妊娠期糖尿病AGEs-RAGE系統(tǒng)對胎盤血管通透性的影響.pdf

1、目的:研究妊娠期糖尿病時(shí)大鼠胎盤血管通透性的變化、AGEs-RAGE系統(tǒng)的變化;并探討在低分子量肝素LMWH（Low molecular weight heparin）干預(yù)下胎盤血管通透性和AGEs-RAGE系統(tǒng)之間變化的相關(guān)性。
　　方法:1）60只雌性大鼠(體重在250-300g)和30只雄性大鼠（體重在300-350g）按2∶1合籠交配，在陰道涂片中發(fā)現(xiàn)精子的雌性大鼠被認(rèn)為是妊娠第一天。成年妊娠大鼠隨機(jī)分為三組:妊娠期糖尿病

2、組（GDM組）、正常對照組(NC組)、低分子肝素組(LMWH組)。2）GDM組和LMWH組大鼠于確定受精當(dāng)天空腹12h后一次性腹腔注射1％STZ(Streptozotocin)(45mg/kg)新鮮溶液誘導(dǎo)妊娠期糖尿病大鼠模型，NC組大鼠空腹注射等量檸檬酸緩沖液。在注射藥物后第3天剪尾測血糖＞16.7mmol/L確認(rèn)造模成功。3）在妊娠第5天，按600IU/kg給LMWH組大鼠皮下注射LMWH;GDM組和NC組注射等量的生理鹽水。4）在

3、妊娠第16天，所有孕鼠頸椎脫位，采用Miles Assay檢測胎盤血管伊文思藍(lán)(Evans Blue，EB)滲漏情況，并進(jìn)行定量分析;腹主動脈取血，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清AGEs濃度;采用RT-PCR技術(shù)檢測胎盤VEGF mRNA的表達(dá)水平及RAGE mRNA的表達(dá)水平;采用免疫印跡法檢測胎盤血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接蛋白Occludin的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:1）妊娠期糖尿病時(shí)胎盤血管通透性及AGEs-RAGE系統(tǒng)的變化:與NC組

4、相比較，GDM組大鼠胎盤血管伊文思藍(lán)滲漏定量、血清AGEs表達(dá)水平、VEGF mRNA及RAGEmRNA的表達(dá)水平增加(EB滲漏定量，0.53±0.05ng/mg vs0.35±0.06ng/mg，P＜0.01;血清AGEs表達(dá)水平，121.26±28.22ng/ml vs67.43±22.84ng/ml，P＜0.01;VEGF mRNA的表達(dá)水平，P＜0.01;RAGE mRNA的表達(dá)水平，P＜0.01)，胎盤血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接蛋白

5、Occludin的表達(dá)水平降低(P＜0.05)。2)LMWH的干預(yù)作用:與GDM組相比較，LMWH組大鼠胎盤血管伊文思藍(lán)滲漏定量（0.44±0.02ng/mg vs0.53±0.05ng/mg，P＜0.05）、VEGF mRNA的表達(dá)水平(P＜0.01)降低，胎盤血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接蛋白Occludin的表達(dá)水平增加(P＜0.05)，而兩組之間在血清AGEs表達(dá)水平、RAGE mRNA表達(dá)水平上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:1）妊