富硒茶中硒的分布及硒多糖的研究.pdf

1、論文以湖北恩施地區(qū)生產(chǎn)的茶葉為原料，對(duì)其基本成分進(jìn)行測(cè)定，并對(duì)茶葉中硒的分布形態(tài)進(jìn)行研究，從茶葉中提取、分離和純化得到含硒多糖并進(jìn)行活性和結(jié)構(gòu)表征。本論文主要研究?jī)?nèi)容如下:
　　1)對(duì)原子熒光光度計(jì)(AFS)測(cè)定硒元素的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明當(dāng)硒燈電流為35mA，負(fù)高壓為290V，還原劑硼氫化鈉1.0％，介質(zhì)鹽酸20％，載液鹽酸3％，精密度和準(zhǔn)確度滿足要求，回收率95～100％，最低檢測(cè)限為0.21μg/L;使用優(yōu)化后條件對(duì)湖

2、北恩施州包括茶葉在內(nèi)的農(nóng)作物的硒含量進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)大部分農(nóng)作物均含有一定量的硒;對(duì)比茶葉與土壤中硒的含量，發(fā)現(xiàn)茶葉的硒含量與土壤中的有效態(tài)硒在一定濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的正相關(guān)。
　　2)對(duì)富硒茶的營(yíng)養(yǎng)成分（茶多酚、茶多糖、總黃酮等）和Hg、Pb、As、Cd含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同含硒量富硒茶的各營(yíng)養(yǎng)成分無(wú)顯著性差異(P＞0.05);當(dāng)茶葉Se含量在1～5mg/kg范圍時(shí)，As含量與其呈現(xiàn)一定負(fù)相關(guān)，而對(duì)Pb含量無(wú)明顯影響。對(duì)富硒

3、茶中粗茶多酚、粗茶多糖、茶堿溶性蛋白和水提后茶渣的得率、純度和硒含量進(jìn)行分析，結(jié)果表明，硒主要集中在茶渣里(75.4％)，且主要集中在茶渣的蛋白中，茶粗多糖也結(jié)合一定量的硒;
　　3)采用沸水提取茶葉多糖，經(jīng)分離純化得到四個(gè)組分Se-NTPS、Se-TPS1、Se-TPS2、Se-TPS3，其中Se-TPS2得率最高為37.14％，經(jīng)高效凝膠滲透色譜(HPGPC)鑒定，Se-TPS1、Se-TPS2是相對(duì)均一的組分，分子量(M(w

4、))分別為106kD、244kD;三種Se-TPS1、Se-TPS2和Se-TPS3的糖醛酸含量分別為47.25％、69.98％、62.16％，且均含有少量的蛋白。離子色譜測(cè)定結(jié)果表明它們含以下幾種單糖組分:巖藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸，摩爾比分別為0.07∶0.21∶0.58∶1∶0.47∶0.17∶1.75;0.07∶0.28∶0.59∶1∶0.10∶0.49∶1.24;0.07∶0.38∶0.7

5、2∶1∶0.30∶0.19∶0.88。原子熒光光譜儀測(cè)得純化后多糖含硒量較粗多糖有所降低(分別為0.97mg/kg、0.44mg/kg、0.34mg/kg)，說(shuō)明富硒茶粗多糖中含有其它與硒結(jié)合的物質(zhì)，另使用元素分析儀、ICP等儀器技術(shù)對(duì)硒多糖的其他元素進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示多糖中元素種類豐富。酶抑制活性實(shí)驗(yàn)表明，富硒茶多糖對(duì)兩種酶均有抑制效果，茶源粗多糖Se-TPS對(duì)α-葡萄苷酶活性抑制率達(dá)75.1％，Se-TPS2對(duì)酶的抑制率達(dá)50％以上

6、;小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)富硒茶多糖抑瘤率為50％，與陽(yáng)性對(duì)照環(huán)磷酰胺抑瘤作用相當(dāng)，同時(shí)硒多糖能顯著提高胸腺指數(shù)和脾指數(shù)較。
　　4)對(duì)硒多糖的光譜特征、表面形態(tài)以及熱重進(jìn)行分析顯示，紅外光譜在1000～1200cm-1，2800～3200cm-1和3200～3600cm-1譜段均出現(xiàn)了多糖的特征吸收峰，且COOH-和C=O官能團(tuán)均有出現(xiàn)，證明富硒茶多糖屬于酸性多糖。熱重分析發(fā)現(xiàn)富硒茶多糖在加熱條件(0～500℃)下的失重情況趨勢(shì)基本相似

7、，在200～280℃范圍內(nèi)發(fā)生了劇烈的氧化分解反應(yīng);用掃描電鏡觀察多糖表觀形態(tài)，純化后多糖可能由于質(zhì)地柔軟，呈無(wú)定型狀態(tài)，易蜷縮形成多種不規(guī)則的形狀;
　　5)對(duì)富硒茶多糖Se-TPS2進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析，通過(guò)階梯式部分酸水解分析發(fā)現(xiàn)，巖藻糖和甘露糖兩種單糖只存在于截留液中，說(shuō)明其可能是多糖支鏈部位的組成部分;木糖只有在高的酸濃度下水解，說(shuō)明其處于支鏈中較難水解位置的可能性較大，而GalA始終沒(méi)有在水解透過(guò)液中檢出，說(shuō)明其只存在于主鏈上