miRNA-10b在胰腺癌細(xì)胞系PANC-1中的表達(dá)及其對PANC-1生物學(xué)功能的影響.pdf

1、目的：研究人miRNA-10b（Has-microRNA-10b，微小RNA-10b）在胰腺癌細(xì)胞系PANC-1中的表達(dá)情況及其對胰腺癌細(xì)胞系PANC-1生物學(xué)功能的影響。
　　方法：采用實時熒光定量PCR檢測miRNA-10b在胰腺癌細(xì)胞系PANC-1中的表達(dá)情況。通過化學(xué)合成成熟型人miRNA-10b模擬體，瞬時轉(zhuǎn)染至PANC-1細(xì)胞中，實時熒光定量 PCR檢測進(jìn)行鑒定，檢測 miRNA-10b的表達(dá)量。采用 MTT法檢測mi

2、RNA-10b對PANC-1細(xì)胞增殖的影響，流式細(xì)胞儀檢測對PANC-1細(xì)胞凋亡的影響， Transwell小室檢測對PANC-1細(xì)胞的侵襲功能的影響，細(xì)胞劃痕實驗檢測對PANC-1細(xì)胞遷移功能的影響，以探討表達(dá)上調(diào)的miRNA-10b對胰腺癌細(xì)胞系PANC-1所起的生物學(xué)作用。
　　結(jié)果：實時熒光定量 PCR顯示miRNA-10b在 PANC-1中相對表達(dá)量為（3.606±0.423），（P<0.01）。瞬時轉(zhuǎn)染 miRNA-1

3、0b至PANC-1后，miRNA-10b轉(zhuǎn)染組中miRNA-10b的表達(dá)量為空白對照組（4.392±0.176）倍，（P<0.01），陰性對照組為空白對照組（1.175±0.110）倍，（P>0.05）。MTT法檢測轉(zhuǎn)染后24h、48h、72h和96h時間點三組細(xì)胞的增值活性無明顯差別（P>0.05）。流式細(xì)胞儀檢測轉(zhuǎn)染后miRNA-10b轉(zhuǎn)染組凋亡率為（12.31±3.10）%，陰性對照組和空白對照組細(xì)胞凋亡率分別為（13.76±3.

4、13）%、（16.28±4.19）%，（P>0.05）。Transwell小室侵襲實驗結(jié)果顯示miRNA-10b轉(zhuǎn)染組PANC-1細(xì)胞穿膜數(shù)為（71.3±5.3）個，陰性對照組（30.1±3.4）個，空白對照組（29.2±5.2）個，miRNA-10b轉(zhuǎn)染組穿膜細(xì)胞數(shù)明顯多于對照組（P<0.01）。細(xì)胞劃痕實驗結(jié)果顯示24h和48h后miRNA-10b轉(zhuǎn)染組劃痕間距逐漸縮小，而陰性對照和空白對照組兩組劃痕間距均無明顯變化，且兩組之間無明