催乳素、雌激素和胰島素對奶牛乳腺上皮細(xì)胞中瘦素及其受體的影響.pdf

1、乳腺的泌乳是乳腺發(fā)育和激素共同作用的結(jié)果，激素在泌乳過程中起著重要的作用。本實(shí)驗(yàn)以荷斯坦奶牛為實(shí)驗(yàn)材料，通過體外培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞，添加催乳素、雌激素、胰島素并采用激光掃描共聚焦顯微技術(shù)、Western blotting、Real-Time PCR等來觀察乳腺上皮細(xì)胞中瘦素及其受體表達(dá)和泌乳功能的變化規(guī)律，旨在了解外源激素與瘦素的關(guān)系，尋求人工調(diào)控乳產(chǎn)量和乳質(zhì)量的新方法、新技術(shù)和新途徑，為奶牛乳腺發(fā)育和泌乳功能調(diào)控提供理論基礎(chǔ)和試驗(yàn)根

2、據(jù)。
　　 本研究表明，用組織塊培養(yǎng)法成功獲取了泌乳期奶牛乳腺上皮細(xì)胞。采用激光掃描共聚焦顯微技術(shù)對泌乳期奶牛乳腺上皮細(xì)胞中瘦素和瘦素受體的表達(dá)定位進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示：瘦素在奶牛乳腺上皮細(xì)胞中表達(dá)，瘦素受體在乳腺上皮細(xì)胞中被檢測到，但表達(dá)水平很低。三種激素處理細(xì)胞后，應(yīng)用Western blotting對奶牛乳腺上皮細(xì)胞中瘦素和瘦素受體的蛋白表達(dá)量進(jìn)行研究，結(jié)果顯示：催乳素、雌激素能顯著提高瘦素及其受體的表達(dá)(P<0.05)，且

3、催乳素高于雌激素，胰島素影響不顯著(P>0.05)。熒光定量RT-PCR結(jié)果表明，催乳素和雌激素能提高瘦素及其受體mRNA表達(dá)量(P<0.05)，胰島素沒有顯著影響(P>0.05)。采用高效液相色譜技術(shù)及甘油三酯試劑盒研究激素對奶牛乳腺上皮細(xì)胞泌乳的作用，結(jié)果表明：催乳素、雌激素和胰島素處理乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)液中β-酪蛋白升高均較顯著(P<0.05)。催乳素和雌激素處理乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)液中乳糖升高較顯著(P<0.05)，胰島素處理組中乳糖