Ⅰ型單純皰疹病毒感染L-02細(xì)胞的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、Ⅰ型單純皰疹病毒(HSV Ⅰ)主要誘發(fā)口咽部皰疹、角膜結(jié)膜炎和散發(fā)性腦炎，同時(shí)，臨床中亦發(fā)現(xiàn)HSV Ⅰ病毒還能導(dǎo)致新生兒、孕婦出現(xiàn)非嗜肝病毒性肝炎，加之HSV Ⅰ病毒在人群中的潛伏感染率很高，因此，HSV Ⅰ病毒在皰疹病毒研究領(lǐng)域一直是人們關(guān)注的焦點(diǎn)。 HSV Ⅰ病毒感染能導(dǎo)致一系列的細(xì)胞效應(yīng)，尤其是宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)合成途徑在病毒侵入后出現(xiàn)明顯變化：mRNA被降解、轉(zhuǎn)錄被關(guān)閉、蛋白質(zhì)被選擇性地降解或保持穩(wěn)定，甚至重新定義細(xì)胞蛋白功

2、能。由此，病毒感染和未感染細(xì)胞之間出現(xiàn)了蛋白表達(dá)譜的差異，而這些差異蛋白正是病毒感染細(xì)胞、細(xì)胞抵御病毒的具體執(zhí)行者。因此，尋找這些蛋白并探索它們之間的相互作用將對認(rèn)識HSV Ⅰ病毒感染機(jī)制提供大量的研究線索。 本課題借助比較蛋白質(zhì)組學(xué)的技術(shù)平臺，將HSV Ⅰ病毒感染的人正常肝細(xì)胞L-02與未感染細(xì)胞分別進(jìn)行雙向電泳(2-DE)作蛋白質(zhì)組圖，通過PDQuest軟件對蛋白點(diǎn)定性、定量分析，再利用基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MA

3、LDI-TOF-MS)鑒定表達(dá)差異較為顯著的蛋白點(diǎn)。在所發(fā)現(xiàn)的差異蛋白中，RPLP1(acidic ribosomal phosphoprotein P1)形成mRNA翻譯所需的蛋白復(fù)合體、核不均一性核糖核蛋白H2(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein H2，hnRNPH2)正性調(diào)控mRNA剪切和加工、KH型剪切調(diào)控蛋自(KH-type splicingregulatory protein，KH

4、SRP)參與mRNA快速降解，它們都從不同角度調(diào)節(jié)細(xì)胞正常的蛋白質(zhì)合成通路，但在HSV Ⅰ病毒感染情況下，細(xì)胞RPLP1和KHSRP蛋白呈現(xiàn)上調(diào)，而hnRNP H2則表現(xiàn)為下調(diào)，這一結(jié)果提示：病毒在利用細(xì)胞轉(zhuǎn)錄、翻譯調(diào)控因子關(guān)閉細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的同時(shí)又利用細(xì)胞蛋白合成途徑實(shí)現(xiàn)病毒蛋白的合成。盡管上述細(xì)胞蛋白的具體作用機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究，但本課題為探討病毒如何改變宿主蛋白合成途徑提供了很多新的線索。此外，2-DE發(fā)現(xiàn)新蛋白Unnamed