骨細(xì)胞的細(xì)胞外基質(zhì)也較豐富。而在造模組中，軟骨終板的染色變淡，厚度變薄，軟骨細(xì)胞的數(shù)目以及細(xì)胞外基質(zhì)變少。
　　(2)免疫組織化學(xué)檢測:與假手術(shù)組的相比，模型組中MMP-1、MMP-3、MMP-13表

5、達(dá)均升高，COL-Ⅱ、TIMP-1表達(dá)均降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);與模型組比較，捏脊組與莫比可組中MMP-1、MMP-3、MMP-13的表達(dá)量均減少，COL-Ⅱ、TIMP-1表達(dá)均升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　(3) Western blot檢測:與假手術(shù)組進(jìn)行比較，在模型組中大鼠的椎間盤軟骨組織中ECM蛋白表達(dá)量顯著性降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);而捏脊組與莫比可組中的ECM蛋白表達(dá)