南瓜多糖提取分離及抗氧化活性研究.pdf

1、多糖具有各種生物活性功能，在保健食品與醫(yī)藥領(lǐng)域得到廣泛的使用，多糖的開發(fā)利用和研究到人們密切的關(guān)注。南瓜是重要的藥食兩用植物，南瓜多糖是南瓜中重要的生物活性物質(zhì)，具有降血糖、抗氧化、抗腫瘤、降血脂等功效。本文對(duì)南瓜多糖不同提取方法、不同協(xié)同方式進(jìn)行了比較研究，并對(duì)超聲波協(xié)同復(fù)合酶法提取南瓜多糖工藝進(jìn)行了優(yōu)化，將提取所得粗多糖通過DEAESepharoseFastFlow離子交換層析和SephacrylS-300HR凝膠過濾層析得到南瓜多

2、糖組分，并對(duì)不同組分的抗氧化活性進(jìn)行了研究，主要研究結(jié)果如下:
　　 1、本試驗(yàn)確定超聲波協(xié)同復(fù)合酶法提取南瓜多糖為最佳提取方式，在酶解的同時(shí)輔助超聲波提取為最佳協(xié)同方式。
　　 2、利用正交試驗(yàn)確定了復(fù)合酶較適宜用量為果膠酶42U/g，木瓜蛋白酶200U/g，纖維素酶40U/g;利用響應(yīng)面設(shè)計(jì)優(yōu)化了超聲波輔助復(fù)合酶法提取南瓜多糖提取率的最佳工藝條件，建立了南瓜多糖提取的數(shù)學(xué)模型，較適宜工藝條件為溫度51.5℃、超聲波功

3、率440w、液料比7∶1、pH值4.4;此模型的較適宜提取時(shí)間為20min，在此條件下，南瓜多糖提取率平均為4.39％。
　　 3、進(jìn)行了初步純化的實(shí)驗(yàn)，在脫蛋白時(shí)采sevag法，脫除三次為最佳次數(shù)，可達(dá)去除蛋白質(zhì)的目的，乙醇沉淀多糖時(shí)，選擇醇沉濃度為70％;將得到的南瓜粗多糖通過DEAE-SepharoseFastFlow離子交換層析和SephacrylS-300HR凝膠過濾層析得到P11、P12、P21三個(gè)組分。
　　

4、 4、利用DEAE-SepharoseFastFlow進(jìn)行離子交換層析，其最佳層析條件為:流速1ml/min，用pH7.2Tris-HC1緩沖液洗脫，洗脫體積100ml，然后用150ml0.7mol/LNaC1溶液洗脫，自動(dòng)部分收集5min/tube。利用SephacrylS-300HR凝膠過濾層析，其最佳層析條件為:0.2mol/LNaCl洗脫，洗脫速度為0.5ml/min，4ml/tube。
　　 5、對(duì)P11、P12、P

5、21三個(gè)組分進(jìn)行純度鑒定與理化性質(zhì)研究。結(jié)果表明:三組分為均勻單一組分，均難溶于冷水，易溶于熱水，濃度大時(shí)呈膠體狀態(tài)，不溶于乙醇、丙酮、乙醚等有機(jī)溶劑，三組分是糖類物質(zhì)，不是淀粉性多糖，不合單糖等還原性糖，不合有蛋白質(zhì)、酚類，組分P11、P12為中性多糖，組分P21為酸性多糖。
　　 6、對(duì)P11、P12、P21三個(gè)組分進(jìn)行抗氧化活性研究。結(jié)果表明:南瓜粗多糖、P12和P21清除DPPH自由基的IC50分別為:5.496mg/m