遼寧絨山羊新基因OCIAD2生物學(xué)功能研究.pdf

1、遼寧絨山羊是我國(guó)特有的遺傳物種，產(chǎn)絨量居全國(guó)之首，被譽(yù)為“國(guó)寶”，是動(dòng)物基因保護(hù)物種。遼寧絨山羊所產(chǎn)山羊絨是上乘的動(dòng)物纖維紡織原料，有著非常重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
　　在前期工作中，通過對(duì)遼寧絨山羊皮膚組織建庫測(cè)通獲得基因卵巢癌免疫抗原蛋白（OCIAD2）的全長(zhǎng)序列。首先對(duì)OCIAD2基因利用生物信息學(xué)分析其核酸和氨基酸序列，并進(jìn)行理化性質(zhì)、疏水性分析、跨膜結(jié)構(gòu)域、磷酸化位點(diǎn)、保守結(jié)構(gòu)域、二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)、信號(hào)肽預(yù)測(cè)分析，以及亞細(xì)胞定位并建

2、立進(jìn)化樹。再利用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)OCIAD2基因在其它內(nèi)臟器官中的表達(dá)情況，然后利用原位雜交技術(shù)檢測(cè)其特異性表達(dá)位點(diǎn)，利用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)不同生長(zhǎng)時(shí)期OCIAD2基因在初、次級(jí)毛囊中的表達(dá)含量。此外，檢測(cè)Noggin基因干擾后對(duì)OCIAD2基因表達(dá)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　(1)生物信息學(xué)分析顯示:該基因能夠表達(dá)含有154個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)，為親水性蛋白;二級(jí)結(jié)構(gòu)主要以無規(guī)卷曲結(jié)構(gòu)(68.18％)為主;該蛋白質(zhì)為兩次跨膜

3、蛋白，含有一個(gè)保守的蛋白結(jié)構(gòu)域，存在2個(gè)跨膜區(qū)域，無信號(hào)肽且最有可能定位在細(xì)胞核中;遼寧絨山羊OCIAD2基因與家綿羊OCIAD2基因同源性較高。(2) RT-PCR結(jié)果顯示:OCIAD2基因在心臟、腎臟、脾臟中顯著表達(dá)，在皮膚中少量表達(dá)，在肝臟和肺臟中幾乎不表達(dá)。(3)原位雜交結(jié)果顯示:OCIAD2基因在初、次級(jí)毛囊的內(nèi)根鞘均有強(qiáng)烈的表達(dá)。在毛囊周圍的基質(zhì)細(xì)胞中少量表達(dá)，在毛干、外根鞘以及毛囊乳突中無表達(dá)。(4)熒光定量PCR結(jié)果顯示

4、:毛囊在興盛期時(shí)，OCIAD2基因在次級(jí)毛囊的表達(dá)約為初級(jí)毛囊的3.89倍(P＜0.01)，毛囊在退行期時(shí)，OCIAD2基因在初級(jí)毛囊的表達(dá)量約為次級(jí)毛囊的1.22倍(P＜0.01)。(5) Noggin基因敲減后，OCIAD2基因表達(dá)量增加，有利于提高絨山羊絨毛品質(zhì)。
　　由以上結(jié)果可以得出以下結(jié)論:(1)通過對(duì)OCIAD2基因在生物信息學(xué)，熒光定量以及原位雜交等方面的研究，推斷OCIAD2基因可能對(duì)絨的生長(zhǎng)起著一定的調(diào)控作用。