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文檔簡(jiǎn)介
1、研究目的:
建立大鼠顱骨缺損模型,研究顱骨缺損對(duì)大鼠腦病理學(xué)的影響。
研究方法:
1.選用健康SD大鼠,隨機(jī)建立顱骨缺損模型。
2.動(dòng)物分為四個(gè)組:假手術(shù)組(動(dòng)物僅暴露骨質(zhì)而不開骨窗)、單側(cè)頂骨直徑4mm圓形缺損組、雙頂骨中央直徑6mm圓形缺損組、雙頂骨中央直徑8mm圓形缺損組。
3.通過抓力測(cè)試、旋轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)(RT)、神經(jīng)損害嚴(yán)重程度評(píng)分(NSS)三種行為學(xué)方法。
4.通過免疫印
2、跡實(shí)驗(yàn)(WB)檢測(cè)腦組織皮層中凋亡相關(guān)蛋白 bcl-2、Bax的表達(dá)水平。
5.通過免疫熒光腦切片中Caspase-3表達(dá)位點(diǎn)、熒光TUNEL染色檢測(cè)腦組織凋亡情況,從而了解大鼠顱骨缺損后腦組織病理學(xué)演變情況。
研究結(jié)果:
1.術(shù)后第7日頂骨單側(cè)直徑4mm圓形缺損大鼠骨窗有新骨生成,殘余骨窗面積約為原面積的50%;雙頂骨中央直徑6mm圓形缺損骨窗邊緣有極少量新骨生成,骨窗所在部位絕大部分面積纖維結(jié)締組織的薄
3、膜覆蓋;雙頂骨中央直徑8mm直徑缺損骨窗無新骨生成,骨窗所在部位由纖維結(jié)締組織的薄膜覆蓋;術(shù)后第21天6mm直徑缺損組與8mm直徑缺損組骨窗愈合情況與術(shù)后7天無差異。
2.直徑4 mm顱骨缺損組大鼠抓力在術(shù)后第2日、第4日、第6日均有增加,與假手術(shù)組相比,組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;雙頂骨中央直徑6mm圓形缺損組大鼠抓力在術(shù)后第2日、第4日、第6日均有增加,與假手術(shù)組相比,僅術(shù)后第4日組間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05);雙頂骨中央直徑8
4、mm圓形缺損組大鼠抓力在術(shù)后第2日下降,第4日、第6日、第14日、第21日均增高,與假手術(shù)組相比,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
3. RT結(jié)果顯示雙頂骨中央直徑8mm圓形缺損組大鼠在轉(zhuǎn)棒儀上跑動(dòng)時(shí)間在術(shù)后第2日、第3日、第4日、第5日縮短,相比假手術(shù)組,組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
4. NSS結(jié)果顯示雙頂骨中央直徑8mm圓形缺損組大鼠NSS在術(shù)后第2日、第4日、第6日均有不同程度上升,相比假手術(shù)組,組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
5.術(shù)后第
5、7日WB結(jié)果顯示雙頂骨中央直徑6mm圓形缺損組大鼠骨窗部位皮層腦組織bcl-2與Bax表達(dá)顯著降低,與假手術(shù)組相比,組間具統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),Bax與bcl-2比值升高,與假手術(shù)組相比,組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;雙頂骨中央直徑8mm圓形缺損組大鼠骨窗部位皮層腦組織 bcl-2略增高,非骨窗部位皮層腦組織略下降,與假手術(shù)組相比,組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;骨窗部位皮層腦組織Bax表達(dá)升高,與假手術(shù)組相比,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,非骨窗部位皮層腦組織Bax表達(dá)
6、顯著升高,與假手術(shù)組相比,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),非顱骨缺損部位Bax與bcl-2比值顯著升高,與假手術(shù)組相比,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
6.術(shù)后第7日免疫熒光法及TUNEL染色檢測(cè)結(jié)果顯示雙頂骨中央直徑6mm及8mm圓形缺損大鼠腦皮層區(qū)及海馬區(qū)腦組織無凋亡表達(dá)。
7.術(shù)后第7日腦含水量檢測(cè)結(jié)果顯示雙頂骨中央直徑8mm圓形缺損組大鼠腦含水量,較假手術(shù)組相比稍增高,組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;術(shù)后2日及3日組
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