魚腥草多糖提取、純化與抗氧化活性研究.pdf

1、魚腥草（Houttuynia cordataThunb）為三白草科植物蕺菜屬植物蕺菜的全草，主要成分有揮發(fā)油、黃酮類、多糖類、生物堿等，具有利尿通淋、清熱解毒、消腫排膿等作用。魚腥草全草均可入藥，具有廣泛的藥用和食用價(jià)值,是衛(wèi)生部正式發(fā)布的“藥食兩用”植物。本論文以魚腥草為原料，對魚腥草多糖的提取、純化、結(jié)構(gòu)和抗氧化活性進(jìn)行了一定的研究，對開發(fā)魚腥草功能性食品和拓展魚腥草深加工途徑具有較為重要的理論價(jià)值和實(shí)際意義。主要研究內(nèi)容與結(jié)果如下

2、：
　　(1)魚腥草葉多糖提取工藝優(yōu)化。首先通過苯酚硫酸法測得魚腥草根、莖、葉中多糖含量分別為23.43％、25.15%、28.21%,由此可以看出魚腥草葉子部位的多糖含量最高。本研究采用酶解法提取魚腥草葉中多糖，并采用響應(yīng)面試驗(yàn)法設(shè)計(jì)及建立回歸方程模型，以優(yōu)化酶法提取工藝。以多糖得率為指標(biāo)，分別考察液料比、纖維素酶添加量、提取時(shí)間、提取溫度等因素對多糖得率的影響。結(jié)果表明，影響魚腥草葉多糖得率工藝的因素順序?yàn)椋阂毫媳?提取溫度>

3、提取時(shí)間>酶添加量；根據(jù)響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)確定最佳提取工藝條件為：纖維素酶添加量0.9%、液料比52：1、酶解溫度31℃、酶解時(shí)間174 min。在得到的最佳條件下提取魚腥草葉多糖的得率為32.95 mg/g。所得優(yōu)化條件同時(shí)用于魚腥草莖和根部多糖的提取。
　?。?）魚腥草多糖分離、純化。以蛋白質(zhì)脫除率為指標(biāo)進(jìn)行了比較實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，酶法與Sevage法聯(lián)合脫蛋白效果優(yōu)于Sevage法，提取次數(shù)5次，蛋白質(zhì)脫除率達(dá)到83.4%，多糖保留率

4、為63.56%。采用樹脂對多糖進(jìn)行脫色工藝研究，采用五種樹脂（AB-8、D-201、X-5、LSA-10、D-101）進(jìn)行脫色效果比較，通過脫色率和多糖保留率得出綜合評分，以綜合評分為標(biāo)準(zhǔn)確定一種最佳樹脂 D-101，再篩選出D-101樹脂最佳脫色工藝。通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)，得出D-101樹脂脫色的優(yōu)化條件為：溫度45℃，pH值5.5，時(shí)間2 h。在此條件下，脫色率達(dá)到89.56%，多糖保留率為87.72%，綜合評分達(dá)到88.64%

5、。最后采用濃度為80%的乙醇對多糖進(jìn)行醇沉，得到高濃度多糖純品。此法也同時(shí)用于魚腥草根莖葉三個(gè)部位多糖的分離、純化。
　　(3)魚腥草根、莖、葉中多糖抗氧化活性比較研究。采用Schaal烘箱法，以過氧化值為指標(biāo)研究了多糖對豬油的抗氧化效果，采用DPPH自由基和ABTS自由基清除能力評價(jià)多糖的抗氧化能力。結(jié)果表明：在實(shí)驗(yàn)研究的濃度范圍內(nèi)，魚腥草多糖對豬油有一定的抗氧化作用，且隨著濃度的增加而增大；在一定濃度范圍內(nèi)，清除自由基能力與多

6、糖濃度存在正比關(guān)系。當(dāng)多糖濃度由0.05mg/mL增加到0.2mg/mL時(shí)，DPPH自由基的清除率由最低15.61%增加到90.53%，而 ABTS自由基的清除率由最低9.67%增加到81.45%。在同一濃度下，魚腥草葉部多糖抗氧化能力最強(qiáng)，其次是莖部，根部的抗氧化活性最低。
　　(4)魚腥草多糖的結(jié)構(gòu)基團(tuán)、圖貌特征、穩(wěn)定性等理化性質(zhì)的分析。采用熱分析儀、掃描電鏡、紅外光譜儀對提取的魚腥草多糖進(jìn)行分析，結(jié)果表明：魚腥草在190℃左