不同劑量的雌激素對(duì)大鼠子宮內(nèi)膜損傷后修復(fù)的影響.pdf

1、目的：宮腔粘連(Intrauterine adhesion, IUA)是已成為育齡女性繼發(fā)不孕常見(jiàn)原因之一。目前對(duì)于IUA的形成機(jī)制仍不清楚，且尚無(wú)有效的治療手段。宮腔操作術(shù)后特別是刮宮術(shù)后預(yù)防IUA的發(fā)生具有重要意義，預(yù)防IUA及IUA術(shù)后再發(fā)生成為學(xué)界的研究熱點(diǎn)。雖然雌激素相關(guān)制劑在人工流產(chǎn)術(shù)后干預(yù)被普遍應(yīng)用，但是其對(duì)預(yù)防IUA形成的效果以及使用劑量等仍存在爭(zhēng)議。本課題小組前期已成功建立穩(wěn)定的大鼠宮腔粘連動(dòng)物模型，為研究提供良好的平

2、臺(tái)。本研究期望在此動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ突A(chǔ)上，采用芳香化酶抑制劑(來(lái)曲唑)阻斷體內(nèi)雌激素的合成，在消除內(nèi)源性雌激素的基礎(chǔ)上，添加不同劑量的外源性雌激素，對(duì)雌激素預(yù)防宮腔粘連形成的效應(yīng)方面進(jìn)行初步研究，包括雌激素干預(yù)后對(duì)7天的近期組織效應(yīng)觀察，以及對(duì)受精卵著床后的遠(yuǎn)期內(nèi)膜容受性的功能效應(yīng)觀察。
　　方法：(1)不同劑量的雌激素干預(yù)大鼠宮腔粘連的近期效應(yīng)觀察：通過(guò)常規(guī)陰道涂片選擇動(dòng)情期Wistar大鼠，隨機(jī)分為5組。除正常對(duì)照組(Contro

3、l組，C組)外，余4組均采用自制微型刮勺模擬機(jī)械刮宮術(shù)，且均為左側(cè)子宮損傷處理，右側(cè)不予處理。根據(jù)不同觀察需求，余4組分為損傷組(Damage組，D組)、損傷+來(lái)曲唑組(Damage+Letrozole組，DL組)、損傷+來(lái)曲唑+10μg雌激素組
　　(Damage+Letrozole+10μgE2組，DL-10組)、損傷+來(lái)曲唑+100μg雌激素組
　　(Damage+Letrozole+100μgE2組，DL-100組)

4、。于術(shù)前，術(shù)后3天、5天以及處死前收集各組大鼠血清待測(cè)。所有大鼠于術(shù)后7天下午四時(shí)斷頸處死，立即取材，收集子宮標(biāo)本。常規(guī)石蠟包埋切片后HE染色、及免疫組化檢測(cè)組織修復(fù)相關(guān)因子在子宮內(nèi)膜中的表達(dá)。(2)不同劑量的雌激素預(yù)防大鼠宮腔粘連的遠(yuǎn)期效應(yīng)觀察：將動(dòng)情期Wistar大鼠隨機(jī)分為4組，分別為正常對(duì)照組(Control組，C組)、損傷組(Damage組，D組)、損傷+10μg雌激素組(Damage+10μgE2組，D-10組)、損傷+10

5、0μg雌激素組(Damage+100μgE2組，D-100組)。損傷及雌激素干預(yù)同前。在雌激素干預(yù)后21天予雌雄鼠交配，于孕5.5天及孕7天處死后取材。常規(guī)石蠟包埋切片后行HE染色及免疫組化檢測(cè)容受相關(guān)在子宮內(nèi)膜中的表達(dá)。
　　結(jié)果：(1)本實(shí)驗(yàn)在大鼠宮腔粘連模型基礎(chǔ)上，使用芳香化酶抑制劑和外源性雌激素添加對(duì)模型進(jìn)行干預(yù)。從HE組織形態(tài)染色及粘連相關(guān)因子、血管生成相關(guān)因子、炎性相關(guān)因子、增殖細(xì)胞等方面觀察，隨著體內(nèi)雌激素水平的升高

6、，子宮內(nèi)膜纖維化面積有所縮小，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<.05)。但在高雌激素環(huán)境下，大鼠子宮內(nèi)膜腺上皮呈現(xiàn)不同程度的鱗狀上皮化生。(2)大鼠子宮內(nèi)膜損傷給予不同劑量的雌激素干預(yù)后對(duì)內(nèi)膜容受的效應(yīng)觀察，C組和D-10組雌激素組腺體豐富，實(shí)質(zhì)細(xì)胞多， D組和D-100組腺體數(shù)目明顯減少，實(shí)質(zhì)細(xì)胞減少。損傷各組與C組比較，內(nèi)膜αvβ3、LIF表達(dá)量顯著下降(P<.05)；D-10組與D組、D-100組比較，αvβ3、LIF表達(dá)量顯著增多(P<.05

7、)；D組與D-100組比較，αvβ3表達(dá)量相當(dāng)(P>.05)，而LIF表達(dá)量下降(P<.05)。與C組及各組自身對(duì)照側(cè)比較，損傷各組損傷側(cè)著床點(diǎn)個(gè)數(shù)顯著減少(P<.05)；損傷各組間比較，D-10組著床個(gè)數(shù)較D組、D-100組稍增多， D-100組與D組比較，著床個(gè)數(shù)略增加，均無(wú)顯著性差異。
　　結(jié)論：(1)提示雌激素可在一定程度預(yù)防子宮腔粘連，降低內(nèi)膜纖維化的發(fā)生率，但是高雌激素的使用會(huì)帶來(lái)高風(fēng)險(xiǎn)及副作用；(2)雌激素干預(yù)可在一