PTP1B及瘦素信號通路在奧曲肽抗大鼠肝纖維化中的作用.pdf

1、目的：研究蛋白酪氨酸磷酸酶1B（PTP1B）在奧曲肽（OCT）治療四氯化碳（CCl4）誘導(dǎo)下的大鼠肝纖維化過程中的作用機制，探究 PTP1B對瘦素、瘦素受體和JAK2-STAT3信號通路的影響。
　　方法：本課題將成年雄性(SD)大鼠45只隨機分為3組：空白對照組、模型組、奧曲肽（OCT）治療組。模型組和OCT治療組采用CCI4皮下注射加5％乙醇飼養(yǎng)復(fù)合因素建立肝纖維化模型。OCT組在造模當(dāng)天予以O(shè)CT(0.1 mg/mL)干預(yù)。

2、飼養(yǎng)8周后，采集肝臟、血液標(biāo)本，全自動生化分析儀測定肝臟生化指標(biāo)。ELISA法測定血清瘦素含量，H&E法染色觀察肝臟病理，免疫組織化學(xué)法檢測肝組織中瘦素和瘦素受體(Ob-Rb)的表達(dá)，堿水解法檢測肝臟中羥脯氨酸(Hyp)的含量。Western blot法檢測肝組織中STAT3、p-STAT3、JAK2、p-JAK2、PTP1B的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.血清相關(guān)指標(biāo)測定：與空白組相比較，OCT組和模型組大鼠的血清中ALT、

3、TBIL、AST水平上升(p<0.05)， ALB含量降低(p<0.05)，血清中瘦素含量顯著增加(p<0.001)。OCT組與模型組相比，血清ALT、TBIL、AST含量明顯降低(p<0.05)，血清瘦素含量減少(p<0.05)。
　　2.病理學(xué)改變：空白組大鼠肝臟無萎縮和腫大，表面光滑，無結(jié)節(jié)，脾臟大小顏色均正常。HE染色無異常。
　　3.模型組大鼠解剖見肝臟表面粗糙呈淺黃色，肝臟表面呈現(xiàn)大小不等的顆粒狀，脾臟腫大明顯。

4、HE染色見模型組大量炎性細(xì)胞浸潤，肝細(xì)胞排列紊亂.，肝小葉被假小葉所取代，結(jié)締組織廣泛增生并且包繞肝小葉。OCT組大鼠肝臟表面欠光滑，色澤較淺，表面少許結(jié)節(jié)，部分大鼠脾臟輕度腫大。HE染色見炎性細(xì)胞浸潤程度明顯改善，假小葉減少，結(jié)締組織增生較少。肝組織免疫組化：空白組肝細(xì)胞內(nèi)無瘦素及Ob-Rb表達(dá)，或僅在肝竇間隙及匯管區(qū)有極少量表達(dá)；模型組可見肝星狀細(xì)胞中瘦素及Ob-Rb表達(dá)較多。在肝竇以及血管周圍Ob-Rb表達(dá)相對較多。OCT組與模型

5、組相對比，瘦素及瘦素受體陽性表達(dá)則明顯減少(p<0.05)。
　　4.肝組織中相關(guān)蛋白的表達(dá)：①與空白組相比，OCT組與模型組Hyp表達(dá)明顯增加(p<0.05)。OCT組與模型組相比，Hyp的表達(dá)降低(p<0.05)。②模型組PTP1B表達(dá)較空白組降低(p<0.05)，而OCT組PTP1B表達(dá)較空白組顯著增加(p<0.05)。模型組，OCT組的JAK2、STAT3磷酸化水平較空白組明顯升高(p<0.001)。OCT組與模型組相比，