去甲斑蝥素-N乳糖酰殼聚糖-絲素蛋白微球的制備及其抗腫瘤作用的實驗研究.pdf

1、目的：制備去甲斑蝥素-N-乳糖酰殼聚糖/絲素蛋白微球(Norcantharidin-N-chitosan-silk fibroin-microspheres, NCTD-N-CS/SF-MS)，觀察其表征及其對兔VX2肝移植瘤的化療栓塞術(shù)后抑瘤作用。
　　方法：（1）采用乳化-固化法，制備去甲斑蝥素-N-乳糖酰殼聚糖/絲素蛋白微球(NCTD-N-CS/SF-MS)，光學(xué)顯微鏡觀察及測量微球的粒徑大小及分布，掃描電鏡觀察微球的表面形

2、態(tài)，采用紅外光譜法（FT-IR）驗證微球的構(gòu)成，并對微球的載藥量、包封率、懸浮性及導(dǎo)管推注實驗進(jìn)行考察。采用體外動態(tài)透析法在pH7.4磷酸鹽緩沖液釋放介質(zhì)中測定其溶脹性及釋藥性能。（2）40只新西蘭大白兔經(jīng)超聲引導(dǎo)下于肝臟左葉植入VX2腫瘤組織塊，建立肝移植瘤模型，超聲監(jiān)測腫瘤生長，并用影像學(xué)手段及病理表現(xiàn)評估建模是否成功。（3）取建模成功的動物30只并隨機(jī)分為5組，每組6只，股動脈穿刺插管后經(jīng)肝動脈分別給予NCTD-N-CS/SF-M

3、S（A組）；空白微球N-CS/SF-MS（B組）；N-CS/SF-MS＋NCTD溶液（C組）；碘化油+NCTD溶液（D組）；生理鹽水（E組）。經(jīng)治療后，觀察各組兔血常規(guī)及肝、腎功能和肝腫瘤體積的動態(tài)變化以及病理表現(xiàn)，術(shù)后30天CT及肝動脈造影評價治療效果，并記錄動物生存時間，計算生命延長率。
　　結(jié)果：（1）所制去甲斑蝥素-N乳糖酰殼聚糖/絲素蛋白微球在光鏡及掃描電鏡下均顯示外觀圓整，表面光滑，平均粒徑117±4.3μm，載藥量平

4、均值為(15.08±2.85)%、包封率為(27.46±1.25)%，能夠在PH7.4的磷酸緩沖液中快速溶脹，70min基本溶脹完全，體外釋藥緩慢平穩(wěn)，7天的累積釋放率為60%。（2）利用超聲引導(dǎo)穿刺針種植操作方便，模型穩(wěn)定，建模成功率87.5%。（3）各組動物血細(xì)胞數(shù)量及血紅蛋白值均有不同程度下降，A、B、C組動物術(shù)后平均白細(xì)胞數(shù)量（中性粒細(xì)胞為主）增多，各治療組動物肝功能均出現(xiàn)一過性損害；A組較余各組作用更強(qiáng)，抑瘤率高達(dá)85.01%

5、，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），腫瘤體積遠(yuǎn)小于其他各組，病理切片示腫瘤大片凝固性壞死，腫瘤壞死率達(dá)56.78%，高于B組的49.63%及C組52.23%。術(shù)后30天CT示 A組腫瘤體積明顯小于其他各組，腫瘤內(nèi)部壞死明顯，肝動脈造影示栓塞徹底，僅少量側(cè)支血管形成。A組平均生存時間最長，達(dá)到36.25天，生命延長率達(dá)54.25%。
　　結(jié)論：NCTD-N-CS/SF-MS制備工藝簡單易行，能明顯抑制腫瘤生長，并造成腫瘤明顯壞死(P＜