簡介：第一部分炎癥性腸病患者體內(nèi)髓源性抑制細胞的表達及其臨床意義目的分析炎癥性腸?。↖BD）患者外周血中髓源性抑制細胞（MDSC）的表達變化，并初步探討MDSC與UC和CD患者活動性的關系。方法收集69例蘇州地區(qū)IBD患者（克羅恩病33例，活動期16例，緩解期17例；潰瘍性結(jié)腸炎36例，其中活動期21例，緩解期15例）和36例健康者外周血標本，流式細胞儀檢測兩類IBD患者及不同病程階段中CD14HLADRLOWMDSC細胞表達率。結(jié)果1正常對照組中外周血單核樣MDSC占單核細胞比例為（107±74，％），CD組為（437±230，）；UC組為（491±272，），CD組和UC組均明顯高于正常對照組（P005）。2CD緩解期患者外周血單核樣MDSC細胞占單核細胞比例為（281±162，），活動期患者為（603±168，），CD活動期患者明顯高于緩解期患者（P3UC緩解期患者外周血單核樣MDSC占單核細胞比例為（208±79，）；活動期患者為（659±161，），活動期明顯高于緩解期（P005）。結(jié)論IBD患者外周血單核樣MDSC明顯升高，且與IBD活動度密切相關，生物學作用需要進一步探討。第二部分潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型體內(nèi)MDSC的表達及其意義目的利用潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型，分析髓源性抑制細胞MDSC表達與IBD的關系。方法按照經(jīng)典COOPER方法采用葡聚糖硫酸鈉DEXTRANSULFATESODIUMDSS誘導出BALBC小鼠慢性潰瘍性結(jié)腸炎的模型DSSUC模型，大體觀察各組小鼠疾病活動指數(shù)DISEASEACTIVITYINDEXDAI，常規(guī)病理切片評估結(jié)腸組織病理學評分HISTOPATHOLOGICALSCEHPS。在成功造出小鼠慢性潰瘍性結(jié)腸炎的模型DSSUC模型后，通過流式細胞術分析比較模型小鼠和正常小鼠骨髓、脾臟和外周血CD11BGR1雙陽性MDSC表達情況，初步探討MDSC在UC小鼠模型中的表達特征。免疫組化IH測定小鼠遠端結(jié)腸組織IL12、IL4、IL1Β、TNFΑ、IL6的表達，初步探討UC病理進程與這些炎癥細胞因子之間的關聯(lián)。結(jié)果正常組小鼠DAID7評分為023±051、HPS評分為017±041，模型組小鼠DAID7評分為633±103、HPS評分為782±123，模型組DAI和HPS評分較正常組明顯增高P結(jié)論UC模型小鼠體內(nèi)MDSC和病變部位炎性因子均較對照組升高，提示病變活動期進程中MDSC可能通過調(diào)控炎性因子參與免疫病變過程。第三部分黃芪多糖調(diào)節(jié)MDSC在潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型中治療效應的實驗研究目的初步研究黃芪多糖在潰瘍性結(jié)腸炎治療中的作用，探討是否通過影響MDSC發(fā)揮作用。方法通過建立DSS誘導的潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型，研究黃芪多糖對MDSC的影響，探討黃芪多糖（APS）在治療UC中的效果。分析干預前后，對UC小鼠體內(nèi)MDSC數(shù)量的影響。并從病理組織學討論黃芪多糖對UC小鼠腸黏膜修復的影響，評價黃芪多糖對潰瘍性結(jié)腸炎的治療效應。結(jié)果APS對UC模型小鼠干預后，小鼠骨髓中、脾臟中、外周血中MDSC細胞的表達均明顯下降，表明APS對MDSC細胞有明顯地抑制作用。推測黃芪多糖對IBD的治療是部分依賴MDSC來實現(xiàn)的。結(jié)論黃芪多糖在IBD的治療中具有潛在應用價值，且可能是以依賴或部分依賴MDSC來實現(xiàn)的。

簡介：分類號密級國際十進分類號（UDC）第四軍醫(yī)大學學位論文MICRNA194模擬物對成骨肉瘤細胞系SOSP9607生物學特性的影響（題名和副題名）靳雷（作者姓名）指導教師姓名馬保安教授（主任醫(yī)師）指導教師單位第四軍醫(yī)大學唐都醫(yī)院骨科申請學位級別碩士專業(yè)名稱外科學（骨外）論文提交日期201104答辯日期201105論文起止時間2009年8月至2011年4月學位授予單位第四軍醫(yī)大學MICRNA194模擬物對成骨肉瘤細胞系模擬物對成骨肉瘤細胞系SOSP9607生物學特性的影響生物學特性的影響研究生靳雷學科專業(yè)外科學（骨外）所在單位第四軍醫(yī)大學唐都醫(yī)院骨科導師馬保安教授（主任醫(yī)師）輔導教師楊彤濤副教授（副主任醫(yī)師）資助基金項目國家自然科學基金資助項目編號30672143關鍵詞MIRNA，MICRNA，MIR194，骨肉瘤，增殖，凋亡，轉(zhuǎn)移中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學二O一一年四月

簡介：研究背景骨關節(jié)炎是一種常見的慢性關節(jié)疾病好發(fā)于負重較大的膝關節(jié)等部位是由于多種機械性和生物性因素相互作用所致其具體的病因和發(fā)病機制目前尚不明確。膝關節(jié)是人體最復雜也是最大的關節(jié)對人體下肢運動和載荷支撐起著非常重要的作用關節(jié)軟骨作為關節(jié)的重要組成部分與人的其它體細胞相比處于關節(jié)內(nèi)特殊的壓力環(huán)境之中具有獨特的結(jié)構與力學特性致使其代謝和功能也必然受到壓力的影響和調(diào)控。許多骨關節(jié)炎相關的動物模型也證實了骨關節(jié)炎的疾病進展過程與壓力密切相關尤其是靜水壓力對軟骨新陳代謝的影響。Ⅱ型膠原、IL1Β、TNFΑ、MMP13作為與骨關節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展具有高度相關性的細胞因子和蛋白若能證明其在壓應力與骨關節(jié)炎疾病間具有紐帶作用則對研究關節(jié)壓應力與骨關節(jié)炎發(fā)病和進展的相關性具有重要意義。研究目的本研究擬建立一個理想的人軟骨細胞壓力實驗模型以更好的模擬人承重關節(jié)內(nèi)部的壓力環(huán)境為進一步研究壓力對關節(jié)軟骨細胞影響的奠定實驗基礎。通過高強度靜水壓力實驗試從細胞學層面探討高強度壓力與人關節(jié)軟骨退變、骨關節(jié)炎之間的關系。研究方法1通過臨床上獲得的正常膝關節(jié)軟骨組織和骨關節(jié)炎軟骨組織經(jīng)兩步酶消化法獲取原代正常軟骨細胞和骨關節(jié)炎軟骨細胞傳代并觀察甲苯胺藍染色和Ⅱ型膠原免疫組化染色鑒定軟骨細胞基于自行設計的多功能恒溫體外細胞培養(yǎng)中高壓靜水壓力加載裝置建立人軟骨細胞壓力實驗模型。2通過多功能恒溫體外細胞培養(yǎng)中高壓靜水壓力加載裝置對實驗組軟骨細胞分別施加30MPA、70MPA、100MPA的靜水壓力每天加壓培養(yǎng)2H共5D通過CCK8、MTT、流式細胞儀檢測軟骨細胞經(jīng)不同壓力處理后的增殖和凋亡情況根據(jù)壓力實驗數(shù)據(jù)對建立的人軟骨細胞壓力實驗模型進行評估。3通過多功能恒溫體外細胞培養(yǎng)中高壓靜水壓力加載裝置分別對正常軟骨細胞組和骨關節(jié)炎軟骨細胞組施加100MPA靜水壓力每天加壓培養(yǎng)2H共5D通過QRTPCR和WESTERNBLOT檢測壓力處理后各組軟骨細胞中Ⅱ型膠原、IL1Β、TNFΑ和MMP13的分泌和表達情況。研究結(jié)果1通過原代培養(yǎng)從臨床上獲得的活力較高的膝關節(jié)正常軟骨細胞和病變明顯的膝關節(jié)骨關節(jié)炎軟骨細胞其更符合人類的生物學特點。多功能恒溫體外細胞培養(yǎng)中高壓靜水壓力加載裝置能有效模擬生理情況下人膝關節(jié)內(nèi)的靜水壓力負荷。2CCK8、MTT、流式細胞儀檢測顯示與對照組相比30MPA壓力能促進軟骨細胞增殖抑制凋亡70MPA壓力可致軟骨細胞增殖能力的下降和細胞凋亡率升高100MPA壓力導致軟骨細胞增殖能力的大幅下降和明顯的細胞凋亡趨勢。人軟骨細胞壓力實驗模型經(jīng)實驗評估證實其性能穩(wěn)定、安全可靠、可重復性強可以有效的模擬人關節(jié)內(nèi)的壓力環(huán)境。3QRTPCR和WESTERNBLOT檢測結(jié)果顯示正常軟骨細胞或骨關節(jié)炎軟骨細胞經(jīng)高強度靜水壓力作用后都表現(xiàn)出對Ⅱ型膠原表達的抑制和對IL1Β、TNFΑ和MMP13表達的促進作用經(jīng)高強度靜水壓力作用后骨關節(jié)炎軟骨細胞與正常軟骨細胞相比Ⅱ型膠原的表達下降MMP13和IL1Β的表達升高而TNFΑ的表達差異不明顯。結(jié)論1本研究從臨床上獲取人膝關節(jié)軟骨組織通過原代培養(yǎng)獲得活力較高的膝關節(jié)正常軟骨細胞和病變明顯的膝關節(jié)骨關節(jié)炎軟骨細胞其更符合人類關節(jié)內(nèi)的生物學特點研究結(jié)果可信度更高。建立的人軟骨細胞壓力實驗模型更貼近人類可以更好的模擬人承重關節(jié)內(nèi)部的壓力環(huán)境較動物模型更具優(yōu)勢。2利用本壓力實驗模型初步確定了人軟骨細胞壓力實驗中的壓力梯度選擇證實了不同強度的靜水壓力對人膝關節(jié)軟骨細胞的增殖和凋亡會產(chǎn)生不同的影響。經(jīng)過實驗評估證明此壓力模型可以安全穩(wěn)定的向培養(yǎng)的細胞施加靜水壓力用于各類靜水壓力影響相關的實驗。3超過生理水平的高強度靜水壓力不僅可直接影響軟骨細胞新陳代謝造成細胞損傷引起細胞凋亡還能通過抑制Ⅱ型膠原合成促進IL1Β、TNFΑ和MMP13的分泌表達從而間接的導致軟骨支撐作用和保護機制的減弱加快關節(jié)軟骨的退變使正常的軟骨細胞向骨關節(jié)炎樣細胞轉(zhuǎn)化或加重骨關節(jié)炎的病理改變。

簡介：分類號_____學號學號_M201175649____學校代碼學校代碼_10487_密級密級_________碩士學位論文碩士學位論文SHPI對鼻咽癌細胞生物學特性的影響及其機制探討對鼻咽癌細胞生物學特性的影響及其機制探討學位申請人牟晶晶學位申請人牟晶晶學科專業(yè)腫瘤學學科專業(yè)腫瘤學指導老師王指導老師王濤教授教授答辯日期答辯日期2014年5月

簡介：近幾年來，主要組織相容性復合體I類相關鏈AMAJHISTOCOMPATIBILITYCOMPLEXCLASSIRELATEDCHAINA，MICA抗體與實體器官移植特別是腎移植的排斥反應和移植腎長期存活率之間的關系成了移植免疫學基礎和臨床研究的熱點。在等待腎移植的患者體內(nèi)檢測到了預存的MICA抗體，說明在移植前患者就接觸到了MICA抗原而產(chǎn)生了特異性的抗體；移植后MICA抗體與免疫排斥反應和慢性移植腎失功之間均存在著密切的關系。由于MICA蛋白可以表達在血管內(nèi)皮細胞表面，但不表達在T淋巴細胞，因而MICA分子可能直接引起移植腎血管的損傷，進而導致移植腎功能損害。有學者研究了MICA抗原對淋巴細胞生物學特性的影響，發(fā)現(xiàn)MICA抗原對T細胞和B細胞有促進其增殖的作用。最近對心臟移植的研究中發(fā)現(xiàn)，血清中的可溶性MICASMICA分子可以減輕移植物的免疫損傷，對移植物起到保護作用。MICA分子和NKG2D是互為配受體的關系，且NKG2D是NK細胞表面的一種激活性受體。但是MICA抗原對內(nèi)皮細胞的生物學特性的影響，SMICA在腎移植中的是否有保護作用，以及NK細胞能否被激活而對內(nèi)皮細胞產(chǎn)生殺傷作用，均未見報道。因此，本課題將分三個部分進行研究1應用MICA重組蛋白對血管內(nèi)皮細胞進行刺激，觀察它對內(nèi)皮細胞的生物學特性及其分泌功能的影響2外源性抗原對內(nèi)皮細胞MICA基因表達的調(diào)節(jié)作用，以及對細胞上清中SMICA的水平的影響；3表達MICA分子的內(nèi)皮細胞與NK細胞共同培養(yǎng)，觀察NK細胞對內(nèi)皮細胞的殺傷作用，并探討其可能的作用機制。第一部分MICA抗原對內(nèi)皮細胞生物學功能的影響目的觀察主要組織相容性復合體I類相關鏈AMICA抗原對血管內(nèi)皮細胞生物學功能的影響。方法將外源性重組MICA蛋白分A55NGML，A1010NGML，A2525NGML三個劑量加入培養(yǎng)基中作為實驗組，A0組加入等體積的磷酸鹽緩沖液PBS作為對照組，對人臍靜脈內(nèi)皮細胞HUVEC予以培養(yǎng)。用流式細胞儀檢測其細胞周期和凋亡情況，采用噻唑藍MTT比色法檢測細胞增殖情況，并測定各組細胞上清液中前列環(huán)素代謝產(chǎn)物6酮前列腺素F1Α6KETOPGFLΑ、內(nèi)皮素ET1、組織型纖溶酶原激活物TPA及其抑制物PAI的水平。結(jié)果各實驗組A5，A10，A25內(nèi)皮細胞A570值均高于對照組A0。以A5組增殖最為明顯，A10組比A5組稍下降，兩組之間差異統(tǒng)計學意義（P005），但明顯高于A25組差異有統(tǒng)計學意義P005）。各實驗組A5，A10，A25TPA、PAI分別為1612，1542，1578NGML2216，2485，2524NGML而對照組（A0分別為2335NGML、1378NGML。實驗組和對照組之間比較，差異均有統(tǒng)計學意義P005）。各實驗組細胞無明顯凋亡，細胞周期也無明顯改變。結(jié)論MICA抗原對內(nèi)皮細胞的生長周期無明顯影響，也不引起其凋亡，但能刺激內(nèi)皮細胞增殖，以小劑量誘導增殖明顯，并呈持續(xù)緩慢增殖。同時能夠引起內(nèi)皮細胞功能受損，凝血功能增強，而纖溶功能下降，有助于血栓形成。第二部分外源性抗原對內(nèi)皮細胞MICA基因表達的影響目的探討外源性抗原對內(nèi)皮細胞MICA基因表達的影響。方法將MICA重組蛋白分A55NGML，A1010NGML，A2525NGML和熱休克蛋白HSP70分B55NGML，B1010NGML，B2S25NGML各三個劑量的實驗組，對內(nèi)皮細胞HUVEC予以誘導培養(yǎng)，對照組A0、B0組分別加等量的磷酸鹽緩沖液PBS。采用實時熒光定量PCR方法檢測內(nèi)皮細胞MICAMRNA表達、WESTERNBLOT法檢測MICA蛋白和流式細胞儀檢測MICA蛋白在細胞膜表面的表達，用ELISA法測定細胞上清液中可溶性MICASMICA的水平。結(jié)果用三個劑量MICA重組蛋白誘導48H后，各實驗組A5，A10，A25內(nèi)皮細胞MICAMRNA和MICA蛋白的表達量與對照組比較均有顯著增加，差異均有統(tǒng)計學意義（P005）。MICA膜蛋白表達以A10組326％最高，并與A5組282％、A25組234％之間有顯著性差異P005）。而HSP蛋白組內(nèi)皮細胞MICA基因的表達和SMICA水平無明顯改變。結(jié)論外源性MICA抗原能夠誘導內(nèi)皮細胞自身MICAMRNA、總蛋白和膜蛋白表達上調(diào)，尤其是細胞膜蛋白增加明顯，但SMICA水平顯著下降，而HSP蛋白組無顯著變化。第三部分MICA分子介導NK細胞對內(nèi)皮細胞的殺傷作用目的觀察MICA分子在NK細胞殺傷內(nèi)皮細胞過程中的作用，探討其可能的機制。方法使用免疫磁珠方法及CD56陽性分選試劑盒分選NK細胞，并將NK細胞與表達MICA膜蛋白的活化內(nèi)皮細胞，共同培養(yǎng)10H。NK細胞與A0組HUVEC（同第二部分）共培養(yǎng)為A組，與A10組為B組。用熒光素進行染色，在熒光顯微鏡下觀察死亡和存活細胞數(shù)量，計算NK細胞對內(nèi)皮細胞殺傷效率，用ELISA法測定細胞上清中的干擾素ΓIFNΓ）和穿孔素水平。結(jié)果免疫磁珠法可以分選NK細胞，純度為885％。NK細胞對B組內(nèi)皮細胞的殺傷效率為355％，明顯高于A組L26％；B組IFNΓ和穿孔素水平顯著高于A組，兩組差異均有統(tǒng)計學意義P結(jié)論經(jīng)過外源性MICA重組蛋白刺激的內(nèi)皮細胞表面MICA分子表達增高，能夠提高NK細胞對內(nèi)皮細胞的殺傷效率；IFNΓ和穿孔素可能是發(fā)揮細胞毒作用的活性物質(zhì)。

簡介：復旦大學博士學位論文人胃癌側(cè)群細胞分選與生物學特性鑒定姓名汪學非申請學位級別博士專業(yè)外科學指導教師秦新裕201004摘要與NONSP細胞體外增殖活力；應用細胞侵襲TR趾SWEU試驗比較胃癌SP與NONSP細胞侵襲力差異；應用異種移植NOD／SCID小鼠成瘤實驗比較胃癌SP與NONSP細胞體內(nèi)致瘤能力差異；通過胃癌SP細胞體外培養(yǎng)比例回歸和體內(nèi)成瘤細胞分化現(xiàn)象觀察鑒定其不對稱分裂和多向分化特性?！窘Y(jié)果】細胞生長曲線實驗顯示，僅胃癌MKN28細胞株SP細胞增殖活力明顯強于NONSP細胞，而BGC823和SGC790L細胞株來源的SP與NONSP細胞總體生長曲線差別未能無統(tǒng)計學意義尸O05。平板克隆實驗結(jié)果顯示，胃癌細胞株MKN28、BGC823和SGC790L中SP細胞克隆形成率均高于NONSP細胞，其中MKN28SP細胞克隆形成能力明顯高于NONSP細胞尸O05。胃癌SP細胞體外培養(yǎng)后，其中SP比例由起始的100％下降至10％，NONSP細胞中SP比例由起始的0％增加到O3％；胃癌SP與NONSP細胞在體內(nèi)成瘤后，均可轉(zhuǎn)化成不同分化程度的胃癌細胞?！窘Y(jié)論】胃癌SP細胞體外增殖活力、體內(nèi)成瘤和分化能力NONSP細胞相仿，SP細胞富集胃癌干細胞的依據(jù)不足。胃癌SP細胞侵襲能力較弱，胃癌細胞侵襲力可能主要與NONSP細胞有關。第三部分人胃癌側(cè)群細胞化療藥物耐受性的相關分析【目的】研究胃癌SP與NONSP細胞對化療藥物的耐受性差異，并對其表達腫瘤耐藥相關基因情況進行分析?！痉椒ā客ㄟ^CCK8法檢測比較胃癌SP與NONSP細胞對于化療藥物5FU和DDP的耐受性差異；應用腫瘤化療耐藥相關的功能基因芯片，對胃癌SP與NONSP細胞中表達腫瘤耐藥相關基因情況進行比較分析【結(jié)果】化療藥物5FU對胃癌細胞株SGC790L來源的SP的半效抑制濃度IC50為03346MG／ML，明顯高于NONSP細胞的O0142M咖L尸005；化療藥物DDP對胃癌SP的半效抑制濃度IC50為O0055MG／ML，亦明顯高于NONSP細胞的O0032M咖LPO05。結(jié)果顯示胃癌SP細胞對化療藥物5FU和DDP的耐受性明顯強于NONSP細胞。功能基因芯片結(jié)果顯示，在84個常見的腫瘤化療耐藥相關基因中，1個基因在胃癌SP細胞中表達低于NONSP細胞；15個基因在胃癌SP細胞中表達高于NONSP細胞，其中ABCBL、ABCG2、BAX、MYC、6

簡介：再生障礙性貧血APLASTICANEMIAAA是一種免疫介導的骨髓衰竭綜合征，是血液科常見病、多發(fā)病及難治性疾病，其顯著特點是骨髓造血衰竭。以往研究更多集中于造血干祖細胞損傷機制方面，但因其數(shù)量顯著減少、功能缺陷、體外不易擴增卻容易分化等缺點限制此方面研究，目前處于相對停滯狀態(tài)。尋找一種全新的研究方向勢在必行。而再生障礙性貧血患者骨髓脂肪化、血管新生能力降低、骨皮質(zhì)變薄等現(xiàn)象提示骨髓造血微環(huán)境同樣存在缺陷。因此，研究骨髓造血微環(huán)境中各種細胞成分的前體細胞骨髓間充質(zhì)干細胞BONEMARROWMESENCHYRNALSTEMCELLSBMMSCS的生物學特性及其功能具有重要意義。第一部分目的本研究旨在系統(tǒng)、全面地比較研究再生障礙性貧血患者BMMSCS和正常人BMMSCS生物學特性及功能的差異，為探討再生障礙性貧血BMMSCS損傷機制提供實驗基礎及理論依據(jù)，亦為再生障礙性貧血的發(fā)病機制研究探討新思路。方法1采用貼壁、傳代培養(yǎng)的方法從AA患者和正常人骨髓組織中獲取相對純化的骨髓間充質(zhì)干細胞2倒置顯微鏡及共聚焦熒光顯微鏡觀察骨架蛋白PTUBULIN染色后BMMSCS的形態(tài)變化3流式細胞儀檢測培養(yǎng)的BMMSCS表面標志4定向誘導BMMSCS向脂肪細胞、內(nèi)皮細胞和成骨細胞分化，進行相應染色及分化標志鑒定，比較成脂、成骨、成內(nèi)皮的分化潛能5測定BMMSCS成纖維細胞樣的集落形成能力CFUF及增殖曲線6流式細胞儀方法檢測BMMSCS細胞周期及細胞凋亡7采用A你11ETRIX基因表達譜檢測方法比較分析AA患者與正常BMMSCS基因表達譜間的差異8磁珠分選臍血來源的CD34細胞，建立BMMSCS與CD34細胞共培養(yǎng)的二種培養(yǎng)體系LTCASSAY和MKASSAY，比較研究AA患者和正常BMMSCS擴增CD34細胞能力和促進造血克隆CFUGCFUMCFUGMCFUMIXBFUE和CFUMK形成的能力同時比較了二種BMMSCS表達造血生長因子SCFIL3EPOTPOIL11GCSFMCSF和GMCSF的異同。9磁珠分選健康人外周血CD4細胞，同時采用貼壁法去除CD4細胞中的貼壁細胞以獲得相對高比例的CD4淋巴細胞大多數(shù)為CD8細胞，建立BMMSCS與CD4CD4細胞共培養(yǎng)體系，比較研究BMMSCS對CD4CD4細胞的克隆形成能力、增殖、分泌TNFΑ和IFNΓ的影響，以及BMMSCS促進CD4細胞向TREG細胞分化能力。結(jié)果1成功培養(yǎng)并獲取高純度的再生障礙性貧血患者骨髓間充質(zhì)干細胞2AA患者BMMSC與正常BMMSCS存在形態(tài)學差異，正常BMMSCS細胞體積小、纖細、呈長梭形，規(guī)則排列生長AA患者BMMSCS細胞體積較大，呈短梭形、多角形、不規(guī)則形，邊緣不整齊，部分細胞見雙核、多核。3AA患者BMMSCS除了更高表達CD90外，其余表達標志CD73CD105CD90CD44CD29CD49ECD166以及MHCI類分子HLAABC無顯著差別。二者均不表達造血細胞標志CD34CD45及MHCII類分子HLADRO4AA患者BMMSCS更易向脂肪細胞分化，但分化為內(nèi)皮細胞和成骨細胞能力弱于正常BMMSCSO5AA患者BMMSCS形成CFUF的能力和增殖能力明顯弱于正常BMMSCSA6AA患者和正常人BMMSCS90％以上均處于GOGL期，但AA患者BMMSCS細胞凋亡水平明顯增加。7A如RIX基因表達譜檢測結(jié)果顯示，AA患者和正常人BMMSCS間存在差異表達的基因多達314個FOLDCHANGE_2倍，涉及造血調(diào)控、免疫調(diào)節(jié)、細胞周期、細胞凋亡、細胞粘附、成脂分化等多方面基因。8與臍血來源的CD34細胞共培養(yǎng)結(jié)果顯示，AA患者BMMSCS擴增CD34細胞能力和促進造血克隆形成能力尤其支持長期造血能力和巨核細胞系造血能力減弱。另外，二種BMMSCS均不表達IL3和EPOAA患者BMMSCS表達SCFTPOIL11MRNA水平低于正常者，而表達GCSF和GMCSFMRNA水平高于正常者，MCSF差異不顯著。9與外周血來源的CD4CD4細胞共培養(yǎng)結(jié)果顯示，AA患者BMMSCS抑制CD4CD4細胞克隆形成、增殖和分泌TNFΑIFNΓ的能力存在缺陷、促進CD4細胞向TREG細胞分化能力減弱。結(jié)論I再生障礙性貧血患者骨髓間充質(zhì)干細胞存在多方面、多層次的缺陷。2再生障礙性貧血患者BMMSCS的多種生物學特性異常，包括形態(tài)異常、增殖和CFUF形成能力減弱、多向分化能力異常易成脂，不易向成骨細胞和內(nèi)皮細胞方向分化、細胞凋亡增加、基因表達譜異常。3再生障礙性貧血患者BMMSCS通過分化為成骨細胞和內(nèi)皮細胞構成HSC完的能力減弱。4再生障礙性貧血患者BMMSCS支持造血能力尤其支持長期造血能力和巨核細胞系造血能力減弱。5再生障礙性貧血患者BMMSCS抑制CD4CD4細胞增殖和分泌TNFΑIFNΓ能力缺陷、促進CD4細胞向TREG細胞分化能力減弱。背景再生障礙性貧血是一種免疫介導的骨髓衰竭性疾病，其發(fā)病機制涉及大量異常的免疫細胞和免疫分子。其中，IFNΓTNFΑ和多種白細胞介素ILS發(fā)揮著主要作用。IL27是近年發(fā)現(xiàn)的一種IL6IL12細胞因子家族成員，在機體內(nèi)發(fā)揮著促進和抑制炎癥的雙重作用。IL27可以誘導THL細胞極化，促進淋巴細胞產(chǎn)生IFNΓ。然而，目前尚無IL27在再生障礙性貧血發(fā)病機制中的相關報道。第二部分目的本研究旨在檢測再生障礙性貧血患者骨髓中IL27及其受體的表達水平，探討其在再生障礙性貧血發(fā)病機制中的作用。方法1采用FICOLL密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞BMMNC2REALTIMEICR方法檢測BMMNC中IL27P28和EBI3及其受體WSX1TCCR和GP130MRNA表達水平3流式細胞術檢測IL27刺激前后骨髓CD4和CD8T淋巴細胞內(nèi)IFNΓTNFΑ的表達水平4ELISA方法檢測骨髓上清中IL27IFNΓ和TNFΑ的水平以及IL27刺激前后BMMNC培養(yǎng)上清中IFNΓ和TNFΑ的水平變化。結(jié)果1再生障礙性貧血患者骨髓BMMNC中IL27P28和EBI3和IL27R的亞單位GP130MRNA表達水平高于正常對照組P005。2再生障礙性貧血患者骨髓上清中IL27的濃度均高于正常對照P結(jié)論再生障礙性貧血患者骨髓中增高的IL27可能通過促進TNFΑ和IFNY產(chǎn)生參與其發(fā)病機制。

簡介：中山大學博士學位論文BATF2在原發(fā)性肝癌中的表達及其對肝癌細胞生物學行為的影響THEEXPRESSIONOFBATF2GENEINHEPATOCELLULARCARCINOMAANDITSEFFECTSONTHEBIOLOGICALBEHAVIOROFHUMANHEPATOCELLULARCARCINOMACELLS專業(yè)腫瘤學博士研究生馬海清膨南陟燁尬，猶嘶’中山大學腫瘤防治中心2010年11月廣州學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔。學位論文作者簽名弓，留角，、日期LF7年，／月，匆日學位論文使用授權聲明本人完全了解中山大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權保留學位論文并向國家主管部門或其指定機構送交論文的電子版和紙質(zhì)版。有權將學位論文用于非贏利目的的少量復制并允許論文進入學校圖書館、院系資料室被查閱。有權將學位論文的內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索?？梢圆捎脧陀?、縮印或其他方法保存學位論文。學位論文作者簽名易毋啊翩獬秘1嗍觸伽九

簡介：點擊查看更多瑞戈非尼對醛縮酶B高表達肝癌細胞系的生物學功能影響研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：分類號分類號學號學號D201178376D201178376學校代碼學校代碼1048710487密級密級博士學位論文靶向OCT4的MICRNA系統(tǒng)性篩選及對泌尿系腫瘤細胞生物學行為的影響學位申請人學位申請人戴勁戴勁學科專業(yè)學科專業(yè)外科學外科學（泌尿外科泌尿外科）指導教師指導教師陳志強陳志強教授教授答辯日期答辯日期20142014年5月獨創(chuàng)性聲明獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明，本學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果的總結(jié)。盡我所知，除文中已經(jīng)標明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本人將承擔本聲明引起的一切法律后果。學位論文作者簽名日期年月日學位論文版權使用授權書學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解學校有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權華中科技大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。保密□，在_____年解密后適用本授權書。本論文屬于不保密□。（請在以上方框內(nèi)打“√”）學位論文作者簽名指導教師簽名日期年月日日期年月日

簡介：背景骨缺損和骨不愈合是臨床常見病，如何修復骨缺損和促進骨愈合也是骨組織工程研究的重要內(nèi)容。支架、細胞和因子是骨組織工程研究的三大要素。近年來，有關骨生長因子的研究日益增多，BMP2（BONEMPHOGEICPROTEIN2，骨形態(tài)發(fā)生蛋白2）是最重要的骨生長因子之一，其促進骨修復的功能已得到相關研究證實。BMP2在體內(nèi)含量很少，基因重組表達技術則實現(xiàn)了RHBMP2（RECOMBINANTHUMANBONEMPHOGEICPROTEIN2，重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2）的批量生產(chǎn)，使其臨床應用成為可能，但RHBMP2的應用存在體內(nèi)半衰期短、降解快的問題，如果增加其使用量將又會帶來一系列的并發(fā)癥，使其臨床應用嚴重受限。微球緩釋技術是解決這個問題的方法之一，RHBMP2與微球復合，不但能保護因子，還能延長其在體內(nèi)的作用時間，減少并發(fā)癥和治療費用。所以，本研究的目的是為RHBMP2制備一種納米載體，使其更廣泛地應用于骨科疾病的治療。目的1制備重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2明膠納米微球（RECOMBINANTHUMANBONEMPHOGEICPROTEIN2GELATINNANOPARTICLE，RHBMP2GN，檢測其理化特性和釋藥特點。2檢測RHBMP2GN對BMSCS（BONEMARROWMESENCHYMALSTEMCELLS）的增值和分化效應。3為RHBMP2的臨床應用提供合適的納米載體，為下一步動物實驗提供必要的依據(jù)和更加可靠的解決方案。方法1RHBMP2GN的制備及檢測（1）制備空白明膠納米微球。（2）掃描電鏡（SCANNINGELECTRONMICROSCOPE，SEM）觀察明膠納米微球的表面形態(tài)，計算其平均粒徑，透射電鏡（TRANSMISSIONELECTRONMICROSCOPE，TEM）觀察明膠納米微球的內(nèi)部結(jié)構，粒度分析儀檢測其吸水后的平均粒徑，計算其溶脹率。（3）將RHBMP2和GN進行復合制備RHBMP2GN，利用酶聯(lián)免疫吸附法（ENZYMELINKEDIMMUNOSBENTASSAY，ELISA）測定加載的RHBMP2量，計算其包封率和載藥量。（4）將RHBMP2GN分散到磷酸鹽緩沖液（PBS）中，檢測其累計釋藥的百分率。2RHBMP2GN對BMSCS的生物效應1利用CCK8法檢測RHBMP2GN對BMSCS早期增殖效應的影響。2利用ALP染色法檢測RHBMP2GN對BMSCS早期分化效應的影響。3利用茜素紅S鈣結(jié)節(jié)染色法檢測RHBMP2GN對BMSCS晚期分化效應的影響。結(jié)果1RHBMP2GN的制備（1）“二次凝聚法”成功制備空白明膠納米微球。（2）明膠納米微球的物理特性明膠納米微球表面光滑，球形規(guī)整，內(nèi)部多孔隙、通道，分散均一，干粉狀態(tài)平均粒徑為17149NM，吸水膨脹后平均粒徑為31301NM，溶脹率為183。（3）成功制備RHBMP2GN，其包封率和載藥量分別是9813±0131％和5889±0079NGMG。（4）RHBMP2GN的體外釋藥時間在一個月以上。2RHBMP2GN對BMSCS的生物學作用（1）RHBMP2GN組在第4天和第7天的細胞增值作用均明顯優(yōu)于對照組和明膠納米微球組（P結(jié)論1“二次凝聚法”成功制備空白明膠納米微球，使RHBMP2GN具有較高的包封率和載藥量，體外緩釋效果良好。2RHBMP2GN通過明膠納米微球的降解逐步釋放RHBMP2，延長了RHBMP2的作用時間，明顯促進了BMSCS的早期增殖和向成骨細胞分化。

簡介：博士學位論文RACLGTPASE高度活化在造血干祖細胞惡性轉(zhuǎn)化中的作用研究A20對急性淋巴細胞白血病細胞生物學功能的影響及機制研究所院姓名指導教師導師小組學科專業(yè)研究方向完成時間血液學研究所陳樹英鄭國光教授、饒青教授王建祥教授、王敏教授細胞生物學腫瘤微環(huán)境2015年5月中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院清華大學醫(yī)學部博士學位論文第一部分RACLGTPASE高度活化在造血干祖細胞惡性轉(zhuǎn)化中的作用研究2

簡介：目的1探討低濃度砷暴露造成人體DNA氧化損傷情況。2探討低濃度砷暴露對人紅細胞膜蛋白的影響。3探討砷毒性的可能作用機制。方法選擇山西大同某村長期飲水型低濃度砷暴露女性54人（病例組）和經(jīng)濟水平相近村莊飲水砷濃度正常的女性18人（對照組）作為研究對象，采集當?shù)厮?、研究對象尿液及血液樣本，并運用氫化物發(fā)生原子熒光光譜法測定水砷及研究對象體內(nèi)尿砷水平；用酶聯(lián)免疫吸附法聯(lián)合酶標儀測定研究對象尿中8羥基脫氧鳥苷8OHDG水平；提取研究對象外周血紅細胞膜，并采用SDSPAGE電泳方法觀察分析紅細胞膜蛋白的變化情況。結(jié)果1經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)，該地區(qū)水砷平均濃度3363±367ΜGL，為低濃度砷暴露地區(qū)。2在低濃度砷暴露環(huán)境下的人群，與對照組人群相比體內(nèi)尿砷及尿8OHDG水平均顯著升高（P＜005）。3尿中8OHDG水平與水砷暴露程度呈顯著正相關RS0847，P＜005。4尿中8OHDG水平與尿砷水平呈顯著正相關（R0893P＜005）。5皮膚損害發(fā)生率與尿中8OHDG水平呈正相關R0420P＜005。6紅細胞膜蛋白損傷SDSPAGE電泳分離得到血影蛋白SPECTRIN、連接蛋白B21、帶3蛋白（B3）、帶41蛋白（B41）、帶49蛋白B49。隨著砷暴露濃度的增加，帶21蛋白含量呈現(xiàn)一定的下降趨勢，帶3蛋白含量則呈現(xiàn)一定的上升趨勢。高濃度水砷暴露組的帶21蛋白含量和帶3蛋白含量與對照組相比，差異均有一定的統(tǒng)計學意義P＜005；其余各濃度暴露組血影蛋白、帶41蛋白及帶49蛋白含量變化均無統(tǒng)計學意義P＞005。7該地區(qū)女性居民體內(nèi)紅細胞膜主要蛋白（血影蛋白和帶3蛋白）含量增高趨勢與飲水砷暴露程度的增加呈顯著正相關（RS0734P＜005）8該地區(qū)女性居民體內(nèi)紅細胞膜主要蛋白（血影蛋白和帶3蛋白）含量增高趨勢與尿砷水平的增加呈顯著正相關R0778，P＜005結(jié)論1低濃度慢性砷中毒患者尿8OHDG含量明顯增高，其增加趨勢與水砷暴露程度及尿砷水平的增加有良好相關性。2低濃度飲水砷暴露對該地區(qū)女性居民血液中紅細胞膜蛋白產(chǎn)生毒性作用，帶21蛋白和帶3蛋白含量發(fā)生異常改變。血液中紅細胞膜主要蛋白含量的增加與水砷暴露程度及尿砷水平的增加均有良好的相關性。3尿8OHDG值的增加及外周血紅細胞膜蛋白的改變可能是慢性砷中毒的早期生物學標志。4低濃度砷暴露人群體內(nèi)已經(jīng)出現(xiàn)DNA氧化損傷，氧化應激反應是慢性砷中毒的可能致病機制之一。5本研究地區(qū)水砷平均濃度3363±367ΜGL，當?shù)厝巳簷C體就出現(xiàn)DNA氧化損傷情況，提示我國農(nóng)村飲用水砷衛(wèi)生標準的安全性有待商榷。

簡介：分類號分類號730231學校代碼學校代碼10392學科專業(yè)代碼學科專業(yè)代碼100214學號號2101003576福建醫(yī)科大學碩士研究生畢業(yè)論文CD133CXCR4CD133CXCR4結(jié)直腸癌腫瘤細胞的生物學特性及對結(jié)直腸癌腫瘤細胞的生物學特性及對結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的影響結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的影響THEBIOLOGICALACTERISTICSOFCD133CXCR4COLECTALTUMCELLSEFFECTOFCD133CXCR4COLECTALTUMCELLSONTHEHEPATICMETASTASISOFCOLECTALCANCER學位類型型醫(yī)學碩士醫(yī)學碩士所在學院院省立臨床醫(yī)學院省立臨床醫(yī)學院研究生生徐可學科、專業(yè)學科、專業(yè)腫瘤學腫瘤學導師師楊春康楊春康教授教授研究起止日期研究起止日期2011年12月至月至2013年1月答辯日期期2013年5月二○一三年三月二○一三年三月1目錄一、論文CD133CXCR4結(jié)直腸癌腫瘤細胞的生物學特性及對結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的影響中文摘要2英文摘要3前言5材料與方法7結(jié)果16討論24結(jié)論30參考文獻31致謝34二、綜述CXCR4腫瘤干細胞生物學特性及相關研究進展綜述內(nèi)容35參考文獻40

簡介：脂肪干細胞ADIPOSEDERIVEDSTEMCELLS，S是脂肪組織中存在的一種成體干細胞，具有便于取材，可向三個胚層方向分化等優(yōu)點。本實驗主要研究S的體外分離培養(yǎng)條件優(yōu)化；S向脂肪細胞、成骨細胞、精子細胞的誘導分化；REVERSINE對S生物學特性的影響。通過MTT、免疫組化及RTPCR證明，分離培養(yǎng)的S在35代內(nèi)保持良好的生物學特性，P5、P15、P25細胞倍增時間分別為346H、378H、383H；持續(xù)表達細胞表面抗原CD29、CD44，不表達造血干細胞特異表面抗原CD45；表達特異性基因CD29、CD34、CD90、SCA1、CMYC，不表達SOX2和OCT4。說明本實驗采用的S的分離培養(yǎng)方法能夠保持S的未分化狀態(tài)。S在成脂誘導劑誘導下分化為脂肪細胞，誘導第六天油紅O染色計算P5S誘導率為783％±92％，P15S誘導率為739％±87％，P25S誘導翠為670％±152％，不同代數(shù)間誘導率無顯著性差異；在成骨誘導劑誘導下分化為成骨細胞，第11天進行茜素紅染色，鈣結(jié)節(jié)被染成深紅色，放大100倍視野下計數(shù)被染色的鈣結(jié)節(jié)數(shù)量，P5S為15±24個，P15S為13±36個，不同代數(shù)之間無顯著性差異；P5S與睪丸組織共培養(yǎng)，10天后RTPCR結(jié)果顯不表達精子細胞特異基因PRM1、ACR。REVERSINE終濃度大于5ΜMOLL時對S有明顯的細胞毒性，濃度為1ΜMOLL時，對S的增殖率無明顯影響，但可以顯著增加S向脂肪細胞，成骨細胞誘導分化的效率。本實驗建立了S分離培養(yǎng)體系，S可以在此體系內(nèi)長期培養(yǎng)并保持良好的生物學特性；證明了S具有在適當誘導條件下向脂肪細胞、成骨細胞以及精子細胞分化的潛能；同時證明了REVERSINE可以提高S向脂肪細胞、成骨細胞分化的轉(zhuǎn)分化率，是一種有效的提高S分化潛能的小分子。