阿卡波糖發(fā)酵生產(chǎn)工藝研究.pdf

1、阿卡波糖具有良好的降血糖效果，自上市以來(lái)便成為治療Ⅱ型糖尿病的理想藥物。近年來(lái)，我國(guó)糖尿病患者人數(shù)急劇增加，阿卡波糖的市場(chǎng)需求逐年增長(zhǎng)，展現(xiàn)出廣闊市場(chǎng)前景，然而國(guó)內(nèi)工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)阿卡波糖水平偏低，工業(yè)化水平處于較低水平，因此，通過(guò)對(duì)工業(yè)微生物發(fā)酵生產(chǎn)阿卡波糖的發(fā)酵工藝進(jìn)行研究，提高阿卡波糖發(fā)酵產(chǎn)量，降低生產(chǎn)成本是當(dāng)前工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)阿卡波糖的首要目標(biāo)。
　　對(duì)搖瓶發(fā)酵生產(chǎn)阿卡波糖的工藝進(jìn)行了優(yōu)化，當(dāng)種齡為60 h，接種量為10％，發(fā)

2、酵培養(yǎng)基的最佳初始pH為7.0，在250 ml搖瓶中裝液量為30 ml時(shí)，28℃，200 rpm條件下培養(yǎng)，阿卡波糖發(fā)酵產(chǎn)量為4835.21mg/l。通過(guò)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)一步優(yōu)化，確定最佳的發(fā)酵培養(yǎng)基配方（g/l）：葡萄糖30.0，麥芽糖糖化液312.5 ml（其中麥芽糖含量50 g），黃豆餅粉15.0，谷氨酸鈉6.0，CaCO32，CaCl23，F(xiàn)eCl31.2，K2HPO40.8，優(yōu)化后阿卡波糖產(chǎn)量達(dá)5250.40mg/l。
　　接

3、著，對(duì)10m3發(fā)酵罐生產(chǎn)阿卡波糖發(fā)酵過(guò)程進(jìn)行了詳細(xì)考察，建立了一種高效的補(bǔ)料發(fā)酵策略：初始發(fā)酵培養(yǎng)基成份為葡萄糖10.0 g/l，黃豆餅粉17.0 g/l，麥芽糖60 g/l，谷氨酸鈉5 g/l，CaCO32.,5 g/l，CaCl21.88 g/l，K2HPO41.0 g/l，F(xiàn)eCl3·6H2O0.83 g/l，甘油5 g/l；在24 h、48 h、72 h、96 h、120 h、144 h各添加8 g/l的葡萄糖，在96 h一次性

4、補(bǔ)加20 g/l的麥芽糖，發(fā)酵192 h后阿卡波糖的濃度達(dá)5800 mg/l，在此基礎(chǔ)上額外添加谷氨酸鈉，并沒(méi)有進(jìn)一步提高阿卡波糖的產(chǎn)量，反而會(huì)有一定的抑制作用。
　　最后建立了60m3發(fā)酵罐生產(chǎn)阿卡波糖補(bǔ)料工藝，連續(xù)補(bǔ)加復(fù)合營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)更有利于促進(jìn)阿卡波糖的合成，在60m3發(fā)酵罐進(jìn)行連續(xù)補(bǔ)料發(fā)酵，裝料35m3，從發(fā)酵48h開(kāi)始補(bǔ)料，每分鐘補(bǔ)3.5L料液，持續(xù)至88h調(diào)整補(bǔ)料量至每分鐘補(bǔ)1.5L料液，連續(xù)補(bǔ)料13.5m3，阿卡波糖最高