Fucoidan對小鼠肝癌Hca-F細胞生物學行為的影響及免疫調(diào)節(jié)作用研究.pdf

1、目的：海洋褐藻中的褐藻多糖硫酸酯具有抗凝血、抗炎癥、抗腫瘤等多重生物活性，其潛在生物功效日益受到人們的高度重視，也成為近年海洋藥物研究的熱點之一。本實驗將進一步探討褐藻多糖硫酸酯對小鼠肝癌細胞生長和轉(zhuǎn)移行為的影響及對正常小鼠免疫細胞的影響，并探討其抗腫瘤作用的機理。
　　 方法：1．采用乙醇重沉淀法進一步提純褐藻多糖硫酸酯；采用硫酸-苯酚法檢測所提樣品中的糖含量，采用Dodgson法測定硫酸基含量。
　　 2．采用MTT

2、法檢測褐藻多糖硫酸酯對Hca-F肝癌細胞體外生長的影響；淋巴結(jié)體外粘附實驗、穿膜實驗、侵襲實驗檢測褐藻多糖硫酸酯對小鼠肝癌細胞粘附、遷移行為的影響。
　　 3．采用明膠酶譜、ELISA等方法檢測褐藻多糖硫酸酯對肝癌細胞轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白表達水平的影響，RT-PCR的方法檢測褐藻多糖硫酸酯對轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白mRNA表達水平的影響。
　　 4．采用MTT法檢測褐藻多糖硫酸酯對正常小鼠脾淋巴細胞增殖的影響；巨噬細胞吞噬中性紅實驗檢測褐藻

3、多糖硫酸酯對脾巨噬細胞吞噬活性的影響；ELISA法檢測褐藻多糖硫酸酯對脾細胞細胞因子分泌水平的影響。
　　 結(jié)果：1．得到褐藻多糖硫酸酯，測得其總糖含量為42％，硫酸基含量為12%。
　　 2．褐藻多糖硫酸酯對Hca-F肝癌細胞體外生長有抑制作用，但抑制作用不明顯，褐藻多糖硫酸酯對肝癌細胞的粘附、遷移能力有明顯的抑制作用。
　　 3.ELISA、明膠酶譜、Western blot、RT-PCR結(jié)果顯示，褐藻多糖硫