2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:①構建PLGA支架復合培養(yǎng)HGFs模型及力學加載模型,研究靜壓力對HGFs增殖的影響,探討TGF-β1的表達與HGFs增殖間的關系;②研究TGF-β1對靜壓力作用下HGFs的COL-Ⅰ、MMP-1表達的影響。
  方法:體外培養(yǎng)HGFs,接種于PLGA支架上,建立PLGA支架復合培養(yǎng)HGFs模型。通過收集上清液檢測葡萄糖消耗量和乳酸脫氫酶含量,同時利用CCK-8檢測細胞增殖活性,分析三維環(huán)境對HGFs生長增殖的影響;利用重力

2、加載裝置對HGFs施加靜壓力,大小為25g/cm2,加載時間分別為6h、24h、48h、72h組,對照組不加力(0h),通過RT-PCR和ELISA技術檢測各組HGFs中TGF-β1、COL-Ⅰ和MMP-1表達的變化;并應用TGF-β1抑制劑SB431542,檢測靜壓力作用下TGF-β1對HGFs中COL-Ⅰ和MMP-1mRNA和蛋白表達的影響。
  結果:①采用組織塊培養(yǎng)法,經(jīng)細胞形態(tài)學觀察及來源鑒定,成功培養(yǎng)HGFs。熒光顯微

3、鏡顯示PLGA支架上有HGFs密集生長。②CCK-8結果顯示:隨著培養(yǎng)時間延長,二維和三維培養(yǎng)的HGFs數(shù)量均逐漸增多。第3d二維培養(yǎng)組達最高峰,三維培養(yǎng)組仍處于指數(shù)生長期。至第5d三維培養(yǎng)組達最高峰,而二維培養(yǎng)組已出現(xiàn)細胞數(shù)量下降(P<0.05)。隨后兩組細胞生長速度均減慢。③葡萄糖消耗量和乳酸脫氫酶含量的檢測結果顯示:二維培養(yǎng)組第3d時葡萄糖消耗最高,乳酸脫氫酶最低,而三維培養(yǎng)組第5d時葡萄糖消耗最高,乳酸脫氫酶最低,隨后兩組葡萄糖

4、消耗均緩慢減少,乳酸脫氫酶則開始逐漸升高。④CCK-8結果顯示:與未加力組相比,在25g/cm2靜壓力作用下,除6h組外,其余各組差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),24h組達到各組中最大值。隨著加力時間的延長,細胞數(shù)量下降。加入抑制劑與不加抑制劑相比,24h組細胞數(shù)量明顯減少(P<0.05)。⑤RT-PCR和ELISA結果一致,顯示:在25g/cm2靜壓力作用下,隨著加力時間延長,TGF-β1、COL-ⅠmRNA和蛋白表達升高,24h

5、達到各組中最大值,隨著時間延長表達逐漸下降;而MMP-1mRNA和蛋白表達下降,24h其表達達到最低,隨著時間延長表達逐漸升高;抑制TGF-β1后,COL-ⅠmRNA和蛋白的表達均隨之下降,MMP-1mRNA和蛋白的表達均隨之升高,24h組有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。
  結論:①成功構建PLGA支架復合培養(yǎng)HGFs模型。與二維培養(yǎng)相比,HGFs在PLGA支架上可獲得更強的細胞生長增殖能力及細胞活性,培養(yǎng)第5d時增殖活性最好。②

6、25g/cm2的靜壓力促進HGFs的增殖,作用24h達到峰值,但隨著加力時間延長,這種促細胞增殖的能力受到抑制,HGFs的增殖與TGF-β1的表達呈正相關。③25g/cm2的靜壓力可促進HGFs中TGF-β1、COL-ⅠmRNA和蛋白的表達,抑制MMP-1 mRNA和蛋白的表達,作用24h達到峰值,但隨著加力時間延長,這種促表達或抑制能力會減弱。④25g/cm2靜壓力作用下,HGFs中的TGF-β1與COL-Ⅰ、MMP-1的表達有關,且

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