簡介：目的聚電解質(zhì)絡(luò)合法制作海藻酸鈉殼聚糖海澡酸鈉（ACA）微囊化人內(nèi)皮抑素293（HUMANENDOSTATIN293，HES293）細胞，檢測不同密度ACA微囊化HES293細胞體外培養(yǎng)狀況下的生物學性狀，及其對人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC）的作用；比較微囊前后HES293細胞生物學性狀差異。方法聚電解質(zhì)絡(luò)合法制作不同密度的ACA微囊化HES293細胞，分為3組A組低密度組，為1104CELLSML組；B組中密度組，為1106CELLSML組；C組高密度組，為1108CELLSML組，每組6個樣本，分別在實驗觀察的第1、3、7、14、35天，采用倒置顯微鏡觀察、臺盼蘭染色計數(shù)不同密度微囊化細胞的細胞總數(shù)和存活率，MTT法測定微囊化HES293細胞及微囊化HES293細胞與HUVEC共培養(yǎng)后HUVEC生長狀況、ELISA法檢測上清液中目的蛋白的含量；流式細胞術(shù)檢測微囊前后HES293細胞細胞周期。結(jié)果在實驗觀察的35天內(nèi)，聚電解質(zhì)絡(luò)合法制作的三種不同密度的ACA微囊化HES293細胞，囊壁透明球形，表面光滑，直徑為500700ΜM。13天內(nèi)，細胞以單細胞形式均勻分布于囊內(nèi)空間。7天以后，細胞逐漸聚集生長為大小不等的細胞團。三組微囊囊內(nèi)細胞總數(shù)和活細胞數(shù)均隨時間延長而增多，囊內(nèi)細胞存活率均于第3天達最高，此后B組細胞存活率高于A、C組。三組細胞生長速率均于第7天達高峰，此后B組細胞存活率基本保持穩(wěn)定，而A、C兩組持續(xù)降低，并于第35天降至最低點。ELISA法檢測三組微包囊上清液目的蛋白含量發(fā)現(xiàn)，B、C組第7天釋放ES蛋白量達最高，分別為21763±2796NGML，17974±1064NGML；B組第7天以后趨于穩(wěn)定，直至第35天；A組在第14天分泌ES蛋白量達最高，為17537±2623NGML，以后顯著下降，第35天降至最低。三組ACA微囊化HES293細胞與HUECV細胞共培養(yǎng)，第24小時，三組微囊化細胞對HUVEC細胞的增殖均未表現(xiàn)抑制作用，三組OD值分別與空白組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P0536，0620，0151，0901，0397，0334）第72小時，三組OD值均較空白組低，差異有顯著統(tǒng)計學意義（P0000，0000，0000），其中，A組低于B、C兩組，差異有統(tǒng)計學意義（P0022，P0006）；第120小時，三組OD值均較空白組低，差異有顯著統(tǒng)計學意義（P0000，0000，0000），其中，B組低于A、C兩組，差異有統(tǒng)計學意義（P0040，P0002）。MTT法對一周內(nèi)微囊化與非微囊化HES293細胞檢測發(fā)現(xiàn)，微囊化細胞在前3天生長緩慢，第5天以后生長速率基本上與非微囊化細胞相當。兩組在1、3、5、7天的OD值無統(tǒng)計學差異（T10267，P10795；T31923，P30083；T51363，P50203；T71424，P70185）；流式細胞術(shù)分析微囊化與非微囊化HES293細胞的S期比例發(fā)現(xiàn)，第1天和第3天，兩組細胞S期的百分含量差別不大（T11061，P10443；T30676，P30551）；培養(yǎng)至第7天時，微囊化細胞S期的百分含量高于非微囊化細胞，差別有統(tǒng)計學意義（T2725，P0034）；第14天微囊化細胞S期的百分含量仍然高于非微囊細胞（T2545，P0044）。結(jié)論1不同密度HES293細胞制作ACA微囊可以影響HES293細胞存活率，其中1X106CELLSML密度制作的微囊，囊內(nèi)細胞存活率較高，生長較穩(wěn)定。2微囊化HES293細胞可穩(wěn)定釋放ES蛋白，并可抑制HUVEC生長。3微囊化HES293細胞比非微囊化HES293細胞有較高的增殖和代謝活性，且能較長時間保持此活性。

簡介：第四軍醫(yī)大學碩士學位論文嗅神經(jīng)鞘細胞體外生物學作用的實驗研究及NT3的轉(zhuǎn)染表達檢測姓名楊浩申請學位級別碩士專業(yè)神經(jīng)生物學指導教師鞠躬200161PVDFPOLYVINYLIDENDIFHODDEEDTAA02

簡介：動脈粥樣硬化是一個全身性的病理過程，可導致動脈狹窄甚至閉塞，是造成心肌梗死、腦卒中和周圍血管慢性缺血性疾病的首要病因。經(jīng)皮腔內(nèi)血管成形術(shù)與支架植入術(shù)是目前治療動脈狹窄閉塞性疾病的常用方法，然而，術(shù)后數(shù)月內(nèi)血管往往會再狹窄甚至再閉塞，因此其遠期療效仍然未盡如人意。血管平滑肌細胞VSMC的異常增殖和遷移被認為與動脈粥樣硬化和支架植入術(shù)后再狹窄有關(guān)，而表型轉(zhuǎn)換是活化的VSMC發(fā)生上述生物學行為改變的基礎(chǔ)。因此，預(yù)防和延緩VSMC的異常增殖、遷移和表型轉(zhuǎn)換，對防治動脈粥樣硬化和支架術(shù)后再狹窄意義重大。臨床上，他汀類藥物和抗氧化藥物常用于防治上述疾病。他汀類藥物通過抑制VSMC增殖并從誘導其凋亡，可抑制血管成形術(shù)后內(nèi)膜增生，故除用于降低血脂外，已作為一種抑制內(nèi)膜增生的藥物廣泛應(yīng)用于臨床。而普羅布考等抗氧化藥物是一種新型的抗動脈粥樣硬化藥物，與VSMC的生物學行為的關(guān)系目前仍未完全明確，因此有必要探明他汀類藥物和普羅布考對其生物學行為的影響，并比較兩者的異同。本課題將使用氧化低密度脂蛋白OXLDL分別誘導大鼠VSMC發(fā)生增殖、遷移和表型轉(zhuǎn)換，其后給予不同濃度的阿托伐他汀、普羅布考或兩者聯(lián)用，觀察這兩種藥物對VSMC上述生物學行為的影響，并比較兩者單用及聯(lián)用時效應(yīng)的異同和強弱，為今后臨床用藥提供依據(jù)和參考方案。第一部分血管平滑肌細胞的分離與培養(yǎng)目的從健康雄性SD大鼠胸腹主動脈中分離、培養(yǎng)及鑒定中膜VSMC，建立簡單有效的原代VSMC培養(yǎng)體系。方法無菌條件下取出健康雄性SD大鼠胸腹主動脈，去除外膜及內(nèi)膜后，采用組織貼塊法分離和培養(yǎng)中膜VSMC，并適時傳代、凍存和復蘇。通過倒置顯微鏡連續(xù)觀察細胞生長情況，臺盼藍染色檢測細胞活力，免疫細胞化學染色鑒定細胞純度。結(jié)果在貼塊后4D7D，原代細胞從小組織塊周圍萌出，隨后的10D14D細胞逐漸遷出和生長，最終融合成致密的細胞層，從貼塊到原代細胞傳代的時間為2W3W。多數(shù)原代VSMC表現(xiàn)為典型的長梭形或三角形，胞漿豐富，生長至融合狀態(tài)時呈現(xiàn)出“峰谷”樣排列，傳代后的VSMC形態(tài)和排列與原代細胞保持一致。臺盼藍染色示細胞活力為963％±18％。SMΑACTIN染色陽性的VSMC百分比為954％±27％。結(jié)論通過組織貼塊法，可在體外成功分離獲得正常大鼠主動脈中膜VSMC，其中絕大多數(shù)是收縮型細胞，而且活力好，純度高，可用于研究VSMC的增殖、遷移和表型轉(zhuǎn)換等生物學行為。第二部分他汀類藥物與抗氧化藥物對血管平滑肌細胞增殖的影響目的觀察他汀類藥物和抗氧化藥物對VSMC增殖的影響，評估兩者單用及聯(lián)用時的影響程度差異，并根據(jù)實驗結(jié)果，確定阿托伐他汀和普羅布考的最佳作用濃度。方法用MTT比色法評估阿托伐他汀在01ΜMOLL10ΜMOLL、普羅布考在1ΜMOLL100ΜMOLL的濃度范圍內(nèi)，分別單用和聯(lián)用時的細胞毒性。以O(shè)XLDL刺激VSMC，在上述濃度下分別單用和聯(lián)用阿托伐他汀和普羅布考，比較各組VSMC的吸光值。結(jié)果在上述濃度下，阿托伐他汀P0214、普羅布考（P0547）和兩藥聯(lián)用（P0999）對VSMC沒有細胞毒性作用。OXLDL能誘導VSMC增殖，使吸光度升高，而單用普羅布考P＜0001和兩藥聯(lián)用（P0001）可降低VSMC吸光值。阿托伐他汀和普羅布考分別在10ΜMOLL和100ΜMOLL時，對VSMC的作用最顯著。結(jié)論單用普羅布考及聯(lián)用阿托伐他汀與普羅布考均可顯著抑制VSMC的增殖，且這一抑制作用是劑量依賴性的。單用阿托伐他汀能否抑制OXLDL誘導的VSMC增殖活動，需要更大樣本量的實驗證實。第三部分他汀類藥物與抗氧化藥物對血管平滑肌細胞遷移的影響目的觀察他汀類藥物和抗氧化藥物對VSMC遷移的影響，并評估兩者單用及聯(lián)用時的影響程度差異。方法以O(shè)XLDL刺激VSMC后，分別單用和聯(lián)用阿托伐他汀10ΜMOLL和普羅布考100ΜMOLL，其后在熒光顯微鏡下觀察對照組、OXLDL組、阿托伐他汀組、普羅布考組和阿托伐他汀普羅布考組VSMC的遷移情況，并拍照記錄，計算各照片中VSMC遷移進入刮除區(qū)后在刮除區(qū)所占的面積百分比，以進行細胞平面遷移分析。結(jié)果對照組遷移VSMC占細胞刮除區(qū)內(nèi)面積的百分比為580％±285％，OXLDL組為1742％±997％，阿托伐他汀組為968％±265％，普羅布考組為1184％±514％，阿托伐他汀普羅布考組為528％±224％。對照組與OXLDL組之間（P0004）及阿托伐他汀普羅布考組與OXLDL組之間P0002有顯著性差異，其余各對比較無顯著性差異。結(jié)論聯(lián)用阿托伐他汀和普羅布考可顯著抑制OXLDL誘導的VSMC的遷移行為。大樣本量的研究或可證明單用阿托伐他汀和單用普羅布考是否確能抑制VSMC發(fā)生遷移。第四部分他汀類藥物與抗氧化藥物對血管平滑肌細胞表型轉(zhuǎn)換的影響目的觀察他汀類藥物和抗氧化藥物對VSMC表型轉(zhuǎn)換的影響，并評估兩者單用及聯(lián)用時的影響程度差異。方法以O(shè)XLDL刺激VSMC，其后分別使用10ΜMOLL阿托伐他汀、100ΜMOLL普羅布考和10ΜMOLL阿托伐他汀100ΜMOLL普羅布考，通過透射電子顯微鏡觀察各組VSMC的形態(tài)，免疫組織化學、WESTERNBLOT和REALTIMEPCR法檢測各組細胞的VSMC表型蛋白、Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白的表達情況。結(jié)果與對照組相比，OXLDL組VSMC肌絲大量減少甚至消失，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細胞器增多和擴張，線粒體也增多阿托伐他汀組、普羅布考組和阿托伐他汀普羅布考組VSMC的肌絲多于OXLDL組但少于對照組，而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)則少于OXLDL組VSMC。OXLDL組VSMC的SMΑACTIN、SMMHC和SMOOTHELIN的表達量在蛋白水平和MRNA水平上均顯著降低，而OPN水平顯著增高，膠原蛋白Ⅰ和Ⅲ也顯著增多。阿托伐他汀組和普羅布考組的收縮型標志物表達水平高于OXLDL組但低于對照組，OPN和膠原蛋白Ⅰ和Ⅲ的水平則低于OXLDL組。阿托伐他汀普羅布考組VSMC的收縮型標志物表達水平比阿托伐他汀組和普羅布考組更高，OPN和膠原蛋白水平則比之更低。結(jié)論阿托伐他汀和普羅布考單用時可抑制VSMC發(fā)生表型轉(zhuǎn)換，而聯(lián)用兩藥時其抑制效應(yīng)更為明顯。

簡介：目的電子起搏器的局限性促使人們在緩慢性心律失常的治療中尋找新的途徑和方法，體外重新構(gòu)建具有竇房結(jié)功能的細胞便是嘗試之一。目前主要以HCN4基因轉(zhuǎn)染干細胞，其雖能分化成心肌樣細胞，但由于缺乏竇房結(jié)標記基因，功能上與竇房結(jié)細胞仍有差距。TBX3基因在胚胎發(fā)育成熟晚期存在于竇房結(jié)前體細胞中使之保留起搏功能并抑制竇房結(jié)前體細胞向心房肌細胞分化。同時TBX3與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)乳腺癌、膀胱癌、肝癌等惡性腫瘤都存在TBX3基因的過表達。本研究擬構(gòu)建同時攜帶有人。HCN4基因、TBX3基因及增強型綠色熒光蛋白基因EGFP的慢病毒顆粒，并研究HCN4和TBX3對小鼠胚胎干細胞EMBRYONICSTEMCELL，ES細胞生物學活性的影響，為進一步通過HCN4、TBX3共表達重建竇房結(jié)細胞功能奠定基礎(chǔ)。方法1、慢病毒包裝及滴度測定用脂質(zhì)體LIPOFECTAMINE2000分別包裹攜帶有目的基因的HHCN4HTBX3EGFP、HHCN4EGFP、HTBX3EGFP、EGFP四種目的質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒，共轉(zhuǎn)染293FT細胞，分別產(chǎn)生含有表達HHCN4HTBX3EGFP、HHCN4EGFP、HTBX3EGFP、EGFP基因的四種慢病毒顆粒，計數(shù)熒光克隆數(shù)目，并計算病毒滴度。2、干細胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染和篩選將獲得的四種慢病毒顆粒分別轉(zhuǎn)染小鼠ES細胞，48小時后于熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效果。將轉(zhuǎn)染成功的細胞進行傳代擴增并進行挑克隆純化，RTPCR進一步檢測目的基因表達情況。3、ES細胞生物學活性的評價觀察獲得的四種轉(zhuǎn)基因小鼠ES細胞的形態(tài)、熒光表達強度。MTT法測定各組ES細胞OD值，流式細胞儀分析細胞凋亡率。結(jié)果1、HHCN4HTBX3慢病毒顆粒的構(gòu)建四質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293FT細胞后，根據(jù)熒光顯微鏡觀察結(jié)果表明成功構(gòu)建HHCN4HTBX3EGFP、HHCN4EGFP、HTBX3EGFP、EGFP四種慢病毒顆粒。病毒滴度測定結(jié)果分別為47107TUML、52107TUML、45107TUML、67107TUML。2、轉(zhuǎn)基因ES細胞相關(guān)基因的表達檢測四種慢病毒轉(zhuǎn)染后的ES細胞挑克隆純化后熒光表達正常，RTPCR示目的基因表達良好。3、ES細胞形態(tài)、凋亡等變化四種轉(zhuǎn)染小鼠ES細胞中，含HHCN4EGFP及EGFP細胞形態(tài)良好，熒光率較高，含HTBX3EGFP和HHCN4HTBX3EGFP細胞狀態(tài)相對差，熒光雖然明顯，但表達不強，培養(yǎng)上清可見漂浮的死細胞。進一步的MTT和流式細胞儀ANNEXINVPE檢測示HTBX3EGFP、HHCN4HTBX3兩組細胞生長速度明顯減慢，凋亡率顯著增高P結(jié)論1成功構(gòu)建出HCN4TBX3基因的慢病毒顆粒。2HCN4及TBX3基因成功在干細胞中過表達。3TBX3對干細胞增殖無促進作用。

簡介：第一軍醫(yī)大學2002級碩士學位論女818728釉基質(zhì)蛋白和骨形成蛋白影響牙周膜細胞生物學功能的研究INVESTIGATIONOFPDLCS’BIOLOGYFUNCTIONBYEMPSANDBMP2課題來源自選專業(yè)名稱學位申請人指導教師答辯委員會主席答辯委員會成員口腔臨床醫(yī)學口腔內(nèi)科學劉蘭寧劉宏偉教授金巖教授章錦才教授程斌教授阮毅副教授才曉慧副教授李少萍副教授論文評閱人徐平平主任醫(yī)師李若蘭副教授2005年5月10日廣州摘要織工程學是近年來發(fā)展起來的一門新學科，其基本方法是將體外培養(yǎng)的高濃度的功能相關(guān)的活細胞種植到具有一定空間結(jié)構(gòu)的三維支架上，再將此細胞支架復合物植入體內(nèi)或在體外繼續(xù)培養(yǎng)，通過細胞之間的相互粘附、生長繁殖分泌細胞外基質(zhì)，從而形成具有一定結(jié)構(gòu)和功能的組織或器官，以達到修復創(chuàng)傷和重建功能的目的。因此，研究釉基質(zhì)蛋白和骨形成蛋白對牙周膜細胞功能的影響將有助于我們了解牙周組織再生的機理，為組織工程在牙周疾病治療方面的應(yīng)用奠定實驗基礎(chǔ)?；谝陨显?，本論文進行了以下實驗一、釉基質(zhì)蛋白和骨形成蛋白對人牙周膜細胞增殖的影響本實驗采用細胞培養(yǎng)、MTT比色法，檢測了不同濃度的釉基質(zhì)蛋白和骨形成蛋白單獨或聯(lián)合應(yīng)用對人PDLCS增殖的影響，測因子作用后第3、7天OD值，進行統(tǒng)計分析，以進一步觀察分析釉基質(zhì)蛋白和骨形成蛋白促人PDLCS增殖的作用及其可能作用機理。結(jié)果表明3天內(nèi)、7天內(nèi)以及3_7天時間段內(nèi)結(jié)果基本相似，釉基質(zhì)蛋白和骨形成蛋白單獨應(yīng)用均可促進人PDLCS增殖，兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用。釉基質(zhì)蛋白和骨形成蛋白的促增殖作用里劑量依賴性，骨形成蛋白以LOOUG／L作用較佳，釉基質(zhì)蛋白以LOOMG／L，作用較佳。且釉基質(zhì)蛋白對人PDLCS促增殖作用不如骨形成蛋白。二、不同誘導條件對人牙周膜細胞堿性磷酸酶活性及形成礦化結(jié)節(jié)的影響本實驗采用細胞培養(yǎng)、堿性磷酸酶活性檢測法，檢測了LOOUG／L骨形成蛋白和LOOMG／L釉基質(zhì)蛋白對人牙周膜細胞堿性磷酸酶活性的影響，測因子作用后第3、7天OD值，進行統(tǒng)計分析，并與傳統(tǒng)的礦化誘導液進行對比，觀察因子作用后細胞堿性磷酸酶活性變化。結(jié)果表明；堿性磷酸酶活性均明顯升高，礦化誘導作用最強；骨形成蛋白基本與礦化誘導保持持平；釉基質(zhì)蛋白組3天點時，堿性磷酸酶活性與對照組相比，明顯升高，與礦化誘導組差異不顯著。但7天點與37天時間段內(nèi)與對照組相比，細胞堿性磷酸酶活性升高不明顯。II

簡介：HE4蛋白對人卵巢癌細胞系SKOV3生物學特性的影響及其機制研究INFLUENCEOFRECOMBINANTHE4PROTEINONTHEBIOLOGICALBEHAVIORSOFSKOV3OVARIANCANCERCELLSANDTHEPOTENTIALMECHANISMS研究生王歡導二級學科論文課題起止時間至Q蘭生Z旦二2Q壘生壘旦論文完成時間2Q壘生壘旦中國醫(yī)科大學遼寧2014年5月目錄一、摘要中文論著摘要1英文論著摘要4二、英文縮略語8三、論文論文一1￡JL一日U舌9材料與方法10實驗結(jié)果17討侖21結(jié)侖21論文二1LL、日U吾一22材料與方法22實驗結(jié)果26討論34結(jié)論37四、本研究創(chuàng)新性的自我評價38五、參考文獻39六、附錄綜述42在學期間科研成績50致謝51個人簡介52

簡介：第四軍醫(yī)大學碩士學位論文17Β雌二醇對涎腺粘液表皮樣癌高轉(zhuǎn)移細胞MC3轉(zhuǎn)移相關(guān)生物學特性的影響姓名溫德升申請學位級別碩士專業(yè)口腔基礎(chǔ)醫(yī)學指導教師吳軍正20040501第四軍醫(yī)大學碩士學位論文縮略語E2ERMC3FNMMPSVEGFPBSMCFCSDABSPBSATEMED縮略語表英文全稱17BETAESTRADIOLESTROGENRECEPTORMUCOEPIDERMOIDCARCINOMACELLLINEFIBRONECTINMATRIXMETALLOPROTEINASESVASCULARENDOTHELIALGROWTHFACTORPHOSPHATEBUFFEREDSALINEIMMUNOHISTOCHEMISTRYFETALCALFSERUM33一DIAMINODENZIDINETETRAHYDROCHLORIDESTREPTAVIDIN／PEROXIDASEBOVINESERTLNLALBUMINNNN’NTETRAMETHYLENEDIAMINE中文全稱17B一雌二醇雌激素受體粘液表皮樣癌細胞系纖維粘連蛋白基質(zhì)金屬蛋白酶血管內(nèi)皮生長因子磷酸鹽緩沖液免疫組織化學胎牛血清3二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸鹽過氧化物酶標記的鏈霉卵自索牛血清白蛋白四甲基乙二胺

簡介：目的1構(gòu)建重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體MIGR1ICAM1，探討細胞間粘附分子1INTERCELLULARCELLADHESIONMOLECULE1，ICAM1基因轉(zhuǎn)染對小鼠間充質(zhì)干細胞MESENCHYMALSTEMCELLS，MSCS生物學特性的影響。為進一步研究ICAM1是否影響MSCS對自身免疫性甲狀腺炎AUTOIMMUNETHYROIDITIS，AIT體內(nèi)治療效果提供實驗基礎(chǔ)。2利用外源性甲狀腺球蛋白免疫C57BL6小鼠建立AIT的動物模型實驗性自身免疫性甲狀腺炎EXPERIMENTALAUTOIMMUNETHYROIDITIS，EAT，為下一步開展大規(guī)模體內(nèi)實驗提供穩(wěn)定可靠的動物模型。方法1通過RTPCR方法擴增獲得小鼠脾細胞ICAM1基因全長DNA，將其克隆至中間載體PMD19T，行雙酶切及DNA測序鑒定后，將ICAM1基因連接至逆轉(zhuǎn)錄病毒載體MIGR1上，對重組載體MIGR1ICAM1進行雙酶切、RTPCR及DNA測序分析。2將獲得的重組逆轉(zhuǎn)錄病毒質(zhì)粒MIGR1ICAM1及空質(zhì)粒MIGR1均加入包裝質(zhì)粒ECOS后分別轉(zhuǎn)染人胚腎細胞T293細胞，將獲得攜帶ICAM1基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒MIGR1ICAM1及空載體逆轉(zhuǎn)錄病毒MIGR1，分別感染C3H10T12細胞，熒光倒置顯微鏡下觀察熒光蛋白的表達，REALTIMEPCR和流式細胞術(shù)檢測ICAM1在基因水平和蛋白水平的表達。同時檢測三種細胞的形態(tài)、表型、生長特點及成脂成骨分化等一般生物學特性并通過淋巴母細胞轉(zhuǎn)化實驗LYMPHOCYTETRANSFMATIONTEST，LTT及混合淋巴細胞反應(yīng)實驗MIXEDLYMPHOCYTEREACTION，MLR檢測三種細胞的免疫學特性。3建立EAT動物模型，將5周齡雌性C57BL6小鼠于第0D和第14D用豬甲狀腺免疫球蛋白PCINETHYROGLOBULI，PTG及弗氏佐劑FREUNDSADJUVANT，F(xiàn)A進行兩次免疫于實驗第28D眼球取血，測血清甲狀腺球蛋白抗體THYROGLOBULINANTIBODY，TGAB、甲狀腺過氧化物酶抗體ANTITHYROIDPEROXIDASEANTIBODIES，TPOAB、甲狀腺微粒體抗體THYROIDMICROSOMALAUTOANTIBODY，TMAB水平，并分離甲狀腺組織行HE染色及組織病分析。結(jié)果1對重組載體MIGR1ICAM1雙酶切和RTPCR電泳均顯示獲得1700BPICAM1目的基因片段DNA測序結(jié)果顯示與基因文庫中的小鼠ICAM1基因序列完全相同，且插入方向正確，從而證實成功構(gòu)建重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體MIGR1ICAM1。2逆轉(zhuǎn)錄病毒感染C3H10T12細胞后，熒光倒置顯微鏡下可見絕大部分細胞表達綠色熒光REALTIMEPCR和流式細胞術(shù)分別在轉(zhuǎn)錄水平相對表達量162582±11942和蛋白水平（表達量903％）證實ICAM1在C3H10T12細胞中均有高表達，從而證明獲得穩(wěn)定過表達ICAM1的間充質(zhì)干細胞系C3H10T12C3H10T12MIGR1ICAM1MSC。3進一步對過表達ICAM1的C3H10T12細胞的生長特性、誘導分化能力及免疫學功能進行研究，結(jié)果表明，過表達ICAM1可使C3H10T12細胞2918±247％處于S期，且倍增時間縮短。在成脂誘導分化中，C3H10T12MIGR1ICAM1MSC獲得脂肪細胞數(shù)顯著降低1218±383孔，且脂滴變小REALTIMEPCR檢測成脂分化關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子CEBPΑ和PPARΓ的表達均顯著下調(diào)同樣，在成骨分化中，過表達ICAM1可使C3H10T12成骨分化的堿性磷酸酶活性及礦化骨結(jié)節(jié)形成能力顯著下降，關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子RUNX2和OSTEOCALCIN在MRNA表達水平亦顯著降低，提示過表達ICAM1可顯著降低MSCS的成脂和成骨分化能力。4利用淋巴母細胞轉(zhuǎn)化實驗LYMPHOCYTETRANSFMATIONTEST，LTT和混合淋巴細胞反應(yīng)MIXEDLYMPHOCYTEREACTION，MLR對過表達ICAM1的MSCS進行免疫功能檢測，結(jié)果顯示，在LTT體系中，當MSCS∶T細胞分別為1∶40和1∶5時，C3H10T12MIGR1ICAM1MSC與對照組C3H10T12MIGR1MSC的CPM值分別為195525±29260、228533±3036781200±2117、133500±20918同樣，在MSCS作為滋養(yǎng)層的MLR反應(yīng)體系中，當刺激細胞∶效應(yīng)細胞為1∶1和1∶25時，C3H10T12MIGR1ICAM1MSC與對照組C3H10T12MIGR1MSC的CPM值分別為159850±11074、185900±11125114750±5591、149300±9833。提示過表達ICAM1的MSCS具有顯著抑制T細胞增殖的能力，且具有劑量依賴性，隨著MSCS數(shù)量的增加，其抑制能力逐漸增強。5C57BL6小鼠經(jīng)外源性甲狀腺球蛋白皮下免疫誘導后，結(jié)果顯示，模型組小鼠血清中TPOAB、TMAB、TGAB的水平6036±453、6747±625、6567±535均顯著高于對照組小鼠2145±466、768±276、759±223甲狀腺病理顯示濾泡間質(zhì)存在淋巴細胞浸潤情況，具有典型EAT特征。結(jié)論1本研究通過構(gòu)建ICAM1的重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體MIGR1ICAM1，成功獲得穩(wěn)定過表達ICAM1的間充質(zhì)干細胞系C3H10T12MIGR1ICAM1MSC。2對過表達ICAM1的MSCS生物學特性研究表明，過表達ICAM1可使MSCS增殖能力增強、成脂成骨分化能力減弱最為關(guān)鍵的是，過表達ICAM1可顯著增強MSCS的免疫抑制作用，為進一步研究ICAM1是否影響MSCS對AIT體內(nèi)治療效果提供實驗基礎(chǔ)。3同時本研究利用外源性甲狀腺自身抗原免疫方法成功建立EAT，從而證實該實驗方法建模成功率高、可行性強并且可重復性高。為下一步的體內(nèi)實驗提供了穩(wěn)定可靠的動物模型。

簡介：中南大學碩士學位論文大蒜素對人牙周膜成纖維細胞的生物學作用姓名吳更申請學位級別碩士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學指導教師謝曉莉20090501七年制碩士學位論文中文摘要3不同濃度大蒜素對人牙周膜成纖維細胞超微結(jié)構(gòu)有不同程度的損傷，10MG／1，102MG／1，103MG／L組的損傷作用明顯。結(jié)論I大蒜素對人牙周膜成纖維細胞的增殖和蛋白合成起抑制作用，呈劑量．效應(yīng)依賴關(guān)系。在本實驗條件下半數(shù)抑制率濃度為22MG／L。2大蒜素對人牙周膜成纖維細胞的超微結(jié)構(gòu)有不同程度的損傷。關(guān)鍵詞大蒜素，人牙周膜成纖維細胞，細胞增殖，總蛋白含量，超微結(jié)構(gòu)II

簡介：點擊查看更多TM-TNF-α正向與反向信號對單核細胞系U937生物學功能的影響.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：分類號學號M201175513學校代碼10487密級碩士學位論文碩士學位論文神經(jīng)母細胞瘤高表達基因1（NHEG1）的生物學功能及其機制研究神經(jīng)母細胞瘤高表達基因1（NHEG1）的生物學功能及其機制研究學位申請人學位申請人楊德華楊德華學科專業(yè)學科專業(yè)小兒外科小兒外科指導教師指導教師童強松童強松教授教授答辯日期答辯日期2014年5月獨創(chuàng)性聲明獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明，本學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果的總結(jié)。盡我所知，除文中已經(jīng)標明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本人將承擔本聲明引起的一切法律后果。學位論文作者簽名日期年月日學位論文版權(quán)使用授權(quán)書學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。保密□，在_____年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□。（請在以上方框內(nèi)打“√”）學位論文作者簽名指導教師簽名日期年月日日期年月

簡介：中圖分類號密級共相關(guān)蛋白ANXA7／GAL3／SRI在小鼠肝癌細胞中的表達及對細胞生物學行為的影響計學位論文43頁表格2個插圖14幅宋琳指導教師唐建武教授申請學位級別碩士學位學科專業(yè)病理學與病理生理學培養(yǎng)單位大連醫(yī)科大學完成時間二O一四年五月基礎(chǔ)醫(yī)學院答辯委員會主席關(guān)于學位論文使用授權(quán)的說明本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)大連醫(yī)科大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。本學位論文屬于請在以下相應(yīng)方框內(nèi)打“√”1保密口，在年解密后適用本授權(quán)書。2不保密口。作者簽名導師簽名日期年月日日期年月日

簡介：非典型趨化因子受體CCRLL對肝細胞癌生物學特性的影響THEIMPACTOFATYPICALCHEMOKINERECEPTORCCRL1ONBIOLOGICALBEHAVIORSOFHEPATOCELLULARCARCINOMA博士研究生施杰毅導師指導組成員樊嘉教授湯其群教授周儉教授高強博士課題基金資助國家自然科學基金重點項目NO81030038國家重點科技項目2012ZXL0002011002致謝。109論文聲明封二

簡介：點擊查看更多雙特異性抗體通過FcαR介導的中性粒細胞生物學效應(yīng).pdf精彩內(nèi)容。

簡介：同等學力人員碩士學位論文論文題目LGR5在宮頸癌組織表達的臨床意義及其對宮頸癌細胞生物學行為的影響研究生姓名鄧云指導教師姓名居頌光專業(yè)名稱免疫學研究方向腫瘤免疫論文提交日期2014年4月