參梅養(yǎng)胃顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、參梅養(yǎng)胃顆粒由蒲公英、甘草、土木香、丹參、白芍等十一味藥組成，經(jīng)水煎煮（二次，第一次至少10倍量水、第二次至少5倍量水，煎煮時(shí)間同原標(biāo)準(zhǔn)為3小時(shí)）、濃縮(清膏的相對(duì)密度同原標(biāo)準(zhǔn)為1.30(90～95℃))、干燥工藝而成，具有養(yǎng)陰和胃的作用，用于淺表性胃炎，胃陰不足型慢性胃炎及各種胃部不適癥等癥，規(guī)格為每袋裝(1)16g(2)5g（無(wú)蔗糖型）。由于該品種現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制項(xiàng)目過(guò)于簡(jiǎn)單，多家企業(yè)生產(chǎn)的產(chǎn)品在市面上質(zhì)量存在較大差異，因此有必要進(jìn)

2、行對(duì)其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行提高。
　　本文對(duì)參梅養(yǎng)胃顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高進(jìn)行了研究。分別從規(guī)范及統(tǒng)一處方和制法、薄層鑒別、含量測(cè)定、指紋圖譜四方面進(jìn)行，并從中提煉出重現(xiàn)性好的成果建立了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
　　處方、制法在征求各企業(yè)意見(jiàn)后，最終明確為:北沙參處方量70g，二次煎煮的加水量為10倍量和5倍量，每次煎煮時(shí)間同原標(biāo)準(zhǔn)為3小時(shí)，清膏的相對(duì)密度同原標(biāo)準(zhǔn)為1.30(90～95℃)，輔料同原標(biāo)準(zhǔn)為糊精和蔗糖，但加入量改為“適量”，制成總量為1

3、000g。
　　薄層色譜鑒別分別對(duì)該制劑中原料藥材當(dāng)歸、蒲公英、甘草等藥味進(jìn)行定性鑒別，分別采用對(duì)照藥材和對(duì)照品進(jìn)行隨行對(duì)照。結(jié)果蒲公英、甘草重復(fù)性和重現(xiàn)性較好，分別有29、28批樣品檢出蒲公英、甘草，因此兩個(gè)薄層鑒別列入標(biāo)準(zhǔn)草案;當(dāng)歸藥味、土木香藥味和紅花藥味由于陰性有干擾而未列入標(biāo)準(zhǔn)草案。采用HPLC法對(duì)該制劑的原藥材土木香中的土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯進(jìn)行定性鑒別，以土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯2個(gè)對(duì)照品同時(shí)對(duì)照，C18柱分離，以

4、乙腈-0.1％磷酸水溶液(50∶50)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)225nm，結(jié)果:30批樣品檢出土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯，列入標(biāo)準(zhǔn)草案。
　　含量測(cè)定采用HPLC法同時(shí)測(cè)定參梅養(yǎng)胃顆粒中的原藥材丹參中的丹參素鈉、原藥材白芍中的芍藥苷的含量。以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱;以甲醇∶乙腈(2∶1)為流動(dòng)相A，以0.1％磷酸水溶液為流動(dòng)相B，梯度洗脫，0～16 min(9％ A)，16～40 min(21％ A)。柱溫30℃;檢測(cè)波長(zhǎng)為

5、230nm;流速1mL/min;理論板數(shù)按丹參素鈉峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。結(jié)果:專(zhuān)屬性試驗(yàn)陰性無(wú)干擾。丹參素鈉和芍藥苷分別在40.5-506.25μg、50.19-627.38μg范圍內(nèi)呈良好線(xiàn)性關(guān)系（r分別為1.000、0.9995，n=8），重復(fù)性RSD分別為0.4％、1.7％(n=12)，回收率分別為97.16％、99.83％，RSD分別為1.51％、0.62％(n=6)。理論板數(shù)按丹參素鈉峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。根據(jù)統(tǒng)一處方量和

6、加水量后的四家廠(chǎng)家的12批樣品中丹參素鈉含量在3.2652～5.9741 mg/袋之間，平均含量為4.560mg/袋(RSD=24.7％，n=4)，芍藥苷含量在9.5742～14.9648mg/袋之間，平均含量為12.191 mg/袋（RSD=18.8％，n=4）。實(shí)驗(yàn)方法在不同品牌色譜柱不同儀器上重現(xiàn)性良好。因此列入標(biāo)準(zhǔn)草案，其含量下限定為每袋含丹參以丹參素鈉(C9HgNaO5)計(jì)不得少于3.5mg，含白芍以芍藥苷（C23H28O11

7、）計(jì)不得少于9.4mg。
　　采用HPLC法建立了參梅養(yǎng)胃顆粒的指紋圖譜，以制法規(guī)范和統(tǒng)一后的10批樣品生成標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜并一次評(píng)價(jià)了所有樣品質(zhì)量的均一性。采用色譜柱:Waters SymmetryC18(250mm×4.6mm,5μm);以乙腈-0.1％甲酸水溶液為流動(dòng)相，進(jìn)行梯度洗脫;流速為1.0mL/min;進(jìn)樣體積10μL;檢測(cè)波長(zhǎng)為245nm;柱溫30℃。對(duì)5個(gè)廠(chǎng)家27批參梅養(yǎng)胃顆粒的相似度進(jìn)行了分析，結(jié)果相似度在0.81

8、4～0.986之間。此外，應(yīng)用高效液相色譜-離子阱-飛行時(shí)間質(zhì)譜法(LCMS-IT-TOF)對(duì)參梅養(yǎng)胃顆粒指紋圖譜中各色譜峰進(jìn)行了定性分析。質(zhì)譜的離子源為電噴霧離子源，同時(shí)采用正負(fù)離子檢測(cè)模式，獲得各組分多級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)。利用質(zhì)譜裂解規(guī)律和文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，確定了9個(gè)色譜峰的身份，分別為1（沒(méi)食子酸），5（丹參素），9(S)（芍藥內(nèi)酯苷），10（芍藥苷），11（甘草苷），12（沒(méi)食子酰芍藥苷/沒(méi)食子酰芍藥內(nèi)酯苷或者其同分異構(gòu)體），13（迷迭香酸），