簡(jiǎn)介：分類號(hào)UDC密級(jí)編號(hào)角方霜糾六摩碩士學(xué)位論文SGK3在鼻咽癌中的表達(dá)及其影響鼻咽癌細(xì)胞生物學(xué)特性的相關(guān)性研究THEEXPRESSIONOFSGK3ANDITSEFFECTONCELLBIOLOGICCHARACTERISTICSINNASOPHARYNGEALCARCINOMA導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型論文提交日期陳婧李永賀教授耳鼻咽喉科學(xué)專業(yè)型碩士2017年5月04日碩士學(xué)位論文SGK3在鼻咽癌中的表達(dá)及其影響鼻咽癌細(xì)胞生物學(xué)特性的相關(guān)性研究碩士研究生陳婧指導(dǎo)教師李永賀教授摘要目的鼻咽癌NASOPHARYNGEALCARCINOMA，NPC是一種具有區(qū)域性分布以及種族聚集性特征的頭頸部惡性腫瘤，好發(fā)于我國(guó)南方及東南亞地區(qū)。鼻咽癌發(fā)生于鼻咽部粘膜，其病理類型多為低分化鱗狀細(xì)胞癌，惡性程度較高，早期即可出現(xiàn)頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。鼻咽癌大多對(duì)放療有中度敏感性，以適形調(diào)強(qiáng)放療為主的綜合治療極大地提高了鼻咽癌的局部控制率，卻未能顯著降低其遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率，治療失敗的主要原因是局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。因此，深入研究鼻咽癌的發(fā)生與發(fā)展機(jī)制，對(duì)改善鼻咽癌治療效果、提高患者生存率有重大意義。血清和糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶SERUMANDGLUCOCORTICOID．INDUCIBLEKINASE，SGK是一種絲氨酸／蘇氨酸激酶，與蛋白激酶BPROTEINKINASEB，PKBORAKT同屬于AGC蛋白激酶家族成員，與AKT高度同源并調(diào)節(jié)與其類似的細(xì)胞過程，參與調(diào)控細(xì)胞增殖凋亡、細(xì)胞周期以及離子通道等，是細(xì)胞磷酸化級(jí)聯(lián)反應(yīng)和多種細(xì)胞信號(hào)通路的一個(gè)功能性交匯點(diǎn)。SGK3是SGK家族的一員，其THR256位點(diǎn)可被PDKL磷酸化而激活，被認(rèn)為是一種JIEAKT依賴性的腫瘤信號(hào)傳導(dǎo)方式。研究表明，SGK3在很多惡性腫瘤中高度表達(dá)，對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展起著重要作用，如乳腺癌、肝癌、前列腺癌等，但SGK3與鼻咽癌的相關(guān)性研究目前國(guó)內(nèi)外尚未見報(bào)道。本文旨在研究SGK3在鼻咽癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)情況，以及SGK3對(duì)鼻咽癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響，探討SGK3表達(dá)與鼻咽癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。

簡(jiǎn)介：CAJAL細(xì)胞INTERSTITIALCELLSOICAIAL，ICCS作為一種特殊的間質(zhì)細(xì)胞，以細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)的形式分布于整個(gè)胃腸道，能產(chǎn)生自發(fā)性電慢波、參與神經(jīng)信息傳遞，在調(diào)節(jié)胃腸道平滑肌運(yùn)動(dòng)中具有重要作用。近年臨床研究發(fā)現(xiàn)ICCS與一些新生兒胃腸運(yùn)動(dòng)功能障礙性疾病如嬰兒肥厚性幽門狹窄INFANTILEHYPERTROPHICPYLICSTENOSIS，IHPS、新生兒假性腸梗阻NEONATALPSEUDOOBSTRUCTION、先天性巨結(jié)腸HIRSCHSPRUNG’SDISEASE，HD及胃腸術(shù)后一過性腸麻痹等密切相關(guān)。盡管上述疾病的發(fā)生機(jī)制尚不清楚，但均有一個(gè)共同的特點(diǎn)病變部位胃腸壁內(nèi)ICCS數(shù)量呈不同程度減少，甚至缺如，ICCS彼此間不能形成完整的細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)，說明ICCS發(fā)育過程的延遲或異?？赡軙?huì)導(dǎo)致新生兒胃腸運(yùn)動(dòng)出現(xiàn)障礙。因此闡明ICCS的發(fā)育規(guī)律及增殖再生潛能，將對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)功能障礙性疾病的發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)和治療提供一定的指導(dǎo)作用。目前關(guān)于ICCS細(xì)胞的發(fā)育學(xué)研究主要集中在胚胎期，研究結(jié)果顯示胚胎期ICCS的數(shù)量隨著胎齡增加而增多，突起逐漸延長(zhǎng)，出生前后已形成與成人相似的細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)。而且認(rèn)為該細(xì)胞只在胚胎期及新生早期具有增殖能力。但關(guān)于哺乳動(dòng)物出生后ICCS的發(fā)育變化規(guī)律及正常生理?xiàng)l件下的增殖特性尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。此外，CKIT原癌基因及KIT蛋白作為ICCS的特異性標(biāo)記物不僅能在ICCS持續(xù)表達(dá)，而且KIT信號(hào)通路對(duì)其發(fā)育、分化、增殖、存活、及正常功能的維持等均具有重要調(diào)控作用。但在上述疾病中，隨ICCS數(shù)量的減少，KIT蛋白表達(dá)亦明顯下調(diào)，無法對(duì)ICCS進(jìn)行有效標(biāo)記，所以ICCS確切的命運(yùn)轉(zhuǎn)歸如何并不清楚。因此，本論文首先研究出生后ICCS發(fā)育的時(shí)空變化規(guī)律，然后觀察成體ICCS是否仍然能夠增殖及不同年齡階段ICCS的增殖特點(diǎn)，最后研究CD44在胃腸道內(nèi)的表達(dá)模式及其與ICCS的關(guān)系。主要結(jié)果如下1出生后，小腸的長(zhǎng)度、直徑及表面積不斷增加，P32達(dá)到成年水平。應(yīng)用KIT免疫熒光染色觀察到出生時(shí)腸壁內(nèi)ICCS主要位于肌間神經(jīng)叢附近，細(xì)胞呈星形，核周胞質(zhì)少，通過23個(gè)細(xì)小的突起及分支彼此相連形成較稀疏的細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)。隨著年齡的增長(zhǎng)，ICMY突起及分支增粗延長(zhǎng)，數(shù)量明顯增多，P32達(dá)PO的16倍并形成與成年動(dòng)物相似的完整致密的細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)。但腸道各部位ICCS的發(fā)育并不同步，存在從頭端到尾端的時(shí)空差異，回腸ICMY細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)的發(fā)育明顯滯后于十二指腸和空腸。2通過給不同年齡的小鼠注射BRDU并結(jié)合KITBRDU免疫熒光雙重染色發(fā)現(xiàn)出牛后ICCS仍具有增殖能力，但隨年齡的增長(zhǎng)其增殖能力會(huì)逐漸降低。成體小腸中存在KITBRDUCD44CD34IGFIR細(xì)胞，可能是ICCS的前體細(xì)胞，可增殖分化為成熟的ICCS。3運(yùn)用CD44、KIT和VIMENTINICCS另一種標(biāo)記物三重免疫熒光染色發(fā)現(xiàn)CD44陽性細(xì)胞與成年哺乳動(dòng)物消化管各段肌層內(nèi)KIT和VIMENTIN陽性的ICCS均基本重合，并緊緊包繞在NF200陽性的神經(jīng)纖維周圍，而平滑肌細(xì)胞及成纖維細(xì)胞中未見該蛋白表達(dá)，說明CD44可作為ICCS細(xì)胞的特異標(biāo)志物。胃腸壁內(nèi)也存在極少量06％KITCD44的細(xì)胞，呈圓形，突起短而少，其分布部位及形態(tài)與胚胎期ICCS前體細(xì)胞相似，推測(cè)可能為成年動(dòng)物中的ICCS前體細(xì)胞。綜上所述，本研究初步證明出生后隨小腸結(jié)構(gòu)的不斷完善ICCS亦可進(jìn)一步發(fā)育，P32左右才形成與成年動(dòng)物相似的細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)。新生期到成年的ICCS仍保持增殖能力，但其增殖能力會(huì)隨年齡的增長(zhǎng)逐漸降低。成體動(dòng)物小腸壁內(nèi)存在KITCD44CD34IGFIR的ICCS前體細(xì)胞，可增殖分化為成熟ICCS。CD44蛋白在成年哺乳動(dòng)物胃腸道肌層內(nèi)的分布與KIT陽性的ICCS基本一致，可作為鑒別該細(xì)胞的特異性標(biāo)記物。

簡(jiǎn)介：碩士學(xué)位論文成骨細(xì)胞誘導(dǎo)對(duì)乳腺癌側(cè)群細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及相關(guān)機(jī)制的初步探討楊曉寧指導(dǎo)教師姜軍教授導(dǎo)師組成員培養(yǎng)單位第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院乳腺中心申請(qǐng)學(xué)位類別碩士學(xué)術(shù)學(xué)位專業(yè)名稱外科學(xué)（普外）論文提交日期2013年5月論文答辯日期2013年5月答辯委員會(huì)主席駱成玉駱成玉評(píng)閱人劉寶華、厲紅元?jiǎng)毴A、厲紅元二〇一三年五月分類號(hào)分類號(hào)R7379密級(jí)公開學(xué)號(hào)2002010320學(xué)校代碼學(xué)校代碼90031目錄縮略語表1英文摘要3中文摘要6論文正文成骨細(xì)胞誘導(dǎo)對(duì)乳腺癌側(cè)群細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及相關(guān)機(jī)制的初步探討8第一章前言8第二章成骨細(xì)胞誘導(dǎo)對(duì)乳腺癌側(cè)群細(xì)胞形態(tài)學(xué)及遷移能力的影響1021材料與方法1022結(jié)果1523討論1924小結(jié)21第三章成骨細(xì)胞誘導(dǎo)對(duì)乳腺癌側(cè)群細(xì)胞OPN、RUNX2、WNT1蛋白表達(dá)水平的影響2231材料與方法2232結(jié)果3033討論3334小結(jié)35全文結(jié)論36參考文獻(xiàn)37文獻(xiàn)綜述乳腺癌骨轉(zhuǎn)移機(jī)制的研究進(jìn)展45參考文獻(xiàn)52碩士研究生期間發(fā)表的論文60致謝61

簡(jiǎn)介：目的探究深低溫冷凍處理對(duì)大鼠髕腱組織中肌腱干細(xì)胞TENDONDERIVEDSTEMCELLS，TDSCS的細(xì)胞存活率、細(xì)胞活力、細(xì)胞早期凋亡率、細(xì)胞遷移能力及肌腱相關(guān)基因表達(dá)的影響。方法實(shí)驗(yàn)組將6只4月齡SD大鼠的髕腱組織取出，置入含有冷凍保護(hù)液的凍存管中，放入冰箱4℃中2小時(shí)，80℃中過夜，投入液氮中保存一星期后取出進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。對(duì)照組將相同條件的大鼠髕腱組織取出后不作任何處理直接細(xì)胞培養(yǎng)。無菌條件下將兩組髕腱組織用Ⅰ型膠原酶3MGML，SIGMA消化獲得有核細(xì)胞，分別用臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)有核細(xì)胞存活率結(jié)晶紫染色檢測(cè)有核細(xì)胞克隆形成能力同等條件下將細(xì)胞培養(yǎng)到第3代P3，用ALAMARBLUE法檢測(cè)肌腱干細(xì)胞體外增殖能力ANNEXINⅤFITCPI雙染法檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡狀態(tài)TRANSWELL法檢測(cè)細(xì)胞遷移能力實(shí)時(shí)定量熒光聚合酶鏈反應(yīng)（REALTIMEPCR）檢測(cè)細(xì)胞肌腱相關(guān)基因COL1Α1、SCX和TNMD的MRNA表達(dá)。結(jié)果與對(duì)照組相比，經(jīng)深低溫冷凍后的髕腱組織來源的有核細(xì)胞存活率下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組原代有核細(xì)胞中均有細(xì)胞克隆的形成，證實(shí)均可成功分離培養(yǎng)鑒定出具有克隆形成能力的肌腱干細(xì)胞，但髕腱組織經(jīng)深低溫冷凍后肌腱干細(xì)胞數(shù)量下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組肌腱干細(xì)胞P3培養(yǎng)14天過程中觀察到細(xì)胞增殖活力相近，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＞005同時(shí)，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組第3代肌腱干細(xì)胞早期凋亡率、細(xì)胞遷移能力、肌腱分化相關(guān)基因表達(dá)量相近，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＞005。結(jié)論深低溫冷凍使大鼠肌腱組織內(nèi)有核細(xì)胞的存活率降低，但肌腱組織仍保留大量有活性的干細(xì)胞。盡管實(shí)驗(yàn)組中肌腱干細(xì)胞的數(shù)量有所下降，但和對(duì)照組中肌腱干細(xì)胞相比，其細(xì)胞增殖能力P3、早期凋亡率、體外遷移能力及成肌腱分化能力未見明顯異常。研究可為臨床應(yīng)用深低溫冷凍保存的同種異體肌腱移植修復(fù)肌腱缺損提供相關(guān)的理論依據(jù)。

簡(jiǎn)介：目的通過對(duì)比觀察P38MAPK阻斷劑及牛膝含藥血清對(duì)骨性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞II型膠原及P38MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響，探討P38MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)軟骨細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)的調(diào)控，以及中藥牛膝對(duì)軟骨細(xì)胞的保護(hù)效應(yīng)。方法通過HULTH造模法得到家兔膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎模型。用聯(lián)合酶消化法得到正常組和模型組家兔膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞。傳代后按照以下分組型藥物干預(yù)A組正常軟骨細(xì)胞，予空白血清；B組模型軟骨細(xì)胞，予空白血清；C組模型軟骨細(xì)胞，予P38MAPK阻斷劑；D組模型軟骨細(xì)胞，予懷牛膝含藥血清。通過免疫熒光和WESTERNBLOT檢測(cè)各組細(xì)胞磷酸化P38MAPK的表達(dá)；通過免疫熒光和WESTERNBLOT檢測(cè)各組細(xì)胞II型膠原的表達(dá)。結(jié)果B、C、D組較A組的磷酸化P38MAPK表達(dá)明顯增強(qiáng)（P005）。結(jié)論力學(xué)因素可以激活軟骨細(xì)胞P38MAPK轉(zhuǎn)導(dǎo)通路；P38MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與了骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展過程；P38MAPK可以阻斷軟骨細(xì)胞P38信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，有保護(hù)軟骨、抑制骨性關(guān)節(jié)炎進(jìn)展的作用；牛膝含藥血清可以阻斷軟骨細(xì)胞P38信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，有保護(hù)軟骨、抑制骨性關(guān)節(jié)炎進(jìn)展的作用。

簡(jiǎn)介：青島大學(xué)碩士學(xué)位論文INDIANHEDGEHOG過表達(dá)對(duì)軟骨細(xì)胞生物學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)研究姓名劉誠(chéng)成申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)口腔正畸指導(dǎo)教師楊竹麗20090530EXPERIMENTALSTUDYONTHEBIOLOGICALINFLUENCESOFHUMENCHONDROCYTESBYOVEREXPRESSINGOFINDIANHEDGEHOGABSTRACTOBJECTIVETOSTUDYTHEMAINBIOLOGICALCHARACTERISTICSOF、HUMENCHONDROCYTESINVITROAFTERPSNAVIHHEGFPANDPSNAVIHHGENETRANSFECTEDBYEXGEN500，ANDTODETECTWHETHERORNOTRECOMBINATIONGENEHAVEAFFECTTOTHEFUNCTIONOFLHH．METHODSTHEIHHCDNAOBTAINEDFROMPLASMIDPCMVIHHWASSUBCLONEDINTOTHEPLASMIDPSNAV2．0BYMOLECULARCLONEWAY．ANDTHEEGFPOBTAINEDFROMPLSMIDN3一EGFPWASSUBCOLONEDINTOTHEPLASMIDPSNAV尼THHBYOVERLAYINGPCR．THECHONDROCYTESOFHUMENCHONDYLARWEREDERIVED，ANDWERECULTUREDINVITRO，HISTOCHEMICALSTAININGSWEREUSEDTODETERMINESPECIALPHENOTYPEOFHUMANCONDYLARCHONDROCYTES，ANDELECTRONMICROSCOPETOOBSERVETHEULTRAMICOSTRUCTURE。THERECOMBINANTPLASMIDOFPSNAVIHHEGFPANDPSNAVIHHTRANSFEREDTHECULTUREDCHONDROCYTEBYEXGEN500RESPECTIVELY,ANDTHEPLASMIDOFPSNAV2．0THATTRANSFECTEDTHECULTREDCHONDROCYTEWASCOMPARATIVEGROUP．THECAPACITYOFCELLPROLIFERATIONWASTESTEDBYMTTANDTHECURVEOFCELLPROLIFERATION．THEDIFFERENCEOFMRNALEVELOFIHHANDPTCWERETESTEDBYPCRAFTERTHECULTUREDCHONDROCYTEHADBEENTRANSFEREDTOSTUDYTHEBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFCHONDROCYTESINVITRO

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多脊髓膠質(zhì)細(xì)胞慢性疼痛和嗎啡鎮(zhèn)痛耐受新靶點(diǎn)分子的生物學(xué)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書而使用過的材料。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名三苯氧胺在乳腺癌細(xì)胞中的生物學(xué)功能及其機(jī)制的研究中文摘要三苯氧胺在乳腺癌細(xì)胞中的生物學(xué)功能及其機(jī)制的研究中文摘要目的研究三苯氧胺對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF7生長(zhǎng)及其放射敏感性的影響，探討三苯氧胺對(duì)BTGL基因的調(diào)控作用，發(fā)現(xiàn)乳腺癌新的治療靶點(diǎn)。方法選用人乳腺癌MCF7ER、MDAMB435ER細(xì)胞系作為研究對(duì)象。1采用CCK8法檢測(cè)三苯氧胺對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF7ER、MDAMB435ER的增殖的影響。2采用體外劃痕愈合實(shí)驗(yàn)觀察三苯氧胺對(duì)乳腺癌細(xì)胞遷移能力的影響，TRANSWELL小室侵襲試驗(yàn)觀察三苯氧胺對(duì)乳腺癌細(xì)胞侵襲能力的影響。3采用流式細(xì)胞術(shù)觀察三苯氧胺對(duì)乳腺癌細(xì)胞周期的影響，磷脂酰絲氨酸外翻法ANNEXINV和PI雙染法檢測(cè)三苯氧胺對(duì)乳腺癌細(xì)胞凋亡的影響。采用JC1檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞線粒體跨膜電位。4采用活性氧ROS檢測(cè)試劑盒、ATP含量檢測(cè)試劑盒等，檢測(cè)三苯氧胺對(duì)乳腺癌細(xì)胞中ROS和ATP能量代謝指標(biāo)變化的影響。5采用WESTERNBLOT法檢測(cè)三苯氧胺對(duì)乳腺癌細(xì)胞中周期凋亡相關(guān)蛋白及BTGL蛋白表達(dá)的影響。6細(xì)胞克隆形成法檢測(cè)三苯氧胺對(duì)乳腺癌細(xì)胞放射敏感性的影響。7采用細(xì)胞流式術(shù)檢測(cè)三苯氧胺聯(lián)合電離輻射對(duì)乳腺癌細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡的影響。采用WESTERNBLOT法檢測(cè)三苯氧胺聯(lián)合電離輻射對(duì)乳腺癌細(xì)胞周期相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。8采用單細(xì)胞凝膠電泳和YH2AX免疫熒光檢測(cè)三苯氧胺聯(lián)合電離輻射對(duì)乳腺癌細(xì)胞照射后DNA損傷修復(fù)能力的影響。9采用活性氧ROS檢測(cè)試劑盒檢測(cè)三苯氧胺聯(lián)合電離輻射對(duì)乳腺癌細(xì)胞中

簡(jiǎn)介：新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文成人急性髓性白血病細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)表達(dá)的初步研究姓名王蕾申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師哈力達(dá)亞森200909新疆醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位論文２MOLECULARCYTOGEICABNMALITIESINADULTPATIENTSWITHACUTEMYELOIDLEUKEMIAPOSTGRADUATEWANGLEISUPERVISHALIDAYASENPARAPROFESSABSTRACTOBJECTIVETHEINCIDENCEDEVELOPMENTOFTUMSWHICHMAYBECLOSELYRELATEDTOCYTOGEICABNMALITIESACUTEMYELOIDLEUKEMIAAMLISAMALIGNANTTUMOFHEMOPOIETICSYSTEMITHASBEENSTUDIEDTHATTHEMAJITYOFPATIENTSWITHLEUKEMIAHAVENONROMCHROMOSOMEABERRATIONSFUSIONGENEWHICHMAYPROVIDEIMPTANTINFMATIONFTYPINGPROGNOSTICEVALUATIONOPTIONSOFTREATMENTEVENTHERESEARCHESOFPATHOGENESISTHEPURPOSEOFTHISARTICLEISTOSTUDYTHEDISTRIBUTIONOFKARYOTYPETHERELATIONSHIPBETWEENCHROMOSOMEABNMALITIESPROGNOSTICINAMLACCDINGTOKNOWNDOMESTICINTERNATIONALHIERARCHICALCYTOGEICCLASSIFICATIONMETHODSCYTOGEICEXAMINATIONOFBONEMARROWCELLSWASPERFMEDBYSHTTURNCULTUREMETHODGBINGTECHNIQUEWASUSEDFKARYOTYPEANALYSISAML1ETOFUSIONGENEPMLRARAALPHAFUSIONGENEWEREANALYZEDRESPECTIVELYBYRQPCRIN95AMLPATIENTS64PATIENTSACCEPTEDTHETWOCOURSEOFTREATMENTTHEIRRESPONSESURVIVALRATEWEREANALYZEDRESULTSKARYOTYPICABNMALITIESWEREDETECTEDIN50OF95PATIENTS526THEEXPRESSIONRATEINFABSUBTYPESWEREM3923M2447M4214M150M51676CASESWERENUMERICALABNMALITIES24CASESWITHVARIANTOFT15；1715CASESWITHVARIANTOFT8；12WEREDETECTEDDMANTVARIANCETRANSLOCATIONSWEREFOUNDWHENAPPLYINGRQPCRTECHNIQUETODETECTAML1ETOFUSIONGENEPMLRARAFUSIONGENEWHICHWEREASSOCIATEDWITHFABSUBTYPESM2M3TOANALYZETHEREMISSIONRATEACCEPTEDTHETWOCOURSEOFTREATMENTABOUTTHE64PATIENTSEXCEPTM3ITCLASSIFYTHREEGROUPSACCDINGTOCYTOGEICSTHEHIGHRISKGROUPWAS50MEDIATERISKGROUPWAS745LOWRISKWAS889THEREMISSIONRATEWERESTATISTICALLYDIFFERENCE（P005）INTHREEGROUPSCONCLUSIONCHROMOSOMEANALYSISDETECTIONOFFUSIONGENESAREHELPFULINTHEDIAGNOSISOFAMLTHEDIFFERENTIATIONOFAMLSUBTYPETREATMENTGEICABNMALITYISAFACTINFLUENCESTHETREATMENTRESPONSEOFACUTELEUKEMIAKEYWDSACUTEMYELOIDLEUKEMIA；CHROMOSOME；FUSIONGENES；PROGNOSIS

簡(jiǎn)介：分類號(hào)學(xué)號(hào)D201078301學(xué)校代碼10487密級(jí)博士學(xué)位論文LRIG2基因全長(zhǎng)及胞外段對(duì)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤基因全長(zhǎng)及胞外段對(duì)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系生物學(xué)特性的影響及其機(jī)制細(xì)胞系生物學(xué)特性的影響及其機(jī)制學(xué)位申請(qǐng)人肖群根學(xué)科專業(yè)外科學(xué)（神經(jīng)外科）指導(dǎo)教師雷霆教授答辯日期2013年5月獨(dú)創(chuàng)性聲明獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對(duì)本文的研究做出貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名日期年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在_____年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□。請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”學(xué)位論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期年月日日期年月日

簡(jiǎn)介：目的①建立一種簡(jiǎn)單，快速，成活率和純度高的原代成骨細(xì)胞培養(yǎng)方法，以獲得大量成骨細(xì)胞，為骨組織工程研究奠定基礎(chǔ)。②探討聯(lián)合應(yīng)用骨形態(tài)發(fā)生蛋白2（BMP2）和骨形態(tài)發(fā)生蛋白7（BMP7）對(duì)成骨細(xì)胞生物學(xué)活性的影響。方法①無菌采取5日齡SD大鼠的顱蓋骨，采用改良的二次酶消化法分離成骨細(xì)胞，通過倒置相差顯微鏡觀察，并用堿性磷酸酶和礦化結(jié)節(jié)染色鑒定，利用微量滴定（MTT）法測(cè)定一個(gè)培養(yǎng)周期的成骨細(xì)胞活性分布。②培養(yǎng)的成骨細(xì)胞單獨(dú)應(yīng)用BMP2和BMP7以及聯(lián)合應(yīng)用BMP2和BMP7作用48H后，用MTT法檢測(cè)成骨細(xì)胞增殖，同時(shí)測(cè)定成骨細(xì)胞裂解液中堿性磷酸酶（ALP）活性和骨鈣素（OCN）含量。結(jié)果①倒置相差顯微鏡形態(tài)觀察結(jié)果顯示未貼壁的細(xì)胞呈圓形，貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞呈不規(guī)則梭形、三角形或多角形，單核，有1～3個(gè)核仁；堿性磷酸酶和鈣化結(jié)節(jié)染色均呈陽性（陽性率≥9806）；MTT法結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果顯示，成骨細(xì)胞培養(yǎng)至第10D時(shí)活性最強(qiáng)。②單獨(dú)應(yīng)用BMP2和BMP7，聯(lián)合應(yīng)用BMP2和BMP7作用48H后，均能刺激大鼠乳鼠成骨細(xì)胞的增殖，增加成骨細(xì)胞ALP活性和OCN含量。聯(lián)合應(yīng)用BMP2和BMP7作用后，與對(duì)照組，單獨(dú)應(yīng)用BMP2和BMP7組比較，能明顯增強(qiáng)成骨細(xì)胞生物學(xué)活性，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，有顯著差異性，P005。結(jié)論①用改良的二次酶消化法能夠在短時(shí)間內(nèi)獲得大量成骨細(xì)胞，且所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型成骨細(xì)胞形態(tài)和功能。②聯(lián)合應(yīng)用BMP2和BMP7能使成骨細(xì)胞生物學(xué)活性得到顯著增強(qiáng)，以便進(jìn)一步為臨床上治療骨缺損，骨折不愈合，促進(jìn)骨折愈合和椎體融合提供理想的移植細(xì)胞。

簡(jiǎn)介：近年來的研究表明雌、孕激素有僅生理作用重要而且與人體許多疾病的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切腫瘤、心血管系統(tǒng)及骨骼系統(tǒng)疾病等該實(shí)驗(yàn)針對(duì)這一方面研究了17Β雌二醇17ΒE、孕酮P對(duì)體外培養(yǎng)的增生瘢痕成纖維細(xì)胞HSFB生長(zhǎng)增殖、膠原合成、TGFΒ1合成影響以探討雌、孕激素對(duì)HSFB的直接作用效果評(píng)價(jià)它們對(duì)瘢痕形成的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)論通過該實(shí)驗(yàn)研究人員初步探討了17Β雌二醇、孕酮對(duì)體外接著的增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的生物學(xué)影響根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果研究人員認(rèn)為1在體外環(huán)境中雌聽話素可抑制生性瘢痕成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)增殖而促進(jìn)其膠原與TGFΒ1合成2在體外環(huán)境中孕激素可抑制增生性瘢痕成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)增殖促進(jìn)其膠原合成而對(duì)TGFΒ1合成無明顯作用3雌激素對(duì)瘢痕形成的影響比孕激素更重要4雌激素在對(duì)瘢痕形成的影響方面無性別差異

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多玻璃化凍存對(duì)小鼠骨髓有核細(xì)胞生物學(xué)特性的影響.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：山東大學(xué)碩士學(xué)位論文人胃癌細(xì)胞中STAT3和VEGF表達(dá)的生物學(xué)意義及相關(guān)性研究姓名寧磊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)病原生物學(xué)指導(dǎo)教師周亞濱20060615山東大學(xué)碩十學(xué)位畢業(yè)論文人胃癌細(xì)胞中STAT3和VEGF表達(dá)的生物學(xué)意義及相關(guān)性研究研究生寧磊導(dǎo)師周亞濱中文摘要目的通過檢測(cè)胃癌組織中STAT3和VEGF的表達(dá)，探討它們?cè)谖赴┑陌l(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移中所起的作用及可能的分子機(jī)制，為胃癌的早期診斷，預(yù)后判斷和腫瘤治療提供一定理論依據(jù)。方法應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)正常胃組織、原位癌及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌組織中STAR3和VEGF的表達(dá)情況，并分析它們與各臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。應(yīng)用PEMS3】統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。結(jié)果1、實(shí)驗(yàn)組65例原發(fā)胃癌組織中STAT3和VEGF的表達(dá)陽性率分別為6461％，7692％，均顯著高于正常對(duì)照組PO05。2、不同組織學(xué)類型胃癌中STAT3表達(dá)陽性率不同，其中未分化癌9000％粘液癌6896％低分化癌5484％腺癌4285％，但是其差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。3、不同組織學(xué)分級(jí)和不同臨床分期胃癌組織中SMT3表達(dá)陽性率不同，低未分化組7742％顯著高于高中分化組4565％；IIIⅣ期7857％明顯高于III期48985，且其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。STAT3的表達(dá)與是否伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)P005。4、不同組織學(xué)類型中VEGF的表達(dá)不同，其中未分化癌90OO％粘液癌82。76％低分化癌7742％腺癌7143％，但是無顯著性差異P005。

簡(jiǎn)介：目前，對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)CENTRALNERVOUSSYSTEM，CNS病的治療目的多為緩解癥狀和控制疾病的發(fā)展。近年來研究發(fā)現(xiàn)，在成年哺乳動(dòng)物腦組織中存在神經(jīng)干細(xì)NEURALSTEMCELLS，NSCS，這些NSCS可以分化成神經(jīng)組織，表明CNS也存在再生修復(fù)能力，為研究CNS損傷的修復(fù)提出了希望。干細(xì)胞STEMCELLS，SCS是指有多種分化潛能和自我更新能力的細(xì)胞，這種多潛能細(xì)胞存在于成年個(gè)體的許多組織和胚胎中。近年來，隨著SCS研究的深入，骨髓基質(zhì)細(xì)胞BONEMARROWDERIVEDSTROMACELLS，BMSCS被證明具有向NSCS分化的潛能，同時(shí)BMSCS還具有取材方便、來源廣泛、免疫原性低、遺傳性狀穩(wěn)定等優(yōu)勢(shì)，因此目前已成為SCS移植替代治療最理想的種子細(xì)胞來源之一，應(yīng)用NSCS特別是BMSCS源性NSCS分化調(diào)控和移植修復(fù)CNS功能亦成為研究重點(diǎn)。到目前為止，不論是CNS還是周圍神經(jīng)系統(tǒng)PNRIPHERALNERVOUSSYSTEM，PNS疾病，絕大多數(shù)經(jīng)NSCS移植治療后，判斷其臨床癥狀的改善是否由移植細(xì)胞所致，以及移植后神經(jīng)再生的鑒定主要采用免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)。該方法必須獲取組織而不可能進(jìn)行活體評(píng)價(jià)，臨床及科研工作中渴望能無創(chuàng)性的對(duì)NSCS移植后的存活、遷徙及功能性分化進(jìn)行活體研究。隨著超順磁性磁共振成像MAGICRESONANCEIMAGING，MRI對(duì)比劑的研制成功及MRI設(shè)備及方法的快速發(fā)展，為無創(chuàng)傷性地在活體內(nèi)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)移植后骨髓基質(zhì)細(xì)胞的存活、遷移、生存狀態(tài)等情況提供了可能。目前，MRI可以提供25～50ΜM的分辨率，接近單一細(xì)胞的水平，使其在理論上可以用來對(duì)移植的細(xì)胞進(jìn)行活體示蹤。氧化鐵類中的超順磁性氧化鐵SUPERPARAMAGICIRONOXIDE，SPIO和超小順磁性氧化鐵ULTRASMALLSUPERPARAMAGICIRONOXIDE，USPIO是較為理想的MRI示蹤劑，已經(jīng)成功在體外用于多種細(xì)胞的標(biāo)記。菲立磁FERIDEX，F(xiàn)E是經(jīng)過美國(guó)食品及藥物管理局FOODDRUGADMINISTRATION，F(xiàn)DA認(rèn)可的臨床上應(yīng)用的SPIO類MRI造影劑之一，借助轉(zhuǎn)染試劑多聚賴氨酸POLY1LYSINE，PLL，F(xiàn)E已成功標(biāo)記多種哺乳動(dòng)物SCS。目前國(guó)內(nèi)專家學(xué)者已經(jīng)開始了關(guān)于FE的試驗(yàn)研究，系統(tǒng)研究了大鼠、家兔及恒河猴的FE標(biāo)記BMSCS的培養(yǎng)及其向NSCS的轉(zhuǎn)化，向外傷動(dòng)物模型的移植，利用MRI影像學(xué)定位檢查標(biāo)記NSCS在腦內(nèi)的成活和遷移情況，并運(yùn)用免疫織組化學(xué)、透射電子顯微鏡等技術(shù)觀察NSCS生長(zhǎng)、分化和突觸的形成及與腦組織整合情況，得到了肯定的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。但目前針對(duì)FE標(biāo)記前后BMSCS生物學(xué)活性的檢測(cè)，所做的研究還不夠完善，尚未見相關(guān)研究的系列報(bào)道。本課題擬在細(xì)胞水平，用不同濃度的FE特異性標(biāo)記BMSCS，并于體外對(duì)標(biāo)記前后的BMSCS活性、增殖、分化能力、凋亡等情況進(jìn)行研究，探索不同濃度FE對(duì)標(biāo)記BMSCS的影響及標(biāo)記BMSCS的最佳濃度，為今后的進(jìn)一步研究工作提供技術(shù)參考。第一章新西蘭兔BMSCS體外分離培養(yǎng)和誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)研究目的觀察BMSCS體外培養(yǎng)、擴(kuò)增和誘導(dǎo)分化為NSCS的情況，熟悉并掌握細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，為下一步實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。方法1以新西蘭大白兔為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，無菌條件下行髂骨穿刺取骨髓，梯度密度離心法分離獲取新西蘭兔BMSCS。2骨髓源性NSCS誘導(dǎo)培養(yǎng)及純化原代培養(yǎng)第3天后，應(yīng)用NSCS培養(yǎng)基，加入胎牛血清FBS1％終濃度、白血病抑制因子LIF10NGML、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子BFGF10NGML進(jìn)行體外培養(yǎng)、誘導(dǎo)、增殖。培養(yǎng)1～2周后得到較純化的BMSCS，可進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)，在培養(yǎng)過程中加入FBS以及維甲酸RA05ΜGML以誘導(dǎo)BMSCS向NSCS分化。3CK2型倒置相差光學(xué)顯微鏡追蹤觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況并拍照。4免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定采用SABC法，利用抗神經(jīng)巢蛋白NESTIN、神經(jīng)元特異性烯醇化酶NSE、膠質(zhì)原纖維酸性蛋白GFAP等免疫細(xì)胞化學(xué)方法對(duì)BMSCS分化成的NSCS、神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分別進(jìn)行特異性鑒定。結(jié)果1倒置相差顯微鏡觀察接種后的10小時(shí)內(nèi)，BMSCS開始貼壁，貼壁細(xì)胞培養(yǎng)48小時(shí)后有分裂增殖，然后逐漸形成島嶼狀細(xì)胞克隆團(tuán)，給予適當(dāng)?shù)姆只瘲l件，10～20天后，這些細(xì)胞能分化成具有細(xì)長(zhǎng)突起、多種形態(tài)的細(xì)胞。2經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定，早期的培養(yǎng)細(xì)胞在沒有給予誘導(dǎo)分化時(shí)可陽性表達(dá)NESTIN，表明具有SCS特性，證實(shí)已經(jīng)形成BMSCS源性NSCSBMSCSDNSCS；培養(yǎng)細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化后能分化出神經(jīng)元樣細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞，免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)可見有NSE、GFAP的表達(dá)。結(jié)論1新西蘭大白兔的BMSCS能在體外培養(yǎng)和擴(kuò)增，具有增殖能力，能表達(dá)NESTIN抗原，具有NSCS特征。2本實(shí)驗(yàn)所采用的培養(yǎng)方案NSCS培養(yǎng)基適合于兔BMSCS向NSCS轉(zhuǎn)分化，源自BMSCS的NSCS具有分化潛能，在合適的誘導(dǎo)分化條件下分化出的細(xì)胞能表達(dá)神經(jīng)系細(xì)胞神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的特征性抗原。3BMSCS來源豐富，體外分離、擴(kuò)增容易，可作為自體移植的種子細(xì)胞。第二章FE標(biāo)記新西蘭兔BMSCS的細(xì)胞生物學(xué)研究目的初步探索利用不同濃度FE和轉(zhuǎn)染試劑特異性標(biāo)記新西蘭兔BMSCS，于體外對(duì)標(biāo)記前后的BMSCS活性、增殖、分化能力、凋亡等情況進(jìn)行研究，探索FE標(biāo)記細(xì)胞的最佳濃度，為今后的進(jìn)一步研究工作提供技術(shù)參考。方法1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和骨髓采集、BMSCS的分離擴(kuò)增同第一部分。2FE標(biāo)記細(xì)胞的濃度及分組首先將FE分別稀釋成LOΜGML、25ΜGML、50ΜGML和75ΜGML四個(gè)不同濃度，并分別和PLL15ΜGML等體積混合，室溫下振蕩搖勻，30分鐘后將FEPLL復(fù)合物FEPLL加入細(xì)胞培養(yǎng)基中，F(xiàn)EFE和PLL的終濃度分別為5ΜGML、125ΜGML、25ΜGML、375ΜGML和075ΜGML。試驗(yàn)最后分組A純BMSCDNSC組；B075PLL組；C5FE075PLL組；D125FE075PLL組；E25FE075PLL組；F375FE075PLL組N10。3倒置顯微鏡和透射電鏡觀察觀察各組標(biāo)記細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化。4細(xì)胞內(nèi)鐵的鑒定采用普魯士蘭染色和透射電鏡對(duì)細(xì)胞內(nèi)鐵和標(biāo)記效率進(jìn)行檢測(cè)。5FEPLL標(biāo)記BMSCS的滲漏性檢測(cè)FE標(biāo)記標(biāo)記NSCS與神經(jīng)元共培養(yǎng)以檢測(cè)標(biāo)記細(xì)胞是否會(huì)發(fā)生FE的滲漏。6生長(zhǎng)曲線的測(cè)定采用CCK8法鑒定各組細(xì)胞的活力。7流式細(xì)胞儀FLOWCYTOMETRY，F(xiàn)CM檢測(cè)凋亡對(duì)細(xì)胞凋亡情況進(jìn)行分析。8BMSCS標(biāo)記后細(xì)胞MRIMRI掃描對(duì)象分為5組，47TMRI掃描序列包括軸面T快速自旋回波FASTSPINECHO，F(xiàn)SE序列，T梯度回波GRADIENTECHO，GRE序列掃描。9統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)用SPSS130統(tǒng)計(jì)軟件，細(xì)胞吸光度及凋亡率數(shù)據(jù)均采用重復(fù)測(cè)量的方差分析進(jìn)行處理，組間兩兩比較采用SNK法，檢驗(yàn)水準(zhǔn)Α005。結(jié)論1不同濃度FEPLL復(fù)合物可以用來體外標(biāo)記新西蘭兔BMSCS。2隨FE濃度的增高，其標(biāo)記效率亦增高，且標(biāo)記后TWI或TWI信號(hào)改變愈明顯。濃度在25ΜGML以下時(shí)，應(yīng)用FEPLL復(fù)合物標(biāo)記新西蘭兔BMSCS安全、有效。325ΜGML是FE標(biāo)記細(xì)胞適宜的濃度。