一先天性眼外肌纖維化綜合征家系的分子遺傳學(xué)及臨床研究.pdf

1、目的：
　　1.收集一個(gè)常染色體顯性遺傳先天性眼外肌纖維化綜合征(Corlgenitalfibrosisoftheextraocularmuscles，CFEOM)家系，分析中國(guó)人CFEOM的臨床表型和遺傳特點(diǎn)。并對(duì)家系(TT)進(jìn)行基因連鎖分析定位及候選基因突變檢測(cè)，研究致病基因與臨床表型的關(guān)系及是否有新的或已知的突變。
　　2.分析CFEOM家系TT患者臨床特征。
　　3.應(yīng)用MRI技術(shù)，對(duì)CFEOM家系TT部分患者

2、進(jìn)行眼球動(dòng)眼神經(jīng)、外展神經(jīng)相關(guān)組織結(jié)構(gòu)的影像學(xué)特征研究，探索發(fā)病機(jī)制，為相關(guān)的基礎(chǔ)和臨床研究提供影像學(xué)證據(jù)。
　　方法：
　　1.對(duì)患者及家系成員進(jìn)行詳細(xì)的臨床檢查及遺傳學(xué)調(diào)查，繪制遺傳圖，確定遺傳方式。選取分布在第12及16號(hào)染色體CFEOM1及CFEOM3區(qū)域的微衛(wèi)星多態(tài)標(biāo)記：D12S345、D12S59、D12S331、D12S1048用于CFEOM1型的連鎖分析，D16S3063、D16S689、D16S3026、D

3、16S3121用于CFEOM3型的連鎖分析。利用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)及進(jìn)行單體型分析；用Linkage軟件的MLINK程序?qū)蚍中徒Y(jié)果進(jìn)行兩點(diǎn)參數(shù)連鎖分析；用直接測(cè)序的方法對(duì)家系成員的KIF21A基因的已知突變熱點(diǎn)--第8、20、及21外顯子進(jìn)行突變檢測(cè)，確定突變位點(diǎn)，并比較基因型與表型之間的相關(guān)性。
　　2.CFEOM家系TT患者8人，眼科檢查及眼位及眼肌檢查：包括眼位、眼球運(yùn)動(dòng)、瞼裂大小、提上瞼肌肌力、被動(dòng)牽拉試驗(yàn)及Bel

4、l氏征等。
　　3.采用3.0T核磁對(duì)TT家系部分患者腦干行全腦、腦干的MRI薄層掃描。檢測(cè)動(dòng)眼神經(jīng)、外展神經(jīng)支。
　　結(jié)果：
　　1.單體型及連鎖分析發(fā)現(xiàn)：
　　1)TT家系在D12S345和D12S59獲得最大LOD值2.71(重組率θ=0，外顯率=100％)，可以肯定此家系在D12S345及D12S59緊密連鎖。
　　2)在16號(hào)染色體上的4個(gè)標(biāo)記，LOD值均小于1，不存在連鎖。
　　2.在家系

5、中測(cè)出KIF21A基因第21外顯子的1個(gè)雜合突變：所有患者中均發(fā)現(xiàn)有2860C>T(R954W)的錯(cuò)義突變，即在2860堿基的位置C變成T，這個(gè)突變對(duì)應(yīng)于蛋白質(zhì)的莖部區(qū)域，導(dǎo)致第954氨基酸位置的第1個(gè)核苷酸的改變，使一個(gè)高度保守的精氨酸被谷氨酞胺替換。
　　3.CFEOM家系TT屬常染色體顯性遺傳，臨床特征符合CFEOM1型，但有部分患者表現(xiàn)出遺傳異質(zhì)性，存在與CFEOM3交叉的臨床特征，表現(xiàn)為單眼上瞼下垂(Ⅱ：9)或原在位眼位

6、正位(Ⅱ：7、Ⅲ：3)。
　　4.MRI薄層掃描顯示TT家系中Ⅱ：5、Ⅱ：9及Ⅲ：5的眼動(dòng)神經(jīng)核團(tuán)均顯示發(fā)育不良，Ⅱ：5及Ⅲ：5患者表現(xiàn)動(dòng)眼神經(jīng)變細(xì)，右側(cè)外展神經(jīng)缺如。
　　結(jié)論：
　　1.TT家系的遺傳方式為常染色體顯性遺傳，確定為CFEOM1型。
　　2.連鎖分析將致病基因定位于12號(hào)染色體CFEOM1位點(diǎn)，在微衛(wèi)星多態(tài)性標(biāo)記D12s345和D12s59取得最大LOD值2.71。
　　3.測(cè)序發(fā)現(xiàn)TT家

7、系突變位點(diǎn)位于KIF21A基因第21外顯子2860C>T(R954W)，100名正常人無(wú)此突變。因此，KIF21A基因?yàn)樵揅FEOM1家系患者的致病基因。
　　4.家系TT證明了CFEOM1型可以有更多的表現(xiàn)型，這個(gè)家系被記錄到和CFEOM3交叉的表現(xiàn)型，即臨床表型的異質(zhì)性。
　　5.腦干MRI薄層掃描結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了該家系的病變與顱內(nèi)腦干神經(jīng)核團(tuán)與眼動(dòng)神經(jīng)發(fā)育異常有關(guān)。MRI檢查有助于CFEOM的臨床診斷和治療及更好的理解