孕激素環(huán)境下促排卵對顆粒細(xì)胞功能影響的研究.pdf

1、目的：孕激素環(huán)境下促排卵(Progestin primed ovarian stimulation，PPOS)是以利用孕激素抑制LH峰為理念的一種新的促排卵方案，臨床研究發(fā)現(xiàn)黃體期內(nèi)源性的孕激素及卵泡早期輔助使用外源性孕激素安宮黃體酮（medroxyprogesterone acetate, MPA）均可有效抑制早發(fā)LH峰，此外，與短方案相比，PPOS方案需使用較大劑量的人絕經(jīng)促性腺素(hMG)，推測這可能是由于孕激素環(huán)境下卵泡對促性腺

2、激素的敏感性略低，亦或是由于孕激素影響了卵泡顆粒細(xì)胞的功能而導(dǎo)致的。本課題也驗證了卵泡早期使用MPA可以有效抑制早發(fā)LH峰這一觀點。有學(xué)者通過體外培養(yǎng)大鼠顆粒細(xì)胞的研究發(fā)現(xiàn)，MPA可以抑制雌激素的分泌。體內(nèi)的研究則發(fā)現(xiàn)MPA對促性腺激素誘導(dǎo)的大鼠卵巢分泌的雌激素沒有影響，但可抑制卵巢中芳香化酶的活性。因此卵泡早期MPA的使用是否會通過抑制促卵泡生成素(follicle stimulating hormone，F(xiàn)SH)誘導(dǎo)的芳香化酶的表達

3、而影響雌激素的合成，目前尚不清楚。我們的研究目的在于通過檢測PPOS方案中卵巢顆粒細(xì)胞FSH受體表達水平以了解卵泡對促性腺激素的反應(yīng)及MPA是否通過影響顆粒細(xì)胞分泌雌激素的能力來影響卵泡的生長，旨在為進一步優(yōu)化促排卵方案奠定基礎(chǔ)。
　　方法：選取2015年3月-2015年10月在上海市第九人民醫(yī)院輔助生殖中心行體外受精-胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET）助孕的不

4、孕癥患者共112例。其中行PPOS方案促排卵者62例，50例行短方案促排卵者作為對照組。收集所有患者促排卵過程中血液樣本，采用化學(xué)發(fā)光法檢測血清性激素水平。應(yīng)用密度梯度離心法收集所有患者卵泡液中顆粒細(xì)胞，實時熒光定量PCR法（Realtime PCR）和蛋白質(zhì)印跡法（Western blot）檢測顆粒細(xì)胞內(nèi)芳香化酶(CYP19A1)、促性腺激素受體(FSHR、LHR）和雌激素受體（ERβ）的表達水平。
　　結(jié)果：⑴PPOS組血清L

5、H水平在促排卵過程中逐漸降低，且無一例發(fā)生早發(fā)LH峰。⑵促排卵過程中，血清E2水平隨著卵泡的長大逐漸增加，兩組間并無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)；PPOS組血清FSH水平顯著性高于短方案組(P<0.05)。⑶PPOS組FSH受體（FSHR）在mRNA和蛋白水平均顯著高于短方案組FSHR(P<0.05)，雌激素受體β亞型在蛋白水平明顯高于短方案組(P<0.05)。⑷PPOS組顆粒細(xì)胞黃體生成素受體(LHR)和CYP19A1在mRNA水平和蛋