虎尾草cDNA文庫(kù)中與脅迫有關(guān)基因的篩選及鑒定.pdf

1、土壤鹽堿化已經(jīng)成為制約我國(guó)甚至世界農(nóng)業(yè)生產(chǎn)發(fā)展的重要原因，因此改良鹽堿土壤的特性，提高農(nóng)作物的抗鹽堿性，成為現(xiàn)在農(nóng)業(yè)發(fā)展研究的重要課題。土壤的改良需要花費(fèi)大量的財(cái)力物力人力，且見(jiàn)效慢，而對(duì)植物的生理生態(tài)學(xué)特性研究及利用分子生物學(xué)技術(shù)和基因工程學(xué)手段，提高植物尤其是農(nóng)作物的耐鹽堿能力，是快速有效的方法。
　　虎尾草(Chloris virgata)是廣泛分布于東北西部松嫩平原鹽堿地的一種一年生草本植物，屬禾本科虎尾草亞族，其適應(yīng)性極

2、強(qiáng)，能在惡劣的鹽堿化土壤生長(zhǎng)。因此，這樣的特殊抗逆植物可能具有潛在的抗逆基因資源，或特殊的基因表達(dá)方式。為了在基因表達(dá)水平上研究虎尾草的耐鹽特性，我們構(gòu)建了虎尾草的cDNA基因文庫(kù)，在文庫(kù)中隨機(jī)挑選出2300個(gè)克隆，并且通過(guò)點(diǎn)雜交分析在NaCl脅迫下基因表達(dá)譜中上調(diào)基因情況。結(jié)果表明，有59個(gè)基因在NaCl脅迫下強(qiáng)烈上調(diào)。上述基因可以分為8類(lèi)，能量代身謝(21.7％)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(5.0％)、氧化逆境(13.3％)、光合作用(10.0％)

3、、生長(zhǎng)發(fā)育(5.5％)、轉(zhuǎn)錄因子(1.67％)、其它酶類(lèi)(10.0％)和一些未知基因(28.3％)。在這些上調(diào)基因中，23個(gè)同時(shí)被NaHCO3誘導(dǎo)而上調(diào)，36個(gè)在脫落酸(ABA)誘導(dǎo)下也上調(diào)，10個(gè)基因被這三種脅迫同時(shí)誘導(dǎo)。這些結(jié)果對(duì)研究植物鹽逆境下分子基礎(chǔ)有一定的幫助。從中選出了部分上調(diào)基因進(jìn)行Northern雜交分析，結(jié)果表明，有些基因在根中表達(dá)，有些基因在葉中表達(dá)，有些基因在根和葉中都表達(dá)，根、葉的表達(dá)趨勢(shì)與點(diǎn)雜交結(jié)果的趨勢(shì)一致。