簡介：血液系統(tǒng)惡性腫瘤是當今醫(yī)學上的頑癥之一，細胞膜表面分化抗原CD分子的研究能提高對其生物學行為的認識，有利于診斷治療。通過單克隆抗體單抗進而研究細胞膜抗原生物學特性是蛋白質(zhì)功能研究的重要方法。ZCHZHEJIANGCHILDRENSHOSPITAL2B8A簡稱ZCH2B8A是本科研究室自行研制的鼠抗人造血細胞分化抗原的單抗，已經(jīng)提交第8屆國際人類白細胞分化抗原協(xié)作組會議HLDA8鑒定，根據(jù)HLDA8總部經(jīng)大量研究的反饋信息表明該抗體識別的抗原性質(zhì)不明，屬國際上尚未認識的血細胞膜新的分化抗原新的CD分子。因此，對其識別抗原編碼基因克隆與測序及其生物學功能研究有著重要的科學意義和潛在的應用前景。1直標鼠抗人新單抗ZCH2B8AFITC的研制及鑒定為了深入研究ZCH2B8A抗體識別抗原的表達譜及生物學功能，有利于利用流式細胞儀作多色分析和抗原阻滯試驗，減少實驗誤差，擬將該抗體研制成異硫氰酸熒光素FLUESCEINISOTHIOCYANATEFITC直接標記的抗體2B8AFITC。在清潔級BALBC小鼠腹腔內(nèi)注射1106能分泌2B8A單抗2B8AAB的雜交瘤細胞，制備大量2B8AAB腹水。通過ECONOPAC蛋白A柱進行親和層析，純化2B8AAB，純化后的2B8AAB經(jīng)SDSPAGE凝膠電泳檢測，純度高，達99％以上。采用改良MARSSHALL法，用FITC標記純化的2B8AAB，多余FITC經(jīng)PBS充分透析除去，用紫外分光光度計測定A495A280比值為056，介于FITC熒光抗體的理想比值03～10之間。流式細胞術(shù)檢測顯示，直標單抗2B8AFITC與間接標記法2B8AGAMFITC在RAJI細胞上的反應峰型相似，雖然前者的平均熒光強度指數(shù)MFI，9861略低于后者10689，但陽性反應率基本一致，分別為9911％和9900％，表明直標熒光抗體2B8AFITC制備成功。2ZCH2B8A單抗及其識別抗原的生物學特性為了闡明2B8AAB及其抗原的功能和臨床應用前景，對抗原和抗體的有關生物學特性進行了初步探討。12B8AAB與正常和惡性腫瘤細胞的反應性采用多參數(shù)流式細胞術(shù)FCM檢測2B8AAB與正常及惡性腫瘤細胞的反應性，分析2B8AAB的反應譜，以陽性細胞數(shù)≥20％為陽性。22B8AAG對胰酶消化的抵抗能力2B8AAG在胰酶消化過的RAJI細胞表面表達明顯降低，由未消化細胞上8357％的高表達降至2699％，提示2B8AAB識別的抗原性質(zhì)可能是蛋白結(jié)構(gòu)，而非糖基之類的分子。32B8AAB對NALM6細胞生長的影響應用足以封閉NALM6細胞表面抗原的2B8A雜交瘤細胞培養(yǎng)上清含2B8AAB與之反應后繼續(xù)培養(yǎng)，并于24H、48H、72H和96H小時計數(shù)細胞數(shù)量。結(jié)果顯示24H、48H、72H和96H細胞數(shù)量與對照組比較，無顯著統(tǒng)計學意義P值分別為0132、0714、0265和0763，說明2B8AAB對NALM6細胞生長無影響。42B8AAB與耐藥和非耐藥白血病細胞株之間的反應性比較2B8AAB與HL60及其耐長春新堿VCR耐藥細胞株HL60VCR均反應，陽性細胞數(shù)分別為2964％和4770％，非參數(shù)檢驗比較，P0343＞005，沒有統(tǒng)計學意義；2B8AAG在K562母株上中度表達4306％，而在其耐藥株K562HHT高三尖杉酯堿低表達1776％，耐藥株K562ADR阿霉素和K562VCR少量表達353％和444％，通非參數(shù)檢驗分別比較K562與K562HHT、K562ADR和K562VCR的中位陽性細胞數(shù)，P值分別為0114＞005、0029＜005和0029＜005，2B8AAG在K562耐藥株上的低表達規(guī)律提示2B8AAG可能與耐藥程度有關，其機理尚需進一步研究。3ZCH2B8A抗原編碼基因的克隆和測序鑒于2B8A抗原抗體系統(tǒng)為國際首創(chuàng)，相關的生物學特性和功能均未闡明，對2B8AAB識別抗原的編碼基因進行克隆分析是闡明該抗原抗體系統(tǒng)生物學特性的關鍵方面。經(jīng)胰酶消化后觀察抗原抗體反應性的研究結(jié)果表明2B8AAG為蛋白質(zhì)抗原，所以本研究采用T7噬菌體展示系統(tǒng)，觀察2B8AAB識別抗原的能力，克隆2B8AAG的編碼基因并測定其核苷酸序列。由于2B8AAB與RAJI細胞膜抗原有明顯的反應性，RAJI細胞CDNA中必定存在編碼2B8AAB識別抗原的基因序列，于是我們首先建立T7噬菌體展示的RAJI細胞CDNA表達文庫。。初始文庫滴度太低，將文庫擴增后利用和保存，擴增后滴度為251010PFUML。文庫構(gòu)建成功，利用2B8AAB淘洗文庫，經(jīng)過五輪淘洗使2B8AAG陽性噬菌體富集達最大量，然后通過噬斑挑取及PCR技術(shù)，成功獲得了6個陽性克隆。6個陽性噬斑的CDNA插入片段序列測定后經(jīng)美國基因庫核酸序列查找BLASTN程序進行同源性搜索，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其中5個插入片斷基因序列與美國NCBI基因庫中一個假定基因BC094882是同源序列；再通過DNASIS軟件將5個插入片段的基因序列轉(zhuǎn)換成的蛋白序列后與BC094882基因編碼的蛋白序列比較，發(fā)現(xiàn)正好與BC094882蛋白羧基末端的228個氨基酸序列完全吻合，但與其羧基末端第229位～236位已測出的8個氨基酸序列完全不同。此基因在淋巴結(jié)生發(fā)中心B細胞中表達，基因全長2436BP，開放閱讀框為61～2280BP，編碼739個氨基酸。由此推測，2B8AAB所識別的抗原蛋白基因可能是假定基因BC094882，但仍然需要進一步研究證實。

簡介：博分類號密級坌莖UDC學號2008129第三軍蟹犬垮士學位論文NF。VD3調(diào)控MICRORNAS對食管鱗癌細胞的生物學作用及機制研究李娟指導教師白云教授第三軍醫(yī)大學基礎部醫(yī)學遺傳教研室，400038申請學位級別博士科學學位專業(yè)名稱遺傳學論文提交日期2012年5月論文答辯B期2012年5月學位授予單位和B期第三軍醫(yī)大學2012年月答辯委員會主席盎LJ氳獨評閱人輕鰹趕皇拙圇I氫立，熏』生工盤縫二。一二年五月IIIIIIIIIIIIIILLLLLLLLLLLLLLLLLLLLLLLIIIIIIIIIIIIY2163728第三軍醫(yī)大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明秉承學校嚴謹?shù)男ｏL和科研作風，本人申明所呈交的論文是我本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C構(gòu)的學位或證書而使用過的材料，與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學位論文與資料若有不實之處，本人承擔一切相關責任。論文作者簽名必日期呈至第三軍醫(yī)大學研究生學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解第三軍醫(yī)大學有關保護知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬第三軍醫(yī)大學。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為第三軍醫(yī)大學。學校有權(quán)保留并向國家有關部門或機構(gòu)送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學?？梢怨紝W位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，可以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名查些指導教師簽名么』3日期蘭芏皇

簡介：我國是一個肝病大國，隨著科技經(jīng)濟的飛速發(fā)展，人們的生活節(jié)奏加快，人們的健康也頻頻亮起紅燈，肝炎、肝硬化與肝癌的發(fā)病率越來越高，對社會危害嚴重。因而深入研究肝損傷與再生的分子生物學機制，開發(fā)治療肝病新藥意義重大。新的肝細胞生長因子HPPCN就是在此背景下誕生的一種具有特異性的促肝癌細胞系增殪活性的單體。本研究的主要目的是對HPPCN重組表達產(chǎn)物進行純化并對純化產(chǎn)物進行體內(nèi)功能學研究。根據(jù)HPPCN的分子量、等電點等特性，采用兩步陰離子交換層析法純化蛋白，考馬斯亮藍法測定蛋白濃度，HPLC和凝膠掃描分析其純度，WESTERNBLOT法分析其免疫原性，MALDITOF測定其分子量。結(jié)果，采用兩步陰離子交換層析純化的蛋白純度達94％，純化總得率為85％，蛋白總量和純度均達體內(nèi)外活性研究的要求。采用MTT法和HTDRDNA摻入法檢測純化的HPPCN對肝癌細胞系SMMC7721的促增殖活性及其劑量關系；通過鼠肝原位灌流法分離培養(yǎng)大鼠原代肝細胞，HTDRDNA摻入法檢濺HPPCN對原代培養(yǎng)大鼠肝紐胞的促增殖作用，進一步驗證HPPCN的體外促肝細胞增殖活性。結(jié)果表明純化HPPCN能顯著促進SMMC7721和原代培養(yǎng)大鼠肝細胞的增殖并有一定的劑量依賴性。體內(nèi)活性研究中，首先采用經(jīng)典的部分肝切除模型，檢測殘肝中HPPCN表達量的時間動態(tài)變化，結(jié)果表明HPPCN與肝再生密切相關建立CCL和CONA致小鼠急性肝損傷模型以及CCL復合造模法制備大鼠肝纖維化模型檢測血清生化指標變化及肝臟病理觀察等指標，結(jié)果表明，HPPCN對急慢性肝損傷有顯著治療和修復作用。在這些模型中均發(fā)現(xiàn)了一個現(xiàn)象給藥組出血比生理鹽水對照組嚴重，因此又建立了促進血管生成實驗模型雞胚絨毛尿囊膜血管生成實驗，結(jié)果表明，HPPCN的促血管生成作用沒有顯著性差異。

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簡介：山東省醫(yī)學科學院碩士學位論文雌激素對不同ER狀態(tài)乳腺癌細胞株生物學性狀的影響及與FAK的關系姓名王文靜申請學位級別碩士專業(yè)腫瘤學指導教師王明玉20080401山東省醫(yī)學科學院碩士學位論文作用。目前國內(nèi)外關于雌激素和FAK的相關性報道不多，本實驗采用體外研究方法，觀察不同濃度雌激素刺激后不同雌激素受體狀態(tài)乳腺癌細胞株生物學性狀的●●?！?。’、__。’‘。_’7一’_‘’’’改變及FAK的轉(zhuǎn)錄表達水平，以進一步了解雌激素及FAK在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展中的作用，為今后乳腺癌治療的新靶點提供理論支持。目的檢測不同濃度雌激素作用后不同雌激素受體ER狀態(tài)的乳腺癌細胞的增殖、一侵襲轉(zhuǎn)移及FAK的表達情況，探討雌激素與FAK是否通過同一信號傳導通路促進腫瘤細胞的增殖、侵襲轉(zhuǎn)移及雌激素與FAK是否存在反饋關系。方法采用體外研究方法，觀察不同濃度雌激素刺激后不同雌激素受體狀態(tài)乳腺癌細胞株生物學性狀及FAK的轉(zhuǎn)錄表達水平。MTT實驗測定不同濃度雌激素處理后腫瘤細胞的存活率并選取適宜雌激素濃度以進行后續(xù)試驗；TRANSWELL法測定不同_，，、H’●濃度雌激素處理后腫瘤細胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力；實時RTPCR檢測不同濃度雌激素處理后腫瘤細胞中FAK基因的轉(zhuǎn)錄水平；WESTERNBLOT檢測不同濃度雌激素處理后腫瘤細胞中FAK基因的表達水平。綜合分析雌激素及FAK在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展中的作用及相互之間關系。采用SPSSL30統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，各組間差異用單因素方差分析、LSDT檢驗、SNKQ檢驗，多樣本方差齊性檢驗用LEVENE法。檢驗水準均為A005，P005為差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)果1本研究結(jié)果顯示，在一定范圍內(nèi)，雌激素對MCF7細胞具有促生長作用，到達1X10。9MOL／L對MCF7細胞的促生長作用進入平臺期；而任何濃度的雌激素對MDAMB231細胞均無促生長作用。并篩選出后續(xù)實驗的雌激素濃度分別為OMOL／L1X10。1LMOL／L11010MOL／L；1X109MOL／L。2隨雌激素濃度的逐漸升高，MCF一7細胞侵入濾膜的數(shù)量也逐漸增多，對照組與各處理組之間及各處理組兩兩之間差異均有統(tǒng)計學意義P005；不同濃度雌激素處理后，不同處理組MDAMB23L細胞侵入濾膜的數(shù)量與對照組比較無明顯差異胗O05，各處理組之間的差異也無統(tǒng)計學意義胗O05。3RTPCR試驗結(jié)果顯示，隨雌激素濃度逐漸升高，MCF7細胞和MDAMB2

簡介：點擊查看更多幾丁糖對增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纖維細胞的生物學作用.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：點擊查看更多成人骨髓間充質(zhì)干細胞生物學特性及低溫凍存對其影響的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：點擊查看更多ECSOD基因體外轉(zhuǎn)染對恒河猴骨髓間充質(zhì)干細胞生物學功能的影響.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的通過動態(tài)的方法觀察卵圓細胞的主要生物學特征及其在肝癌發(fā)生過程中的演變規(guī)律，方法實驗通過構(gòu)建實驗性肝癌模型和卵圓細胞株連續(xù)傳代的方法建立動態(tài)的觀察體系，運用常規(guī)HE染色、免疫組織細胞化學、酶細胞化學、粘液染色和RTPCR等技術(shù)，揭示卵圓細胞在肝癌發(fā)生過程中以及在連續(xù)傳代過程中的演變規(guī)律和分子表達特征。結(jié)果1實驗性肝癌模型不同階段有著不同的形態(tài)特征。隨著誘癌時間的延長，逐漸出現(xiàn)卵圓細胞增生，到第14周時達高峰，并出現(xiàn)癌前病變和膽管細胞癌；之后增生的卵圓細胞逐漸減少，而癌灶不斷擴大，到第24周時形成大片的混合性肝癌。2OV6標識出卵圓細胞在實驗性肝癌模型中的行蹤。3卵圓細胞表達OV6、AFP、CKIT、GGT、GSTP、M2PK等標志，而不表達成熟肝細胞標志LPK、ALBUMIN。結(jié)論1以3，MEDAB為誘癌劑構(gòu)建的實驗性肝癌動物模型，很好的模擬了從卵圓細胞增生到肝癌發(fā)生、發(fā)展的自然進程，形態(tài)學特征明顯，有助于癌變過程的動態(tài)研究。2以OV6作為卵圓細胞的示蹤標記，很直觀地說明了卵圓細胞出現(xiàn)、增生及演變規(guī)律，與實驗性肝癌發(fā)生的過程相吻合，提示肝癌的發(fā)生與卵圓細胞的異常分化有關。3GSTP和M2PK在卵圓細胞株OC3各代內(nèi)的表達與骨髓干細胞向肝細胞誘導分化的中間階段幼稚肝細胞階段的分子表達特征極為相似，加上肝癌動物模型中CKIT的陽性表達，均提示卵圓細胞和骨髓干細胞之間可能存在某種淵源聯(lián)系。4卵圓細胞同時表達AFP和GGT，兼肝細胞和膽管上皮細胞的分子表達特征于一身，提示卵圓細胞具有向肝細胞和膽管上皮細胞雙向分化的潛能。5OV6，CKIT，GSTP和M2PK在卵圓細胞株OC3內(nèi)從29代到79代持續(xù)表達，可作為卵圓細胞的基本分子標志。

簡介：研究目的建立一株人源性成纖維細胞系通過逆轉(zhuǎn)錄病毒介導將人端粒酶催化亞單位HTERT導入正常人成纖維細胞以恢復細胞端粒酶活性進而延長其壽命并分析其生物學特性結(jié)論國內(nèi)外大量研究表明將人端粒酶催化亞單位HUMANTELOMERASECATALYTICSUBUNITHTERT基因?qū)肴梭w正常細胞誘導端粒酶活性表達可使細胞永生化該試驗通過逆轉(zhuǎn)錄病毒介導將HTERT全長CDNA導入表達HTR的正常人成纖維細胞在誘導端粒酶活性表達的同時成纖維細胞培養(yǎng)壽命延長迄今已延長培養(yǎng)壽命達70PDS感染前后細胞形態(tài)、增殖能力及增殖周期無明顯改變核型分析顯示人成纖維細胞系細胞DNA保持正常二倍體相對于轉(zhuǎn)導原癌基因、放射線或腫瘤病毒等方法永生化的細胞而言端粒酶永生化的細胞具有正常的生長率、核型呈現(xiàn)接觸抑制和錨著依賴型不具有致瘤性和軟瓊脂克隆形成能力其生物學特性與正常細胞相似

簡介：點擊查看更多皮質(zhì)骨和其它不同來源兔成骨細胞的體外培養(yǎng)和生物學特性比較.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：九十年代以來國際和國內(nèi)研究小組先后報道上皮性腫瘤細胞表達免疫球蛋白綜合當前國際研究進展以及我們已有的研究基礎和優(yōu)勢我們提出上皮性腫瘤細胞表達免疫球蛋白是一共同現(xiàn)象為了回答這個科學問題該文研究利用WESTERN免疫印跡、免疫組化、ELISA等技術(shù)結(jié)合RTPCR、NTHERN雜交等方法從腫瘤細胞系著手從蛋白水平和基因水平確定上皮性腫瘤細胞系MGC胃癌細胞、MCF7乳腺癌細胞、SW480結(jié)腸癌細胞、HNE2鼻咽癌細胞、HELA宮頸癌細胞表達的免疫球蛋白重鏈為ALPHA輕鏈為KAPPA但此ALPHA鏈與KAPPA鏈不同于正常的ALPHA和KAPPA鏈同時推論癌IGA是以SIGA的形式存在于細胞外

簡介：第一軍醫(yī)大學碩士學位論文不同生長因子對骨髓基質(zhì)細胞體外培養(yǎng)生物學特性的影響姓名李才良申請學位級別碩士專業(yè)口腔內(nèi)科指導教師劉宏偉200261中文摘要／F研究背景牙周病造成牙周支持結(jié)構(gòu)的破壞，牙周附著的喪失，最終導致牙齒的脫落。牙周病治療目的是促使牙周新附著形成。牙周傷口愈合質(zhì)量主要取決于牙周組織中具有再生分化能力細胞的數(shù)量，這種細胞在牙周膜中具有可分化潛能，可分化成為成纖維細胞、成骨細胞、成牙骨質(zhì)細胞等終極分化細胞。對于牙周病人來說，健康牙周膜細胞來源有限，尤其是老年患者，而這類人群的牙周病發(fā)病率較高。如何獲取足夠數(shù)量具有再生潛能的細胞，是牙周引導組織再生治療的關鍵。BMSC具有良好的增殖、分化潛能，在不同環(huán)境和相應的細胞因子作用下可分別分化為成骨細胞、成軟骨細胞、肌細胞、脂肪細胞等不同的細胞；同時，BMSC還具有取材容易、安全、損傷小，來源豐富，供區(qū)無明顯并發(fā)癥等特點，適合作為牙周引導組織再生術(shù)的種子細胞。劉宏偉等“1將體外培養(yǎng)的自體BMSC用膠原膜作移植載體，移植到狗下頜后牙的根分叉缺損中，發(fā)現(xiàn)BMSC移植可加快牙槽骨的再生目的并有新生牙骨質(zhì)和牙周膜形成。心／本研究通過體外培養(yǎng)BMSC，用細胞生長因子RHBFGF、RHTGFF口【和RHBMP一2作為培養(yǎng)條件，用MTT法檢測它們對BMSC增殖的影響，檢測堿性磷酸酶活性，在增加礦化液誘導后，V～ONKOSSA一鎏魚二檢測它們對BMSC分化的影響。尋找最佳體外擴增BMSC的培養(yǎng)條件，為將來臨床應用研究提供基礎。F方法L體外培養(yǎng)BMSC，單獨或者聯(lián)合加入RHBFGF、RHTGF一131和RHBMP一2三種細胞因子，進行培養(yǎng)，細胞計數(shù)，繪制細胞生長曲線，計算細胞倍增時間，MTT法檢測細胞增殖情況，用堿性磷酸酶試劑盒檢測堿性磷酸

簡介：點擊查看更多bFGF基因轉(zhuǎn)染成骨細胞的生物學性質(zhì)及成骨研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：幽門螺桿菌HELICOBACTERPYLIHP與慢性胃炎、消化性潰瘍和胃癌的發(fā)生密切相關世界上的半數(shù)人口感染了HP因此HP已成為一個全球性的公共衛(wèi)生問題對HP感染的細胞微生物學的研究將有助于揭示HP的毒力因子攻擊宿主細胞的方式及細胞生物學行為的改變?yōu)镠P致病機理的闡明以及發(fā)現(xiàn)抑制HP活動的關鍵靶位等提供新的理論基礎HP除螺旋狀的細菌型外還存在一種在抗生素和宿主防御機制等因素作用下HP為抗逆生存而形成的多形性改變的球形體它可能是細菌活的非可培養(yǎng)狀態(tài)VIABLEBUTNONCULTURABLEVNC即休眠狀態(tài)條件適宜時可在體內(nèi)回復成螺旋狀HP多數(shù)學者認為HP球形體可能與HP感染遷延不愈反復發(fā)作及流行傳播密切相關該文對及其球形體與胃粘膜上皮細胞作用后兩種重要生物活性物質(zhì)一氧化氮合酶、環(huán)氧合酶的表達水平進行了研究建立了基于原代細胞培養(yǎng)的細胞微生物學研究的模型同時對HPSS1株球形休眠體在小鼠體內(nèi)的回復致病性進行了研究