2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩98頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、第一部分哮喘小鼠動物模型的制備
  目的:雞卵清白蛋白(OVA)腹腔聯(lián)合皮下注射致敏和霧化激發(fā)小鼠,制備哮喘模型。
  方法:將BALB/c雌性小鼠隨機分為哮喘組(AS)和生理鹽水對照組(NS),每組7只。兩組小鼠于第1、13天分別以O(shè)VA和生理鹽水腹腔聯(lián)合皮下注射致敏,第19d分別予10%OVA溶液、生理鹽水連續(xù)霧化激發(fā)5d,末次激發(fā)24h后處死小鼠。測定小鼠BALF細胞總數(shù)和細胞分類計數(shù),采用ELISA檢測BALF的IL

2、-5、IL-12、IL-17水平,HE染色觀察肺組織病理學改變,AB-PAS染色觀察氣道上皮杯狀細胞和黏液物質(zhì)改變,VG染色觀察氣道周圍膠原纖維沉積,免疫組化染色和實時定量PCR檢測肺組織Muc5ac蛋白和mRNA表達水平。結(jié)果:AS組小鼠BALF細胞總數(shù)、細胞分類計數(shù)、IL-5、IL-17表達水平、氣道炎癥細胞浸潤評分、氣道壁厚度、氣道上皮杯狀細胞及黏液物質(zhì)陽性相對著色面積、氣道周圍膠原纖維陽性相對著色面積、Muc5ac蛋白及mRNA

3、表達均高于NS組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。IL-12表達水平低于NS組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
  結(jié)論:以O(shè)VA腹腔聯(lián)合皮下注射致敏和霧化吸入激發(fā)可成功復制小鼠哮喘模型。
  第二部分人羊膜間充質(zhì)干細胞分離、培養(yǎng)及鑒定
  目的:從人羊膜組織中分離、純化及鑒定間充質(zhì)干細胞。
  方法:收集健康足月剖宮產(chǎn)產(chǎn)婦新鮮胎盤,采用機械聯(lián)合胰蛋白酶-膠原酶消化法分離人羊膜間充質(zhì)干細胞(hAMSCs),

4、通過貼壁、酶消化法進行傳代培養(yǎng),觀察P1~P3代細胞形態(tài),傳至第三代的hAMSCs,采用流式細胞術(shù)(FCM)鑒定細胞表型特征。
  結(jié)果:hAMSCs呈典型貼壁生長,纖維狀,長梭形。第3代hAMSCs高表達CD90,CD105, CD44,CD73,幾乎不表達CD34,CD11b,CD19,CD45和HLA-DR。
  結(jié)論:從體外成功分離培養(yǎng)出人羊膜間充質(zhì)干細胞。
  第三部分人羊膜間充質(zhì)干細胞靜脈移植對哮喘小鼠氣道

5、的影響
  目的:觀察人羊膜間充質(zhì)干細胞靜脈移植對哮喘小鼠氣道炎癥及氣道重塑的影響。
  方法:將35只雌性BALB/c小鼠按隨機數(shù)字法分為NS組、AS組、人羊膜間充質(zhì)干細胞干預組(AS+hAMSCs)、人羊膜間充質(zhì)干細胞自身對照組(NS+hAMSCs)、地塞米松干預組(AS+DEX),每組7只。AS組和NS組處理同第一部分。AS+hAMSCs組在第1次致敏后第18d通過尾靜脈注射Brdu標記的第3代hAMSCs懸液(1×1

6、06)0.25ml/只,余處理同AS組;NS+hAMSCs組第18d經(jīng)尾靜脈注射Brdu標記的第3代hAMSCs懸液(1×106)0.25ml/只,余處理同NS組;AS+DEX組于每日霧化激發(fā)前30min,予地塞米松2mg/kg腹腔注射,余處理同AS組;檢測各組小鼠BALF細胞總數(shù)和細胞分類計數(shù),ELISA測定IL-5、IL-12、IL-17水平變化,免疫熒光染色觀察hAMSCs經(jīng)Brdu標記率及hAMSCs在體內(nèi)定植情況;HE, AB

7、-PAS,VG,免疫組化染色和實時定量PCR檢測指標同第一部分。
  結(jié)果:免疫熒光染色在兩組小鼠體內(nèi)均可檢測到hAMSCs的定植,以AS+hAMSCs組肺組織細胞定植明顯。AS+hAMSCs組 BALF細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞百分比、IL-5、IL-17水平、氣道周圍炎癥細胞浸潤評分、氣道壁厚度、氣道周圍膠原纖維沉積面積、氣道上皮杯狀細胞和黏液物質(zhì)陽性相對著色面積、肺組織Muc5ac蛋白及Muc5ac mRNA表達水平均較AS組降

8、低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);較NS組增高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。IL-12表達水平較AS組升高,較NS組降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。NS+hAMSCs組與NS組比較,各指標差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
  結(jié)論:1. hAMSCs靜脈移植能歸巢至小鼠肺組織,以哮喘組明顯。2. hAMSCs干預可減輕哮喘氣道炎癥及氣道重塑,其機制可能是通過抑制IL-5、IL-17的表達促進IL-12表達而調(diào)節(jié)

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論