血漿LAMA3測定在肝癌診斷中的應(yīng)用價值研究.pdf

1、背景：肝癌起病隱匿，發(fā)展迅速，惡性程度高，死亡率在惡性腫瘤中居于第三位，其早期診斷與治療十分重要。現(xiàn)常用的肝癌篩查方法之一是檢測外周血AFP濃度，但其在肝炎和肝硬化、肝損傷呈現(xiàn)高表達(dá)，甚至在一些肝癌中表達(dá)陰性，因此尋找一個新的特異性強(qiáng)、靈敏度高的生物分子標(biāo)記物十分重要。
　　目的：觀察肝癌患者外周血中 LAMA3蛋白和LAMA3 mRNA的表達(dá)，探索其對肝癌的診斷價值。
　　方法：從河南省人民醫(yī)院消化內(nèi)科、肝膽外科及普外科住

2、院患者及正常體檢50例肝癌、40例肝硬化、20例胃癌、20例食管癌及20例正常樣本以及選自河南省腫瘤醫(yī)院乳腺外科住院患者20例乳腺癌樣本的外周血，離心取上清，存于-80℃冰箱。利用酶聯(lián)免疫分析測定中 LAMA3蛋白及 AFP含量。Trizol法提取170例血液樣本的RNA，然后逆轉(zhuǎn)錄合成 cDNA，最后使用LAMA3 PCR擴(kuò)增引物和GAPDH PCR擴(kuò)增引物與合成的cDNA進(jìn)行 RT-PCR，測定各組血清中LAMA3 mRNA表達(dá)率及

3、相對定量，并分析 LAMA3蛋白及 mRNA與肝癌患者臨床數(shù)據(jù)的相關(guān)性。
　　結(jié)果：LAMA3蛋白在肝癌患者血漿中的平均值為39.44μg/ml，顯著高于肝硬化（18.13μg/ml）、乳腺癌（4.17μg/ml）、胃癌（9.05μg/ml）、食管癌（7.93μg/ml）及正常組（6.22μg/ml），均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。LAMA3蛋白在 AFP陰性肝癌患者血漿中的平均值為22.15μg/ml，小肝癌患者血漿中平均值

4、為31.25μg/ml，均高于其余組。LAMA3 mRNA在肝癌患者血漿中表達(dá)陽性率為72％，顯著高于肝硬化（35%）、乳腺癌（5%）、胃癌（25%）、食管癌（20%）及正常組（30%）。ROC曲線分析，LAMA3蛋白臨界值為13.23μg/ml，靈敏度及特異性為78%和85%；與 AFP相比，P<0.01。血清 LAMA3蛋白在 AFP陰性肝癌和小肝癌的靈敏度分別為71.4%和83.3%。血清 LAMA3 mRNA在肝癌患者中的靈敏度

5、和特異性分別為72%和70%，在 AFP陰性肝癌患者中的靈敏度和特異性分別為85.7%和70%。LAMA3蛋白與 AFP聯(lián)合檢測肝癌診斷靈敏度升至94%，LAMA3 mRNA和AFP聯(lián)合靈敏度升至92%,LAMA3蛋白和LAMA3 mRNA聯(lián)合靈敏度提至94%，三者聯(lián)合靈敏度升至100%。AFP陰性肝癌中，檢測 LAMA3 mRNA及蛋白可以提高肝癌的診斷正確率。LAMA3蛋白與肝癌轉(zhuǎn)移有一定相關(guān)性（P=0.031），LAMA3 mRN

6、A與肝癌大小有一定相關(guān)性（P=0.024）。
　　結(jié)論：
　　1.肝癌組的LAMA3蛋白及LAMA3 mRNA表達(dá)率明顯高于肝硬化、乳腺癌、胃癌、食管癌，且與正常組相比，明顯高表達(dá)，提示其作為肝癌的無創(chuàng)診斷指標(biāo)是有價值的。
　　2.LAMA3蛋白和LAMA3 mRNA在小肝癌及AFP陰性肝癌的診斷中靈敏度及特異性較高，提示其在AFP陰性肝癌及早期肝癌中診斷價值具有一定診斷價值，并可作為AFP的檢測的重要補(bǔ)充