白藜蘆醇抑制人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞轉(zhuǎn)移作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：白藜蘆醇（Resveratrol）是一種來源于植物提取的多酚類化合物，已有很多關(guān)于白藜蘆醇與癌癥關(guān)系的研究，研究幾乎涵蓋所有癌癥類型，并對腫瘤細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期都表現(xiàn)出顯著的抑制作用，但白藜蘆醇對于人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞的作用尚未見報道。本文以人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞作為白藜蘆醇的研究對象，探討白藜蘆醇對 Tca-8113細(xì)胞轉(zhuǎn)移活性的作用，并對細(xì)胞產(chǎn)生作用的分子機(jī)制進(jìn)行研究。
　　方法：采用磺酰羅丹

2、明B(Sulforhodamine B,SRB)法檢測白藜蘆醇對舌鱗癌Tca8113細(xì)胞增殖的抑制作用；細(xì)胞凋亡的影響用4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)核染色法；用Transwell小室遷移試驗檢測人舌癌Tca8113細(xì)胞的遷移和侵襲活性；用細(xì)胞基質(zhì)膠的黏附實驗研究細(xì)胞的黏附活性；明膠酶譜法檢測細(xì)胞中轉(zhuǎn)移相關(guān)的關(guān)鍵基質(zhì)金屬蛋白酶-2(Matrix metall opr

3、oteinase-2,MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表達(dá)活性；免疫組化法研究白藜蘆醇對核轉(zhuǎn)錄因子kappa B(Nuclear facto r kappa B,NF-κB)核轉(zhuǎn)移能力的影響；用Western blotting檢測蛋白激酶B(P rotein kinase B,Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、NF-κB抑制蛋白激酶(Inhibitor of N

4、uclear Factor kappa-B kinase,IKK)和磷酸化IKK(p-IKK)在胞漿中表達(dá)的變化。
　　結(jié)果：白藜蘆醇對舌鱗癌Tca8113細(xì)胞的增殖活性具有抑制作用，這種抑制作用具有時間依賴性和濃度依賴性。白藜蘆醇濃度低于18.5μg/mL時，Tca8113細(xì)胞未出現(xiàn)凋亡，但生長停滯，而濃度高于18.5μg/mL時，能夠誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；白藜蘆醇明顯抑制Tca8113細(xì)胞的侵襲、遷移、黏附活性，且具有濃度依賴性；白藜

5、蘆醇對細(xì)胞中MMP-2和MMP-9的表達(dá)量的影響呈濃度依賴性降低；在免疫組化實驗中，隨著白藜蘆醇濃度的增大，進(jìn)入細(xì)胞核的p65的量也逐漸減少。在Western blotting實驗中，細(xì)胞內(nèi)蛋白Akt的總量并不隨白藜蘆醇的濃度而變化，但是p-Akt、IKK總量、p-IKK的量呈現(xiàn)明顯的濃度依賴性下降。
　　結(jié)論：白藜蘆醇能夠有效地抑制人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞的增殖、侵襲、遷移和黏附活性以及細(xì)胞中MMP-2和MM-9的表達(dá)，表明白