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1、目的:N-乙?;?絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴氨酰-脯氨酸(N-acetyl-Seryl -aspartyl-lysyl –proline,AcSDKP)可抑制心臟和腎臟纖維化。本研究通過(guò)觀察AcSDKP對(duì)活化肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cell,HSC)與大鼠四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)肝纖維化模型的影響,評(píng)價(jià)其抗肝纖維化作用,并為進(jìn)一步研究AcSDKP在血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(angiot
2、ensin- converting enzyme inhibitor,ACEI)抗肝纖維化中的作用提供理論基礎(chǔ)。 方法:原代分離培養(yǎng)大鼠HSC活化后,分別給予0.01~100 nmol/L AcSDKP進(jìn)行干預(yù),觀察AcSDKP對(duì)活化HSC的增殖、合成和分泌細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)的影響;活化HSC分別在給予AcSDKP或轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transforming growth facto
3、rβ1,TGF-β1)干預(yù)后,觀察AcSDKP對(duì)TGF-β1介導(dǎo)活化HSC合成和分泌ECM的影響;建立CCl4誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型,通過(guò)皮下植入微泵持續(xù)給予AcSDKP干預(yù)5周,檢測(cè)肝功能、病理組織學(xué)、HSC活化、ECM合成與降解等指標(biāo),觀察AcSDKP對(duì)大鼠肝纖維化的治療效果。 結(jié)果:與空白對(duì)照組相比,1、10 nmol/L AcSDKP顯著抑制活化HSC的增殖(P<0.05);1、10 nmol/L和0.1~100 nmo
4、l/L AcSDKP分顯著抑制HSCⅠ型膠原(collagen Ⅰ,ColⅠ)、Ⅲ型膠原(collagen Ⅲ,Col Ⅲ)mRNA表達(dá)(P<0.05);0.1~10nmol/L和0.1、1nmol/L可分別顯著抑制透明質(zhì)酸(hyaluronic acid,HA)、層粘連蛋白(laminin,LN)的表達(dá)(P<0.05)。無(wú)論是否有TGF-β1干預(yù),AcSDKP(1nmol/L)均下調(diào)ColⅠmRNA、HA和α-平滑肌蛋白(α-smoo
5、th muscle acin,α-SMA)表達(dá)(P<0.05)。 AcSDKP組的大鼠Ⅲ型前膠原(procollagen III ,PCⅢ)、LN和羥脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量較模型組均明顯下降(P<0.05);肝功能明顯好轉(zhuǎn)(P<0.05)。與模型組相比,AcSDKP組大鼠肝組織膠原面積、α-SMA、TGF-β1、增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PC
6、NA)蛋白和ColⅠ、Col Ⅲ、金屬蛋白酶組織抑制物-1、2(tissue inhibitor of metalloproteinase-1、2,TIMP-1、2)mRNA表達(dá)表達(dá)顯著下降(P<0.05),基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)表達(dá)顯著上調(diào)(P<0.05)。 結(jié)論:①AcSDKP抑制活化HSC合成和分泌ECM,其機(jī)制可能是抑制HSC增殖,使合成和分泌ECM的HS
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