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文檔簡介
1、目的:通過研究OX40和OX40L分子在系統性紅斑狼瘡(SLE)患者外周血淋巴細胞上的表達及其在SLE發(fā)病機制中的可能作用,調控OX40、OX40L在相應靶細胞上的表達和阻斷OX40/OX40L通路從而減少炎癥反應的發(fā)生,為治療自身免疫疾病提供新的思路。
方法:采用流式細胞儀檢測技術對43例SLE患者和15例健康志愿者外周血淋巴細胞上OX40和OX40L的表達水平進行分析,同時,對SLE患者中的腎炎型與非腎炎型外周血淋巴細
2、胞上OX40和OX40L的表達水平進行比較,并對10例SLE患者進行治療前后OX40和OX40L表達水平的比較。測定OX40和OX40L表達水平的具體步驟為:(1)每個流式管加入50ul外周血,分別加入CD4-Tc、OX40-FITC和OX40L-PE,4℃度反應時間20min;(2)同時設陰性對照管,對照管中加入CD4-Tc、IgG-FITC和IgG-PE或CD19-FITC、IgG-PE,4度反應20min;(3)加入溶血劑裂解紅細
3、胞直至液體變清;(4)再加磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌;(5)離心1800rpm,5min;(6)離心后,倒掉上清,加0.5ml PBS上流式細胞儀測表型。
結果:OX40和OX40L在CD4+T細胞上共表達。與正常對照組相比:(1)SLE患者外周血中,CD4+TOX40+OX40L+細胞亞群數量增加;(2)CD8+TOX40+OX40L+細胞亞群數量無變化;(3)OX40L+B細胞增加;(4)OX40L+單核細胞增加;(5
4、)OX40L在NK細胞上表達增強。在SLE患者中,腎炎型患者CD4+OX40+T細胞增加且明顯大于非腎炎型;此外,發(fā)現SLE患者治療后OX40和OX40L表達均有不同程度下調。
結論:SLE患者外周血T淋巴細胞、單核細胞、NK細胞上存在OX40和OX40L的異常表達,在腎炎型患者表達上調,治療前后表達水平有顯著變化。提示OX40/OX40L信號在T細胞與單核細胞、NK細胞的相互作用過程中可能有助于T細胞的持續(xù)活化,從而參與
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