腫瘤細胞和M2型巨噬細胞雙靶向的白蛋白納米載藥系統(tǒng)治療耐藥結(jié)腸癌的研究.pdf

1、多藥耐藥（Multidrug resistance,MDR）的產(chǎn)生是現(xiàn)階段腫瘤治療的主要瓶頸問題。MDR不僅是癌細胞單獨作用的結(jié)果，而且腫瘤微環(huán)境在MDR的產(chǎn)生和維持過程中也發(fā)揮著重要的作用。MDR是腫瘤細胞和腫瘤微環(huán)境中多種基質(zhì)細胞間相互作用的結(jié)果。因此，對癌細胞和腫瘤微環(huán)境采取雙重干預有可能改善MDR腫瘤的療效。本研究設計了一個靶向腫瘤高表達營養(yǎng)轉(zhuǎn)運體（如：SPARC,MR和GLUT-1）的納米載藥系統(tǒng)來治療耐藥結(jié)腸癌，并研究其作用

2、機制以及抗腫瘤效果。
　　聯(lián)合用藥是克服腫瘤化療耐藥的一個重要方法。本研究發(fā)現(xiàn)雙硫侖/銅絡合物（DSF/Cu）和瑞格菲尼（Rego）聯(lián)合應用可以有效抑制耐藥結(jié)腸癌細胞的生長。因此，本研究采用了NaBH4-H2NCONH2還原變性法，制備共載DSF/Cu和Rego的白蛋白納米粒，并通過腫瘤細胞及基質(zhì)過表達白蛋白轉(zhuǎn)運受體（例如，SPARC）靶向輸送至腫瘤組織。同時，還發(fā)現(xiàn)了耐藥結(jié)腸癌細胞高表達甘露糖受體（Mannose recepto

3、rs,MR），因此在納米粒表面修飾甘露糖苷（Man），令納米給藥系統(tǒng)可以通過靶向MR，進一步提高藥物在腫瘤組織的富集，從而通過雙重靶向作用改善抗腫瘤療效。本研究從細胞攝取、體外腫瘤球滲透、腫瘤組織分布等多方面考察了納米粒被腫瘤細胞攝取和腫瘤穿透能力。通過細胞毒性、腫瘤細胞凋亡、細胞內(nèi)ROS檢測、自噬水平檢測，抗腫瘤血管新生等多種方面研究探討了納米給藥系統(tǒng)的作用機制。并在耐藥結(jié)腸癌皮下移植瘤小鼠模型上進行體內(nèi)治療實驗。
　　實驗結(jié)果

4、表明，該納米給藥系統(tǒng)的粒徑約為140 nm，能被HCT8/ADR細胞高效地攝取，有效地抑制腫瘤細胞增殖。具有雙靶向功能的甘露糖修飾白蛋白納米粒（Man-BSA NP）不僅可以通過EPR效應富集于腫瘤部位，還能通過靶向耐藥結(jié)腸癌高表達的SPARC和MR富集于腫瘤部位。而且，該納米給藥系統(tǒng)還能有效地滲透到腫瘤深處，發(fā)揮抗腫瘤作用。體內(nèi)外機制研究表明，該納米給藥系統(tǒng)能通過增加腫瘤細胞內(nèi)ROS水平從而誘導細胞凋亡、誘導腫瘤細胞自噬、抑制腫瘤血管

5、新生等多種機制來發(fā)揮抗腫瘤作用。
　　此外，本研究還發(fā)現(xiàn)促腫瘤的M2型巨噬細胞亦過表達SPARC和MR。因此，該納米給藥系統(tǒng)還可同時靶向腫瘤微環(huán)境中的M2型巨噬細胞。通過細胞毒性、靶向性、腫瘤組織中M2型巨噬細胞數(shù)量變化等一系列研究，結(jié)果表明Man-BSA NP可通過SPARC和MR介導的機制靶向M2型巨噬細胞；Rego和DSF/Cu的協(xié)同作用能顯著抑制腫瘤組織中M2型巨噬細胞數(shù)量，這顯示該納米給藥系統(tǒng)具有調(diào)控腫瘤微環(huán)境的功能。<