2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、本論文采用荷斯坦奶牛乳腺上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)、細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等技術(shù)手段,研究了leptin在有、無(wú)PRL的情況下對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞乳蛋白合成的調(diào)控作用。研究結(jié)果分如下三個(gè)部分:
  1.在體外采用酶消化法成功分離并培養(yǎng)了奶牛乳腺上皮細(xì)胞,利用細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度進(jìn)行了純化和傳代培養(yǎng),并將三代細(xì)胞凍存。對(duì)細(xì)胞特有的骨架蛋白-角蛋白進(jìn)行免疫熒光細(xì)胞染色,確定為乳腺上皮細(xì)胞。對(duì)復(fù)蘇的細(xì)胞進(jìn)行了存活率檢測(cè)。在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)為鵝

2、卵石樣成團(tuán)貼壁生長(zhǎng)。結(jié)果顯示,此方法得到的細(xì)胞可以用于后續(xù)試驗(yàn)的研究。
  2.在建立奶牛乳腺上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)體系的基礎(chǔ)上,進(jìn)行處理。分別設(shè)置有無(wú)(+、-)PRL的兩個(gè)對(duì)照組(leptin為0 ng/mL)和各自對(duì)應(yīng)的3個(gè)處理組(leptin分別為10、100、和1000ng/mL)。利用MTT法檢測(cè)乳腺上皮細(xì)胞增殖結(jié)果顯示,在有、無(wú)PRL的條件下leptin呈時(shí)間依賴性促進(jìn)乳腺上皮細(xì)胞增殖。且同一時(shí)間,有PRL時(shí),高濃度(100

3、0 ng/mL)leptin處理組顯著抑制細(xì)胞增殖,10和100 ng/mL leptin處理組顯著促進(jìn)增殖,但是無(wú)PRL時(shí),leptin的作用不顯著。
  3.細(xì)胞的處理同第二部分,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)研究leptin對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞中主要乳蛋白及其主要調(diào)控激素 PRL的受體和主要信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子基因表達(dá)的影響,并利用Elisa試劑盒測(cè)定主要酪蛋白的合成情況。試驗(yàn)結(jié)果表明:(1) leptin在有PRL的條件下才促進(jìn)乳蛋白基

4、因的表達(dá),且促進(jìn)作用隨leptin濃度變化而不同。(2)有PRL的條件下,1000 ng/mL leptin抑制PRL受體基因的表達(dá),但PRL明顯誘導(dǎo)其表達(dá)。(3)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子JAK2的基因表達(dá)與乳蛋白一致,而STAT5沒(méi)有顯著變化。(4)leptin對(duì)α-酪蛋白合成沒(méi)有影響,在有PRL的條件下,10 ng/mL leptin處理組顯著促進(jìn)β-酪蛋白的合成,1000ng/mL處理組則顯著抑制。
  本試驗(yàn)對(duì) leptin在奶牛乳腺

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