小鼠FAPα基因重組腺病毒感染樹突狀細胞體內抗小鼠Lewis肺癌移植瘤的免疫學研究.pdf

1、目的:
　　制備抗腫瘤疫苗rAd-FAPαDCs,研究其抗lewis肺癌的預防與治療效應。
　　方法:
　　1、取C57Bl/6小鼠骨髓培養(yǎng)骨髓來源的樹突狀細胞,采用重組腺病毒rAd-FAPα(攜帶目的基因)、rAd-EGFP(對照病毒)進行感染,制備DCs疫苗并鑒定。
　　2、制備C57Bl/6小鼠皮下移植瘤(lewis肺癌細胞)模型。
　　3、制成的各種DCs疫苗體內抗小鼠Lewis肺癌的免疫學研究:(

2、1)預防實驗:小鼠隨機分為3組,各組小鼠先分別接種疫苗(rAd-FAPαDCs)、rAd-EGFP DCs、DCs,每周1次,共3次后,再在小鼠右肋腹側接種Lewis肺癌細胞,觀察成瘤情況及小鼠的生存率;(2)治療實驗:即各組小鼠先在右肋腹側皮下接種Lewis肺癌細胞后,隨機分為3組,再分別接種rAd-EGFP DCs、rAd-FAPαDCs、DCs,每周1次,共3次,觀察皮下腫瘤體積及小鼠的生存率。
　　結果:
　　Wes

3、tern blot顯示rAd-FAPαDCs表達鼠成纖維細胞活化蛋白(FAP)。表明rAd-FAPαDCs制備成功。CAF的western blot結果與其免疫組化結果相一致,說明C57Bl/6小鼠皮下移植瘤模型的腫瘤微環(huán)境中存在FAP。
　　在預防實驗中,通過56天的觀察,免疫接種rAd一FAPαDCs的小鼠產生了明顯的抗Lewis肺癌的效果,導致了小鼠的生存期延長,與免疫接種rAd一EGFP DCs的小鼠或免疫接種DCs的小鼠

4、生存率比較有顯著差異(Kaplan-Meier分析,P<0.01)。而皮下接種rAd一EGFP DCs小鼠與皮下接種DCs,的小鼠,腫瘤體積無顯著差異(P>0.05)。應用rAd一FAPαDCs疫苗雖可抑制腫瘤生長,但并不能清除腫瘤,荷瘤小鼠死于腫瘤。
　　在治療實驗中,用rAd一FAPαDCs疫苗治療能顯著抑制Lewis肺癌的生長,在24天的觀察期內,皮下接種rAd一FAPαDCs治療對小鼠腫瘤生長的抑制作用非常明顯(第10天起