人皮膚成纖維細胞衰老過程中表觀遺傳學相關基因表達的初步研究.pdf

1、目的：探討多種表觀遺傳學相關基因在人皮膚成纖維細胞自然衰老和氧化應激誘導衰老過程中的表達差異及意義。
　　 方法：提取年輕組（16歲以下）及衰老組（55歲以上）人皮膚成纖維細胞中總RNA（自然衰老模型）及亞致死量H202處理誘導衰老組與未處理年輕對照組人皮膚成纖維細胞總RNA（氧化應激誘導衰老模型），分別通過逆轉錄合成cDNA，利用倍比稀釋法建立表觀遺傳性相關催化酶基因EZH2、Bmi-1、JMJD3、DNMT1、MLL1和內參

2、基因β-actin的標準曲線，選用10－4濃度梯度進行實時熒光定量PCR檢測其基因表達水平的差異。
　　 結果：在各實驗組中，PCR產物的濃度在(1.0×10－2)～(1.0×10－7)范圍時，上述目的基因與內參基因均得到一條平滑的擴增曲線，模板濃度與可檢測的熒光信號的循環(huán)數(shù)之間呈負相關。在自然衰老模型和氧化應激誘導衰老模型中，衰老組的EZH2、Bmi-1及DNMT1基因表達水平要顯著低于年輕組(P＜0.05)，JMJD3、ML