卡維地洛對TLR4信號通路介導(dǎo)的H9C2心肌細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的:
　　探討卡維地洛對TLR4信號通路介導(dǎo)的H9C2心肌細(xì)胞凋亡的影響,以及卡維地洛對TLR4、核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)、β-抑制蛋白2(β-arrestin2)蛋白表達的影響,以探討卡維地洛抗細(xì)胞凋亡的分子機制。
　　方法:
　　采用卡維地洛(1 um、5 um、10 umol/L)、NF-κB抑制劑PDTC(100 umol/L)、TLR4封閉抗體(20 ug/mL)預(yù)孵育H9C2心肌細(xì)胞1 h后,應(yīng)用無血

2、清1640作用24 h。實驗分為7組:正常對照組(Control組),血清剝奪組(SD組),小劑量組卡維地洛組(Car1卡維地洛1 umol/L),中劑量組卡維地洛組(Car5卡維地洛5 umol/L),高劑量組卡維地洛組(Car10卡維地洛10 umol/L),TLR4封閉抗體組(TLR4-Ab組 TLR4封閉抗體20 ug/mL),NF-κB抑制劑PDTC組(PDTC組PDTC100 umol/L)。通過Annexin-V-FITC

3、-PI雙染方法檢測細(xì)胞凋亡,應(yīng)用蛋白質(zhì)印跡技術(shù)檢測TLR4、核蛋白NF-κB、β-arrestin2蛋白的表達。
　　結(jié)果:
　　(1)正常組發(fā)現(xiàn)少量凋亡 H9C2心肌細(xì)胞,血清剝奪組細(xì)胞凋亡明顯升高(p<0.05);NF-κB阻斷劑PDTC預(yù)處理能明顯減少細(xì)胞凋亡(p<0.05);TLR4封閉抗體預(yù)處理能明顯減少細(xì)胞凋亡(p<0.05);不同劑量卡維地洛預(yù)處理組能明顯減少細(xì)胞凋亡(p<0.05)。
　　(2)與正常組

4、比較,血清剝奪組 TLR4蛋白表達顯著增加(p<0.05);NF-κB阻斷劑 PDTC預(yù)處理和高劑量卡維地洛預(yù)處理能顯著減低血清剝奪后TLR4蛋白的增加(p<0.05)。
　　(3)與正常組比較,血清剝奪組NF-κB蛋白表達顯著增加(p<0.05);TLR4封閉抗體預(yù)處理和高劑量卡維地洛預(yù)處理能顯著減低血清剝奪后 NF-κB蛋白的增加(p<0.05)。
　　(4)與正常組比較,血清剝奪組β-arrestin2蛋白表達減少(p