核因子NF-κB參與背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體痛覺調(diào)制作用的研究.pdf

1、目的：觀察阻斷背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體對慢性坐骨神經(jīng)縮窄性損傷（CCI）模型大鼠熱縮足潛伏期（TWL）、機械縮足閾值（MWT）以及NF-κB、p-PKA、p-PKC表達的影響，從而探討核因子NF-κB在背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體痛覺調(diào)制中的可能機制。
　　方法：健康雄性SPF級SD大鼠（4-6周齡，180～200 g），采用隨機數(shù)字表達法分為3組（n=12）：假手術組(S組)，神經(jīng)病理性痛組（NP組），A-317491組（A組， P2X

2、3受體阻斷劑）。三組大鼠均予以鞘內(nèi)置管，置管3天后，NP、A組大鼠建立坐骨神經(jīng)慢性縮窄性（CCI）模型，S組大鼠只游離坐骨神經(jīng)不結扎。建立CCI模型后1天，S組與NP組鞘內(nèi)注射0.9％生理鹽水(20μl/次)，A組鞘內(nèi)注射A-317491[(100 nmol A-31749110μl+0.9%生理鹽水10μl)/次]，連續(xù)注射14 d（2次/d）。分別測定術前1 d、術后第1,3,7,10,14 d鞘內(nèi)給藥后30 min時大鼠術側下肢的

3、TWL和MWT。在第7 d、14 d處死大鼠，取L4~L6術側脊髓背根神經(jīng)節(jié)。利用免疫熒光雙標技術觀察P2X3受體與核因子NF-κB的表達分布；Western Blot觀察CCI手術及鞘內(nèi)注射A-317491對各組大鼠P2X3、NF-κB、p-PKC、p-PKA表達的影響。
　　結果：與S組比較，NP組在各時點大鼠TWL和 MWT顯著下降(P<0.01)，背根神經(jīng)節(jié)P2X3、NF-κB、p-PKC、p-PKA表達上調(diào)(P<0.05

4、)；與NP組相比，A組大鼠后TWL在各時點均高于NP組(P<0.05)，MWT在術后3,7,10,14 d升高(P<0.05)；大鼠第7、14 d背根神經(jīng)節(jié)P2X3、NF-κB、p-PKC表達明顯減弱(P<0.05)，p-PKA在大鼠第7 d表達減弱(P<0.05)，14 d表達無明顯變化。
　　結論：背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體通過p-PKC/NF-κB信號通路參與調(diào)節(jié)痛覺過敏的產(chǎn)生與傳遞，在背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體痛覺過敏形成過程中起