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文檔簡介
1、目的:研宄結腸癌細胞系球培養(yǎng)后能否富集腫瘤干細胞,以及這種球細胞是否發(fā)生了上皮間質轉化。
方法:采用結腸癌細胞系HT29,HCT116,進行球細胞培養(yǎng)。檢測其腫瘤干細胞表面標志的表達情況。球細胞與貼壁細胞對照,分別進行Transwell侵襲和迀移實驗,軟瓊脂克隆形成實驗。并使用RT-PCR和Western blot對比分析球細胞和貼壁細胞EMT相關基因和蛋白的表達情況。
結果:結腸癌細胞系HT29,HCT116均能形
2、成腫瘤球細胞。檢測球細胞中干細胞標志物升高。Tmnswell和軟瓊脂克隆形成實驗中,球細胞較相應的貼壁細胞迀移、侵襲和克隆形成能力均增強,統(tǒng)計分析有顯著差異(P<0.05)。上皮細胞基因ZO-I在球細胞中的表達較貼壁細胞減少,同時球細胞中間質細胞基因vimentin和fibronectin的表達較貼壁細胞升高,統(tǒng)計分析有顯著差異(P<0.05)。
結論:結腸癌細胞HT29和HCT116經無血清懸浮培養(yǎng)后可形成球細胞。這種球細胞
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