奈韋拉平和洛匹那韋在中國(guó)成人HIV感染者中群體藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　建立一種可以同時(shí)定量測(cè)定人類免疫缺陷病毒(Human immunodeficiencyvirus，HIV)感染者血漿中奈韋拉平(Nevirapine，NVP)和洛匹那韋(Lopinavir,LPV)濃度的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（High performance liquid chromatographytandem mass spectrometry，LC-MS/MS）方法。用建立的方法測(cè)定中國(guó)成年HIV感染者中NVP和

2、LPV的血藥濃度并建立群體藥動(dòng)學(xué)模型，考察對(duì)兩種藥物的藥動(dòng)學(xué)有顯著影響的生理因素與合并用藥，為臨床NVP和LPV個(gè)體化給藥提供參考，以提高治療效率，減少毒副反應(yīng)的發(fā)生。同時(shí)使用群體藥動(dòng)學(xué)方法考察唐草片對(duì)洛匹那韋藥動(dòng)學(xué)的影響。
　　方法:
　　收集來源于2014年5月15日至2014年7月15日期間于上海市公共衛(wèi)生臨床中心在艾滋病自愿咨詢檢測(cè)門診（Voluntary counseling and testing，VCT）隨訪，

3、接受抗病毒治療至少6個(gè)月，且藥物濃度達(dá)到穩(wěn)態(tài)的中國(guó)成年HIV感染者，其中治療方案中使用NVP的患者102例（83名男性和19名女性）和治療方案中使用LPV的患者156例（127名男性和29名女性）;來源于2015年7月4日和18日于上海市公共衛(wèi)生臨床中心病房，密集采樣且合并服用唐草片的16例HIV感染者（15名男性和1名女性）。記錄患者的詳細(xì)臨床資料（如:人口學(xué)資料、肝腎功能等）、服藥時(shí)間和劑量、采血時(shí)間和合并用藥。每次隨訪采集4mL靜

4、脈血并分離血漿，血漿樣品經(jīng)過蛋白沉淀，乙酸乙酯液-液萃取后，以0.1％甲酸水溶液-0.1％甲酸甲醇溶液(20∶80，V/V)為流動(dòng)相，采用Agilent ZORBAXEclipse XDB-C18(150 mm×4.6 mm ID，5 tm)色譜柱進(jìn)行分離;采用電噴霧電離源，以多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)方式進(jìn)行正離子檢測(cè)。
　　本研究采用群體藥代動(dòng)力學(xué)(Population pharmacokinetic，PPK)非線性混合效應(yīng)模型(N

5、on-linear mixed effect model，NONMEM)方法建立群體藥動(dòng)學(xué)模型，對(duì)NVP和LPV的體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)過程進(jìn)行模型擬合，并采用Allometric scaling法固定體重的影響后再篩選影響藥動(dòng)學(xué)的協(xié)變量，考察齊多夫定(Zidovudine，AZT)、依非韋倫(Efavirenz，EFV)、拉米夫定（Lamivudine，3TC）、替諾福韋(Tenofovir,TDF)、司他夫定(Stavudine，d4T)或唐草

6、片的聯(lián)合使用對(duì)NVP或LPV藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的影響。采用擬合優(yōu)度圖法（Goodness of fit，GOF）、自舉法（Bootstrap）和直觀預(yù)測(cè)檢驗(yàn)法(Visual predictive check，VPC)法進(jìn)行模型評(píng)價(jià)，評(píng)估最終模型的穩(wěn)定性、可靠性及預(yù)測(cè)能力。
　　結(jié)果:
　　共計(jì)納入97個(gè)NVP血藥濃度點(diǎn)和321個(gè)LPV血藥濃度點(diǎn)。
　　本研究建立了一種可以同時(shí)測(cè)定中國(guó)HIV感染者血漿中7種抗病毒藥物濃度的LC-

7、MS/MS方法，其中NVP離子對(duì)為267.0/226.0，LPV離子對(duì)為629.3/155.4，內(nèi)標(biāo)替米沙坦離子對(duì)為514.8/275.9，血漿中NVP線性范圍為40～6400 ng/mL，LPV線性范圍為62.5～10000 ng/mL，r均大于0.99。NVP和LPV的高、中、低3個(gè)濃度的日內(nèi)精密度均在10％以內(nèi)，日間精密度均在15％以內(nèi)，提取回收率均大于75％。
　　奈韋拉平最終結(jié)構(gòu)模型采用一級(jí)吸收，一級(jí)消除的一房室模型，該

8、模型可較好地?cái)M合NVP在體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)過程。采用以Allometric scaling法納入體重協(xié)變量為基礎(chǔ)模型的前向納入(P=0.05)和后向剔除法(P=0.01)篩選協(xié)變量。最終模型中，體重對(duì)NVP清除率有影響，發(fā)現(xiàn)納入肝、腎功能或合并用藥對(duì)NVP藥動(dòng)學(xué)沒有影響。奈韋拉平在中國(guó)患者中的相對(duì)清除率典型值為3.3L/h(標(biāo)準(zhǔn)體重70kg)，相對(duì)清除率的群體藥動(dòng)學(xué)公式為:CL/F=33·(WT/70)0.75式中，WT為體重，單位為kg。<

9、br>　　洛匹那韋最終采用一房室、一級(jí)吸收-消除模型。采用前向納入和后向剔除法法篩選協(xié)變量，考察體重、肝腎功能的生化指標(biāo)及唐草片和TDF、3TC、AZT等的聯(lián)合使用對(duì)LPV清除率及表觀分布容積的影響。洛匹那韋在中國(guó)患者中的相對(duì)清除率典型值為3.08L/h(標(biāo)準(zhǔn)體重70kg)，相對(duì)清除率的群體藥動(dòng)學(xué)公式為:CL/F=3.08.（WT/70)0.75式中，WT為體重，單位為kg。
　　VPC結(jié)果顯示模型對(duì)于奈韋拉平和洛匹那韋血藥濃度的

10、經(jīng)時(shí)過程預(yù)測(cè)效果良好。自步法結(jié)果顯示結(jié)構(gòu)模型和參數(shù)估計(jì)的穩(wěn)定性較好。表明模型具有較強(qiáng)的預(yù)測(cè)能力和穩(wěn)定性。
　　結(jié)論:
　　本研究建立的HIV感染者血漿中多種抗HIV藥物同時(shí)定量的LC-MS/MS方法，靈敏度高、選擇性強(qiáng)、具有良好的重現(xiàn)性。體重對(duì)NVP和LPV的清除率均有影響;肝、腎功能以及抗病毒藥物的聯(lián)合使用對(duì)NVP和LPV的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)未見影響。本研究建立的群體藥動(dòng)學(xué)模型可以預(yù)測(cè)中國(guó)HIV感染者體內(nèi)NVP和LPV的藥代動(dòng)力學(xué)