木瓜中溶栓活性成份的篩選分離.pdf

1、目的：以番木瓜和正安野木瓜為原料，篩選分離一種植物源性溶栓活性物質，對其進行初步研究。 方法：提取兩種木瓜的蛋白粗提物，考馬斯亮藍G-250染色法測定樣品蛋白濃度；對其進行鹽析、透析，進一步經SP-sephadex G-75柱層析純化收集蛋白峰；纖維蛋白平板法篩選溶栓活性成份；SDS-PAGE電泳法檢測溶栓活性成份純度及測定其分子量。 結果：番木瓜蛋白粗提物、鹽析后樣品及進一步經SP-sephadex G-75柱層析分離

2、得到的4、5、6號樣品對纖維蛋白平板都有溶解作用，且溶解作用隨純化程度提高逐漸加強；而野木瓜的蛋白粗提物、鹽析后樣品對纖維蛋白平板都沒有溶解作用。番木瓜蛋白粗提物經SP-sephadex G-75柱層析分離得到的5號樣品，以尿激酶為標準標定活力單位，其溶栓活性為17.85IU/mg；溶栓成份是通過直接降解纖維蛋白和激活纖溶酶原兩種方式起作用的；經SDS-PAGE電泳得單-蛋白條帶，分子量在26KD左右。 結論：番木瓜中含有溶栓活