RPL15在胰腺導(dǎo)管腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、Ⅰ 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 2013 級(jí)碩士研究生學(xué)位論文 級(jí)碩士研究生學(xué)位論文 論文題目： 論文題目： RPL15 在胰腺導(dǎo)管腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其 在胰腺導(dǎo)管腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)制研究 機(jī)制研究 作者姓名： 作者姓名： 付學(xué)良 研究生學(xué)號(hào)： 研究生學(xué)號(hào)： 1137219265 指導(dǎo)教師： 指導(dǎo)教師： 孫勇偉 教 授 導(dǎo)師組成員： 導(dǎo)師組成員： 花 榮 副 教 授 陳 煒 副 教

2、 授 張軍峰 主治醫(yī)師 學(xué)科專業(yè)： 學(xué)科專業(yè)： 外科學(xué)（普通外科） 研究方向： 研究方向： 胰腺腫瘤基礎(chǔ)與臨床研究 申請學(xué)位： 申請學(xué)位： 外科學(xué)碩士學(xué)位 培養(yǎng)單位： 培養(yǎng)單位： 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院 資助基金項(xiàng)目： 資助基金項(xiàng)目：胰腺癌蛋白分子網(wǎng)絡(luò)研究 ——科技部 863 計(jì)劃（項(xiàng)目編號(hào)：2014AA020609） 答辯日期： 答辯日期： 2016 年 04 月 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文

3、 Ⅴ RPL15 在胰腺導(dǎo)管腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)制研究 在胰腺導(dǎo)管腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)制研究 摘要 摘要 目的： 目的：觀察 RPL15 在胰腺導(dǎo)管腺癌組織中異常表達(dá)的臨床意義及與患者預(yù)后的關(guān)系；研究 RPL15 對胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞生物學(xué)功能的影響；初步探索 RPL15 在胰腺導(dǎo)管腺癌中發(fā)揮生物學(xué)功能的分子機(jī)制及途徑， 以期為胰腺導(dǎo)管腺癌的分子診斷和臨床治療尋找新的靶點(diǎn)和思路，并提供相應(yīng)的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： 方法： 利

4、用公共基因芯片數(shù)據(jù)， 篩選并鑒定出與胰腺導(dǎo)管腺癌預(yù)后相關(guān)且異常表達(dá)的蛋白編碼基因 RPL15，并在本課題組自己的樣本中通過實(shí)時(shí)熒光定量 PCR（quantitative real-time PCR, qRT-PCR） ，蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)（Western Blot）及免疫組化（immunohistochemistry, IHC）對 RPL15 進(jìn)行驗(yàn)證，分析其與胰腺導(dǎo)管腺癌患者臨床病理學(xué)特征及預(yù)后的關(guān)系；構(gòu)建 RPL15 siRNA 干擾

5、和質(zhì)粒過表達(dá)胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞株， 并通過細(xì)胞增殖、 侵襲等體外細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)及裸鼠皮下成瘤轉(zhuǎn)移瘤實(shí)驗(yàn)研究 RPL15 對于胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞生物學(xué)功能的影響；通過基因集富集分析（Gene Set Enrichment Analysis, GSEA）方法分析 RPL15 表達(dá)與基因特征（gene signatures）的關(guān)系；通過 qRT-PCR, Western bolt 檢測 RPL15 對上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）的調(diào)控作用；酶聯(lián)免疫吸附試

6、驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）檢測 RPL15 過表達(dá)后的細(xì)胞上清液 MMP-2，MMP-9。 結(jié)果： 結(jié)果：不論是在公共基因芯片數(shù)據(jù)中，還是在本課題組自己的樣本中，RPL15在胰腺導(dǎo)管腺癌中顯著低表達(dá)；胰腺導(dǎo)管腺癌組織中 RPL15 的表達(dá)水平與患者TNM 分期、腫瘤浸潤程度、脈管侵犯、組織分化程度密切相關(guān)；Kaplan-Meier生存分析顯示 RPL15 表達(dá)與胰腺導(dǎo)管腺癌患者